牛磺酸对黄曲霉毒素B1中毒大鼠脾脏功能影响的研究

发布时间：2020-06-01 10:45

【摘要】：黄曲霉毒素B1(AFB1)是毒性最强的一种霉菌毒素,能广泛污染粮食与饲料,严重影响了畜禽业的发展。畜禽摄入AFB1后出现中毒现象,表现为免疫力降低,肝、脾和肾等器官损伤,其中脾脏损伤会引发机体发生炎症反应,降低免疫力。牛磺酸是人和大多数哺乳动物体内的一种条件性必需氨基酸。大量研究证明,牛磺酸具有抗氧化、抗炎、增强免疫力和保护机体等作用。但牛磺酸对AFB1中毒引起的脾脏功能损伤的作用尚不明确。本试验通过灌胃法制备AFB1中毒大鼠模型,同时饮水中添加不同剂量牛磺酸,检测血清和脾脏中抗氧化、免疫和炎性相关指标及炎症通路相关因子mRNA的表达,探讨牛磺酸对AFB1中毒大鼠脾脏功能的影响,以期为牛磺酸在畜牧业生产中预防AFB1中毒的应用提供理论依据。选取健康SD大鼠77只,随机分为7组,自由进食的基础上每组给予不同处理:C组(灌胃生理盐水,饮用自来水)、T组(灌胃生理盐水,饮用2%牛磺酸水)、DMSO组(灌胃DMSO,饮用自来水)、M组(灌胃AFB1,饮用自来水)、M+T1组(灌胃AFB1,饮用1%牛磺酸水)、M+T2组(灌胃AFB1,饮用2%牛磺酸水)、M+T3组(灌胃AFB1,饮用4%牛磺酸水)。试验期间观测大鼠精神状态及体重变化;试验结束后制作石蜡切片HE染色观察脾脏组织形态学变化;利用比色法和ELISA法测定血清和组织中脾脏免疫功能以及脾脏组织中氧化指标;利用荧光定量PCR法检测脾脏炎症通路相关基因mRNA表达水平。试验结果显示:1.牛磺酸可抑制AFB1中毒大鼠体重下降、改善脾脏组织的出血、淤血、核溶解等病理变化。2.牛磺酸可抑制AFB1中毒大鼠脾脏组织中过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、GSH-PX、T-AOC含量/活力的降低,阻止MDA含量的升高。3.牛磺酸可抑制AFB1中毒大鼠血液及脾脏组织中免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)和免疫球蛋白G(IgG)含量下降,阻止大鼠血液中白介素1β(IL-1β)、白介素6(IL-6)、肿瘤因子α(TNF-α)含量升高。4.牛磺酸可抑制AFB1中毒大鼠脾脏NF-kB炎症通路相关因子TLR4、CD14、MyD88、NF-κB、MaPk14、Nfkbia(IkBa)和Rela(p65)的mRNA表达量显著升高。试验结果表明:牛磺酸可明显改善AFB1中毒大鼠脾脏功能,其机制与提高脾脏抗氧化能力以及抑制NF-kB信号通路介导的炎症发生有关。
【图文】：

光泽感,体重,大鼠,精神状态

3 结果与分析3.1 大鼠的精神状态、体重、脾脏指数和组织学变化试验期间 C 组大鼠被毛整齐、正常采食、光泽感良好、体重平稳增加。与相比，M 组大鼠表现出明显的临床症状，表现为大鼠食欲减退，饮欲增加；杂乱，光泽感下降，精神沉郁，嗜睡，，身体常成蜷缩状，生长缓慢，攻毒后现消瘦现象。与 M 组相比：M+T1 组大鼠精神状态及生长状况无明显改善，体重增长缓慢，后期有下降趋势；而其它 2 个牛磺酸处理组大鼠精神状态明善，食欲增加，被毛光泽感上升，体重呈增长趋势。各组体重变化结果如图 3-1 所示。与 C 组相比，试验期间 M 组大鼠体重著降低（P<0.01）。与 M 组相比，M+T1 组大鼠体重无明显增长（P>0.05）其它 2 个牛磺酸处理组在整个试验期体重均有显著增高（P<0.05）。试验期+T2 组体重与 M+T3 组无明显差异（P>0.05）。C 组与 T 组、与 DMSO 组体重与相比无明显变化（P>0.05）。

脾脏指数,病理变化

图 3-2 脾脏指数Figure 3-2 The spleen index组大鼠脾脏组织学观察如图 3-3 所示。由图可见，C 组大鼠脾组织胞无明显病理变化；与 C 组相比，M 组大鼠脾组织出现淤血、细病理变化。与 M 组相比，M+T1 组脾脏镜检病理变化无明显改善；而T3 组可见脾组织结构明显清晰，脾组织出血、细胞水泡变性减轻照 1 组（C）对照 2 组 (M) 对照 3 组（DMSO
【学位授予单位】：沈阳农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：S859.8

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