结膜覆盖联合羊膜上清液点眼对犬深层角膜溃疡治疗效果的研究

发布时间：2020-06-12 16:17

【摘要】：本研究的目的是采集犬新鲜羊膜制备羊膜上清液并确定最佳保存条件;建立犬角膜深层溃疡模型,明确结膜覆盖联合犬羊膜上清液点眼治疗犬深层角膜溃疡的疗效。实验方法:(1)采集新鲜犬羊膜制备犬羊膜上清液。为确定保存条件,将犬羊膜上清液分为PBS保存组和DMEM保存组,置于4℃、-20℃、-80℃,于第1、20、40、80 d检测犬羊膜上清液中bFGF含量。(2)将15只碱烧伤联合机械损伤建立犬深层角膜溃疡模型成功的实验犬随机分成深层角膜溃疡组(C组)、结膜覆盖组(T1组)、结膜覆盖联合羊膜上清液点眼组(T2组)。于实验前第3、实验第1、7、14、21、45 d,检查犬眼房水中IL-1、IL-8、VEGF、MMP-1、MMP-2、MMP-9含量;于实验前第3、实验第1、4、7、10、13、16、19、21d,检测血液白细胞总数;于实验前第3-实验第21 d,检测双眼眼压、泪液分泌量。于实验第21、45 d每组随机抽取一只,采集角膜组织,进行病理组织学观察。实验结果:(1)DMEM组犬羊膜上清液中bFGF含量在第20 d极显著高于PBS组(p0.01);DMEM组第20 d在-80℃条件下保存显著高于4℃条件下保存(p0.05),第40、80 d,-80℃组极显著的高于-20℃组和4℃组(p0.01),第80 d,-20℃组与4℃组也出现显著差异(p0.05)。(2)与T1组相比,T2组犬眼房水中IL-1、IL-8、VEGF、MMP-1、MMP-2、MMP-9含量显著的降低(p0.05);血液中白细胞总数在中期(6-12d)显著降低(p0.05);泪液在中期(6、11-13 d)显著升高(p0.05);眼压在后期(12-21 d)极显著升高(p0.01)。与C组相比,T2组犬眼房水中IL-1、IL-8、VEGF、MMP-1、MMP-2、MMP-9含量极显著的降低(p0.01);(3)病理组织学结果显示第21 d,与T1组相比,T2组角膜上皮下血管更少,但结膜与角膜上皮之间血管更加丰富。与C组相比,角膜更加完整,角膜上皮下血管更少、更细。第45 d,与T1组相比,C组角膜炎症细胞浸润严重,血管较多,睫状体断裂。T2组角膜厚度更加适中,角膜下血管更少,炎症细胞浸润更低。实验结论:(1)犬羊膜上清液的长时间保存会造成bFGF含量的下降,但是DMEM保存液-80℃保存可以有效减缓bFGF含量的下降,为中短期保存提供保证。(2)结膜覆盖联合羊膜上清液点眼可以有效降低犬深层角膜溃疡角膜上皮下的炎性细胞浸润、减少角膜损伤、提高角膜透明度、加快眼压恢复,有效维持泪液分泌量,从而加快角膜修复。
【图文】：

3.3 实验结果3.3.1 犬深层角膜溃疡模型完成犬深层角膜溃疡模型后，眼观角膜表面出现圆形缺损，缺损面光滑。采用荧光素钠点眼显示角膜中部出现荧光绿色淡染区，形状规则，边缘整齐，溃疡表面平整，无穿孔现象。犬深层角膜溃疡模型造模成功。如图 1、2 所示。结膜覆盖联合羊膜上清液点眼对犬深层角膜溃疡治疗效果的研究

3.3 实验结果3.3.1 犬深层角膜溃疡模型完成犬深层角膜溃疡模型后，眼观角膜表面出现圆形缺损，缺损面光滑。采用荧光素钠点眼显示角膜中部出现荧光绿色淡染区，形状规则，边缘整齐，，溃疡表面平整，无穿孔现象。犬深层角膜溃疡模型造模成功。如图 1、2 所示。结膜覆盖联合羊膜上清液点眼对犬深层角膜溃疡治疗效果的研究
【学位授予单位】：黑龙江八一农垦大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：S858.292

【参考文献】

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本文编号：2709786