丁香叶干预S.suis生物被膜的作用及丁二酸对cps基因的影响

发布时间：2020-07-04 18:20

【摘要】：细菌生物被膜(bacterial biofilms,BF)指的是细菌为了适应于周围的周边环境,吸附在其它组织的表面或异物上,繁殖并且大量分泌纤维蛋白、脂蛋白、糖基质等糖蛋白复合物,由于复合物的黏连作用使得细菌聚集在一起,并且形成一种三维的立体结构的膜样聚集体,这种聚集体常常附在医用器械的表面和病灶的表皮,且在这种表面具有不可逆性。猪链球菌(Streptococcus suis,S.suis)是人畜共患病病源菌之一,严重影响人及猪的安全和健康,对社会公众安全危害很大。当S.suis形成BF后,在感染部位很难用药物彻底清除,导致感染久治不愈。所以,如何抑制BF生成及减少BF感染是兽医临床亟待解决的难题,已成为国内外科研工作者关注的焦点。应用结晶紫染色、扫描电镜等技术观察了丁香叶水提物和丁香叶乙酸乙酯和正丁醇不同萃取部分以及丁二酸对猪链球菌体外生物被膜形成的影响,并进行了丁二酸对猪链球菌生物被膜的cps2B、cps2C、cps2D、cps2E、cps2F、cps2K、cps2L、cps2M、cps2N、cps2U的测序研究。结果发现丁香叶水提物1/2 MIC(6.25mg?mL-1)、丁香叶乙酸乙酯萃取部位1/2MIC(3.125mg?mL-1)、丁香叶正丁醇萃取部位1/2 MIC(3.125mg?mL-1)以及丁二酸1/2MIC(1.5625mg?m L-1)对生物被膜的形成有干预作用,且呈剂量效应关系。通过扫描电镜观察发现干预后猪链球菌生物被膜结构与干预前显著不同,猪链球菌生物被膜的密集结构随着药物浓度的增加而逐渐消失。基因测序结果表明cps2B613位置的核苷酸变化为A→T,氨基酸204位置变化为K→I,cps2E1276位置的核苷酸变化为A→T,氨基酸425位置变化为V→D,cps2L10位置的核苷酸变化为A→C,氨基酸204位置变化为T→A。其他基因则无氨基酸变化。通过预测干预后cps2B、cps2E和cps2L的二级结构发现丁二酸干预后二级结构有所不同,这些很有可能会对对应的酶产生影响,进一步影响BF的生成。综上所述,丁香叶水提液、丁香叶乙酸乙酯萃取部位、丁香叶正丁醇萃取部位和丁二酸能够影响猪链球菌生物被膜的形成,效果随浓度的增大而增强,具有剂量依赖性。丁二酸导致链球菌cps2B、cps2E和cps2L的核苷酸发生突变,从而影响其二级结构。
【学位授予单位】：东北农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S852.611

【参考文献】