日粮不饱和脂肪酸对滩羊体脂CLA调控作用及机理研究

发布时间：2020-07-05 10:29

【摘要】：在反刍动物饲料中添加多不饱和脂肪酸可以提高其产品的共轭亚油酸、二十二碳六烯酸等多不饱和脂肪酸,进而提高人体健康。滩羊是宁夏地区传统主养绵羊品种,提高滩羊肉品质的营养价值有着重要的意义。本研究以大豆油、亚麻油、裂壶藻粉为原料,分五个试验,研究了其对滩羊断奶羔羊生长性能、胴体品质、瘤胃发酵指标、血液生化指标及体组织中共轭亚油酸(CLA)含量的影响,通过检测体组织脂肪酸相关酶基因mRNA丰度和瘤胃液微生物数量的变化,揭示不同来源不饱和脂肪酸对滩羊体脂共轭亚油酸调控作用及合成机理的影响,为滩羊肉品质调控提供技术手段和理论依据。试验一滩羊日粮大豆油、亚麻油、裂壶藻粉适宜添加比例的研究在精粗比为50:50的日粮中分别添加0%、1%、2%、3%的大豆油、亚麻油、裂壶藻粉,采用体外发酵技术,培养0、3、6、12、24h,检测每个时间点的产气量、pH、NDF、NH3-N、BCP、VFA各项指标,利用这几项指标计算不同组合的单项组合效应指数(SFAEI)和多项组合效应指数(MFAEI),筛选出大豆油、亚麻油、裂壶藻粉适宜的添加比例。MFAEI评定结果显示,添加2%的大豆油、亚麻油、裂壶藻粉的值最高,其次是3%组,最后是1%组。结果表明,这三种不饱和脂肪酸原料对瘤胃发酵指标效果比较一致,2%是大豆油、亚麻油、裂壶藻粉最适宜的添加比例。试验二饲喂不饱和脂肪酸对滩羊的生长性能和肉品质的影响选择3月龄左右、体重相近的滩羊公羔40只,随机分为4组,每组10只,单栏饲养,分别设为对照组、大豆油组、亚麻油组、裂壶藻粉组。大豆油、亚麻油、裂壶藻粉的添加量均为日粮干物质的2%,日粮精粗比为50:50,预饲期15 d,正饲期60 d。结果发现,饲喂2%的大豆油、亚麻油、裂壶藻粉日粮的各组滩羊日增重均能达到150g以上,三个处理组的干物质采食量、胴体重、净肉重、尾脂重、骨肉比、屠宰率、GR值、眼肌面积、系水力、熟肉率、pH45min、大理石纹、滴水损失45min、滴水损失24 h、肉色a、肉色b值、肉色L值与对照组没有差异(P0.05),表明添加的不饱和脂肪酸比例较适宜,对滩羊的生长性能和肉品质没有不良影响。试验三饲喂不饱和脂肪酸对滩羊体组织脂肪酸的影响采集各组滩羊的瘤胃液、血浆、背最长肌、皮下脂肪,检测采集样品的脂肪酸含量,结果发现,大豆油组、裂壶藻粉组背最长肌中的c9,t11 CLA含量显著提高(P0.05),亚麻油组背最长肌中的c9,t11 CLA含量有一定提高(P0.05),三个处理组背最长肌的C18:1 t-11(TVA)含量极显著提高(P0.01),裂壶藻粉组背最长肌中的DHA显著升高(P0.01);大豆油组、亚麻油组和裂壶藻粉组皮下脂肪中的c9,t11 CLA显著提高(P0.05),皮下脂肪TVA极显著提高(P0.01),各组皮下脂肪的t10,c12CLA差异不显著(P=0.078),裂壶藻粉组皮下脂肪的DHA显著提升(P0.01)。结果表明,饲喂2%大豆油、亚麻油和裂壶藻粉,均能提高羔羊肌肉组织、脂肪组织的TVA和c9,t11 CLA含量;亚麻油、裂壶藻粉能提高肌肉组织、脂肪组织的DHA含量。大豆油组、亚麻油组和裂壶藻粉组血浆中的c9,t11 CLA、t10,c12CLA、TVA含量显著升高(P0.01),亚麻油组、大豆油组C18:0显著升高(P0.01),而裂壶藻粉组C18:0显著降低(P0.01),表明二十二碳六烯酸的瘤胃生物氢化与亚油酸、亚麻酸并不相同。大豆油组、亚麻油组和裂壶藻粉组瘤胃液中的c9,t11 CLA、t10,c12CLA、TVA含量均显著上升(P0.01),表明瘤胃液中存在着生成c9,t11CLA、t10,c12CLA的微生物,是体内c9,t11 CLA生成的重要途径。四个试验组瘤胃液、血浆、皮下脂肪、背最长肌的TVA和c9,t11 CLA含量都呈现相同趋势,裂壶藻粉组大豆油组亚麻油组对照组,表明裂壶藻粉的CLA合成效果最好,大豆油次之,亚麻油最低。