基于蛋白组学研究乌珠穆沁羊骨骼肌肌内脂肪差异

发布时间：2020-06-17 05:56

【摘要】：乌珠穆沁羊是优秀的肉用地方品种,它肉质鲜嫩多汁,膻味小,富含多种矿物质,脂肪肥而不腻,并且肌内脂肪是影响肉品分级的重要因素。本研究通过对8月龄乌珠穆沁羊不同部位骨骼肌肌内脂肪差异的研究,探索不同部位的肌内脂肪差异及其调控机制,为乌珠穆沁羊肉品分级奠定基础。首先对乌珠穆沁羊背最长肌、股二头肌、臂三头肌肌肉的粗脂肪与脂肪酸酸进行测定;之后利用IDA技术和SWATH技术鉴定股二头肌和背最长肌肌肉总蛋白与差异蛋白,分别对总蛋白和差异蛋白进行GO富集分析与KEGG通路分析,发现可能参与肌内脂肪代谢的通路与蛋白;最后挑选差异蛋白进行Western blot定量验证,主要研究结果如下:(1)通过对8月龄乌珠穆沁羊3个部位肌肉内的粗脂肪与脂肪酸检测发现,粗脂肪含量股二头肌极显著高于其他部位(P0.01);共鉴定出36种脂肪酸脂肪酸,其总含量股二头肌极显著高于其他部位(P0.01);C15:1、C16:0、C18:0、C18:2c6的含量在股二头肌中极显著高于其他部位(P0.01);股二头肌中对人体有益的不饱和脂肪酸,中链脂肪酸,n-3,n-6系列脂肪酸含量均高于其他两个部位,所以8月龄乌珠穆沁羊股二头肌肉品质最好,臂三头肌次之,背最长肌不及其他两个部位。(2)鉴定出乌珠穆沁羊背最长肌肌肉蛋白852个,股二头肌肌肉蛋白777个,两个部位肌肉总蛋白为998个,对总蛋白进行GO富集分析与KEGG通路分析发现,富集了 828个生物学过程(BP),161个细胞组分(CC),214个分子功能(MF)及64个通路。(3)筛选背最长肌与股二头肌肌肉差异蛋白87个,其中股二头肌上调蛋白质56个,股二头肌下调蛋白31个;在对差异蛋白进行GO富集分析与KEGG通路分析发现,富集了 126个生物学过程(BP),65个细胞组分(CC),52个分子功能(MF)以及25个通路,其中1/3通路与脂肪和脂肪酸代谢相关。(4)通过对差异蛋白ACADM在两个部位的表达量验证发现,在股二头肌的表达量极显著高于背最长肌(P0.01),与蛋白质组结果一致。(5)通过差异蛋白KEGG通路分析发现与脂肪代谢相关的重要通路—PPAR信号通路,并对通路中FABP3、CPT1B、ACADM蛋白构建蛋白互作网络发现,FABP3、CPT1B、ACADM蛋白可能通过与PPAR通路中PPARα、PPARγ相互作用来调节乌珠穆沁羊肌内脂肪代谢,更多的研究还需在细胞水平进行的验证。
【学位授予单位】：内蒙古农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：S826
【图文】：

图１邋ＰＳＥ肉、正常肉、ＤＦＤ肉逡逑Ｆｉｇ．邋１邋ＰＳＥ邋ｍｅａｔ，邋ｎｏｒｍａｌ邋ｍｅａｔ，邋ＤＦＤ邋ｍｅａｔ逡逑

脂肪细胞,粒体,肉碱,脂肪酸

酸在很多细胞中都可以被氧化分解，尤其是在肝脏与脂肪的细胞中。在脂肪酸的氧化是在线粒体中进行，细胞质中的脂肪酸要先进行活化，活体基质中，经过一系列酶的催化下被分解为乙酰ＣｏＡ，最后进入柠檬Ｈ２０和Ｃ０２。氧化分解过程主要有以下三个部分，如图３所示：逡逑肪活化逡逑脂肪酸在细胞质中，为了可以进入线粒体基质内，脂肪酸被线粒体外膜成酶（Ａｃｙｌ－ＣｏＡＳｙｎｔｈｅｔａｓｅ）的催化转化为脂酰ＣｏＡ，此反应不可逆。逡逑酰ＣｏＡ向线粒体转运逡逑中合成的脂酰ＣｏＡ要进入线粒体基质中才能被氧化，而长链的脂酰Ｃｏ过线粒体膜进入线粒体基质，需借助肉碱穿梭系统的转运才可以进入。在肉碱脂酰转移酶（Ｃａｒｎｉｔｉｎｅ邋Ａｃｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ）的催化下与肉碱相连，体膜。脂酰ＣｏＡ从细胞质进入线粒体使脂肪氧化分解至关重要的一步。逡逑脂肪酸Ｐ－氧化作用逡逑酸通过脂酰ＣｏＡ合成酶与肉碱穿梭系统的活化进入线粒体及之内，进－

【参考文献】