致蛇肺炎铜绿假单胞菌的分离鉴定及药敏试验

发布时间：2020-06-17 09:57

【摘要】：蛇是一种具有较高的经济价值的特种动物,在医药和食品工业方面都有非常广阔的前景。铜绿假单胞菌可产生多种致病因子损害机体组织,引起各种病变和炎症,给养殖业带来严重的经济损失。目前,铜绿假单胞菌感染家畜的报道很多,但是感染蛇的报道极少。2013年11月陕西商洛的某蛇养殖场的蛇突然发病,为了研究可能性病原,从蛇病变组织分离细菌,并对分离菌进行生化特性、耐药性、致病性以及16SrRNA序列分析,主要获得以下结果:1、从病蛇的病变组织中分离到2株共同性细菌,命名为B2和2G2。分离细菌可在普通培养基上生长,菌落呈圆形,菌落中等大小,光滑,湿润,边缘整齐,产生绿色色素,并向周围扩散,使培养基着色。在血平板上出现溶血环,麦康凯琼脂培养基上培养24 h后,菌落为成红色。对细菌进行革兰染色镜检,结果显示为阴性,中等大小杆菌,根据以上特点,分离菌疑似假单胞绿脓菌。2、将分离菌进行糖发酵试验,分离菌不发酵葡萄糖、乳糖、木糖、蔗糖等,M-R试验和V-P试验呈阴性,触酶和氧化酶试验呈阳性,符合铜绿假单胞菌的生化特性。3、对分离细菌的16SrRNA进行序列测定,并与标准参考菌株进行序列比对分析、构建系统进化树。结果表明,B2和2G2两株细菌的16SrRNA序列的同源性接近100%,B2和2G2的核苷酸序列与铜绿假单胞菌标准菌株核苷酸的同源性为99.9%,且这两株细菌与发表的菌株MW3A同源性最接近,由此可将分离株B2和2G2确定为铜绿假单胞杆菌。将其两株细菌的基因序列已经上传到Genbank,分别命名为:B2和2G2,登陆号分别为KP099548、KP099549。4、用药敏试验检测了两株分离菌对抗生素的耐药性,结果表明分离菌对红霉素、四环素、苯挫西林、氯霉素、氨苄西林、复方新诺明等具有很强的抗药性,为该蛇病的治疗提供了理论依据。5、致病性结果显示B2和2G2均有很强的毒性,腹腔注射72 h之后,试验组小白鼠全部死亡。死亡小白鼠的心脏、肝脏、肾脏、肺等组织均有明显病变。综上所述,本研究中的病例为铜绿假单胞菌病,且分离出的铜绿假单胞菌具有很强的耐药性和致病性。
【学位授予单位】：西北农林科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S858.9

【参考文献】