FGF20及其受体FGFR2、FGFR3在小鼠毛囊形成和发育中的定位及表达研究

发布时间：2020-05-30 18:25

【摘要】：毛囊是哺乳动物皮肤的附属器官之一,表现为周期性生长,包括快速生长期(生长期)、凋亡驱动回归期(退化期)和相对静止期(休止期)。前人关于毛囊生长周期各阶段的研究表明,胚胎期14天(E14)皮肤开始形成真皮凝集,此时毛囊正式开始发育,出生后毛囊周期各阶段的大致时间为:1-11d为生长期,12-20d为退化期,21d为静止期,21d后进入下一个生长周期。有研究表明,成纤维细胞生长因子家族在毛囊生长发育过程中发挥作用。其中FGF20在小鼠初级真皮凝集和次级真皮凝集形成过程中发挥重要作用;FGFR2缺失可以导致小鼠表皮发育不良;但关于FGF20及其受体在小鼠胚胎期和第一毛囊生长周期的表达研究未见报道。本试验选取胚胎期E13-E18和出生后1/5/8/11/15/17/21/23 d小鼠背部皮肤组织,通过免疫组织化学、Western Blot和实时荧光定量PCR对FGF20、FGFR2和FGFR3在小鼠胚胎期和第一生长周期的表达进行研究,结果如下:在小鼠胚胎毛囊形成期,免疫组化结果显示FGF20和FGFR3在E13阳性反应微弱,E14-E18主要表现在表皮细胞、基板和毛钉。FGFR2阳性反应同样表现在表皮细胞、基板和毛钉,且表皮始终强阳性表达。RT-PCR、Western Blot和光密度数据分析显示FGF20和FGFR3在E13表达量最低,E16表达量最高;FGFR2在E13表达量最低。在毛囊第一生长周期,免疫组化结果显示FGF20、FGFR2和FGFR3在表皮、根鞘、毛乳头和皮脂腺等结构广泛表达;RT-PCR、Western Blot和光密度数据分析显示,FGF20在21d表达量最高,23 d表达量最低;FGFR2在5d表达量最高,15d表达量最低;FGFR3在11d表达量最高,21 d表达量最低。实验结果提示:(1)在毛囊形成期,FGF20和FGFR3可能在毛囊基板阶段向毛钉阶段转变过程中发挥促进作用,FGFR2可能在毛囊形成过程中发挥促进作用。(2)在毛囊第一生长周期,FGF20可能在诱导毛囊进入退化期发挥促进作用,FGFR2和FGFR3可能在毛囊生长期发挥促进作用。(3)在毛囊形成期,FGF20可能通过与FGFR3结合而发挥作用,在毛囊第一生长周期,FGF20与FGFR2和FGFR3的表达无一致性,提示FGF20可能不是FGFR2和FGFR3的主要配体。
【图文】：

３．２邋ＦＧＦ２０蛋白在小鼠胚胎背部皮肤组织的定量表达分析逡逑Ｗｅｓｔｅｒｎ邋Ｂｌｏｔ结果显示，，在小鼠胚胎毛囊形成期存在与ＦＧＦ２０多克隆抗体发生阳性逡逑反应的条带，其大小为２３ＫＤａ邋（图１－３）。通过分析得出ＦＧＦ２０蛋白在Ｅ１６表达量最逡逑高，Ｅ１３表达量最低。同Ｅ１３相比，Ｅ１４无显著差异，其余均显著高于Ｅ１３邋（Ｐ＜０．０５）。逡逑Ｅ１４、Ｅ１５、Ｅ１６、Ｅ１７邋和邋Ｅ１８邋分别是邋Ｅ１３邋的邋１．２２８９邋倍、１．７２２６邋倍、３．０８２８邋倍、２．２７２３邋倍、逡逑２．０３９１邋倍（图邋１－４）。逡逑Ｅ１３逦Ｅ１４逦Ｅ１５逦Ｅ１６逦Ｅ１７邋Ｅ１Ｓ逡逑ＦＧＦ２０邋一丨－逦￣逦—逦ｍｍａｍ逦２３ＫＤａ逡逑４邋＞邋Ｋ邋Ｉ邋）ａ逡逑图１－３邋ＦＧＦ２０蛋白在小鼠胚胎背部皮肤的蛋白免疫印迹结果图逡逑Ｆｉｇ．邋１－３邋Ｈｉｅ邋ｒｅｓｕｌｔｓ邋ｏｆ邋Ｗｅｓｔｅｒｎ邋Ｂｌｏｔ邋ｏｆ邋ＦＧＦ２０邋ａｎｄ邋Ｐ－ａｃｔｉｎ邋ｐｒｏｔｅｉｎ邋ｉｎ邋ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ邋ｐｅｒｉｏｄ邋ｏｆ邋ｍｏｕｓｅ邋ｂａｃｋ邋ｓｋｉｎ逡逑－１８邋－逡逑

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【学位授予单位】：山西农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：S813.1

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本文编号：2688537