不同山羊品种AMH多态性及表达研究

发布时间：2020-06-23 01:26

【摘要】：抗苗勒氏管激素(Anti-mullerian hormone,AMH)可以作为评价山羊卵巢储备功能的可靠指标,研究发现不同人种其AMH基因多态性存在着差异,并且AMH基因多态性影响着卵巢的储备功能。那么在山羊繁殖生产中,不同的山羊品种是否也会因AMH基因多态性的不同造成山羊卵巢储备功能差异,从而造成繁殖性能差异?目前,国内尚无有关山羊AMH基因分子水平变异影响卵巢功能储备的相关报道。本试验以大足黑山羊、内蒙古绒山羊、波尔山羊、努比山羊等4个山羊品种(遗传资源)为研究对象。首先通过PCR-SSCP技术分别对4个山羊品种(每个品种50只)共200只个体进行AMH单核苷酸多态性检测分析,确定其是否存在AMH基因多态性差异。再采集大足黑山羊、内蒙古绒山羊和波尔山羊的心、肝、脾、肺、肾和卵巢等组织,采用RT-PCR分析不同品种的各个器官AMH的表达差异。最后对4个品种的山羊进行颈静脉采血,采用ELISA法检测不同品种血液中AMH的水平以及9日龄、15日龄、31日龄、6月龄、1岁、2岁和3岁的大足黑山羊个体间血液中AMH水平。为研究AMH对山羊卵巢储备功能影响的分子机制提供理论基础和数据支撑。本研究所得结果如下:1.PCR-SSCP分析发现,大足黑山羊、内蒙古绒山羊、波尔山羊、努比山羊4个品种间AMH基因及其受体基因AMHR2无多态性差异。2.针对NCBI上查找到的rs662076763、rs649255341、rs647977151、rs663303947、rs672197988和rs650783324这6个SNP位点进行PCR产物重测序。试验结果发现这6个位点没有发生突变。3.山羊中AMH基因只在卵巢中表达,在其他器官中不表达,且大足黑山羊、内蒙古绒山羊、波尔山羊、努比山羊AMH m RNA表达无显著差异(P0.05)。4.在哺乳期,大足黑山羊与努比山羊血液中AMH水平没有差异(P0.05),波尔山羊与内蒙古绒山羊液中AMH水平没有差异(P0.05),但大足黑山羊、努比山羊与波尔山羊、内蒙古绒山羊血液中AMH含量有着极显著差异(P0.01)。在6月龄时,大足黑山羊与内蒙古绒山羊血液中AMH激素水平并无显著差异(P0.05),波尔山羊比大足黑山羊和努比亚山羊AMH水平分别高12.6%(P0.05)和36.7%(P0.01)。成年期,大足黑山羊与波尔山羊、努比山羊和内蒙古绒山羊血液中AMH并没有显著差异(P0.05),但波尔山羊和努比山羊血液中AMH含量分别比内蒙古绒山羊血液中含量高13.5%和15.9%(P0.05)。5.在大足黑山羊中,随着年龄的增大AMH激素的水平呈逐渐下降的趋势。9日龄的AMH水平分别比6月龄、1岁、2岁和三岁高13.9%,15.2%,29.4%和32.1%(P0.01)本研究证实了在山羊中AMH只在卵巢中表达,在其他器官不表达。且不同山羊品种AMH及其受体基因AMHR2在DNA序列上无差异,在m RNA表达上没有差异,但不同品种的山羊在AMH激素水平却存在差异,且同一品种不同日龄血液中AMH水平也有差异,这说明AMH基因在转录后激素合成时存在着差异,这也提示了后期要从AMH转录后水平上研究AMH表达调控机理。
【学位授予单位】：西南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：S827
【图文】：

山羊,基因组DNA,基因组,条带

图 4-1 山羊基因组 DNA4-1 Extraction result of genomic DNA i扩增出 AMH（图 4-2）和 AMH性条带。可以采用 AMH 和 AM图 4-2 AMH PCR 扩增产物1-6 为 PCR 产物，M 为 markerFig.4-2 PCR production of AMH1-6show PCR production, M shows m

条带,山羊,异性,基因组

可以看出 DNA 条带清晰，无拖带图 4-1 山羊基因组 DNAg.4-1 Extraction result of genomic DNA in功扩增出 AMH（图 4-2）和 AMH异性条带。可以采用 AMH 和 AM

【参考文献】