本研究发现三个处理组的瘤胃液的TVA、c9,t11 CLA均和皮下脂肪的c9,t11 CLA有着较强的相关性,皮下脂肪和背最长肌中的TVA和c9,t11 CLA之间有着较强的相关性。表明,滩羊体内c9,t11 CLA含量可能是有两部分来源,一是瘤胃生物氢化不饱和脂肪酸产生c9,t11 CLA被机体吸收,二是吸收进入体内的TVA通过组织内源酶生成c9,t11 CLA,在脂肪、肌肉组织沉积。试验四饲喂不饱和脂肪酸对滩羊体内CLA代谢通路的影响采集各组滩羊血清、背最长肌、皮下脂肪、肝脏组织,检测血清多项生化指标及体组织FAS、LPL、SCD、ACC的mRNA表达丰度,研究不饱和脂肪酸对机体代谢影响及体内CLA的合成机理。结果发现,饲喂大豆油、亚麻油、裂壶藻粉,血清胰岛素含量显著降低(P0.05),瘦素显著提升(P0.05),表明不饱和脂肪酸在体内的代谢与胰岛素、瘦素有着密切的联系。饲喂亚油酸、亚麻酸能提高血清中NEFA、TG、LDL、HDL(P0.05),饲喂裂壶藻粉NEFA、TG、LDL、HDL略有下降(P0.05),表明二十二碳六烯酸与亚油酸、亚麻酸体内代谢有着较大的差异,裂壶藻粉较大豆油、亚麻油对机体健康更为有利。饲喂大豆油、亚麻油、裂壶藻粉,对SOD、CAT、GSH-Px影响不大(P0.05),但均会引起羔羊血清MDA明显升高(P0.05),表明添加亚油酸、亚麻酸、二十二碳六烯酸对滩羊体内抗氧化酶活性影响不大,但对体组织有一定程度的脂质过氧化损伤。大豆油组、亚麻油组、裂壶藻粉组的肝脏组织SCD显著下降(P0.05),FAS、ACC、LPL差异不大(P0.05),肌肉组织、皮下脂肪的LPL、SCD、ACC、FAS与对照组差异不大(P0.05),表明饲喂不饱和脂肪酸滩羊体组织的c9,t11 CLA生成与肝脏组织的SCD表达有关。试验五饲喂不饱和脂肪酸对滩羊瘤胃发酵参数及相关氢化微生物的影响宰前分别采取各组滩羊瘤胃液,检测瘤胃液细菌、pH、VFA、NH3-N等指标,研究不饱和脂肪酸对滩羊瘤胃代谢的影响及CLA的合成机理。结果发现,大豆油组、亚麻油组、裂壶藻粉组的瘤胃液pH和对照组差异不显著(P0.05),瘤胃NH3-N浓度均略低于对照组(P0.05),各组总VFA较对照组明显下降,大豆油组、裂壶藻粉组与对照组相比显著下降(P0.05),亚麻油组略有下降(P0.05);而乙酸、丙酸、丁酸的分子比例并没有下降,大豆油组、亚麻油、裂壶藻粉组的乙酸/丙酸变化不大(P0.05),表明添加2%大豆油、亚麻油、裂壶藻粉对羔羊瘤胃内环境影响较小。大豆油组和亚麻油组的瘤胃Butyrivibrio(丁酸弧菌属)、Butyrivibrio fibrisolvens(溶纤维丁酸弧菌)、Pseudobutyrovibrio(假丁酸弧菌属)数量高于对照组,表明瘤胃Butyrivibrio、Butyrivibrio fibrisolvens、Pseudobutyrivfbrio等多种微生物参与了亚油酸、亚麻酸的c9,t11 CLA合成,瘤胃生物加氢是羔羊体内c9,t11 CLA合成的重要途径。裂壶藻粉组Butyrivibrio、Butyrivibrio fibrisolvens、Pseudobutyrivibrio与对照组差异不大,表明参与滩羊瘤胃二十二碳六烯酸生物氢化的微生物与亚油酸、亚麻酸有较大区别,可能存在二十二碳六烯酸生物氢化特定的微生物。综上所述,日粮中分别添加2%大豆油、亚麻油、裂壶藻粉,对滩羊羔羊生长性能、屠宰性能和肉品质无不良影响,对瘤胃主要发酵指标影响不大,能增加血液氧化反应,血液生化指标变化较大。添加2%大豆油、亚麻油、裂壶藻粉可以明显提升背最长肌、皮下脂肪、血浆、瘤胃液中的TVA、c9,t11 CLA含量,裂壶藻粉的提升效果最好,其次是大豆油,亚麻油最差。另外,裂壶藻粉、亚麻油均能显著提高皮下脂肪和背最长肌的DHA,提高羊肉n-6多不饱和脂肪酸的营养价值。大豆油组、亚麻油组、裂壶藻粉组的肝脏组织SCD显著下降,表明羔羊组织CLA合成与肝脏内源Δ9去饱和酶表达有关。瘤胃内Butyrivibrio(丁酸弧菌属)、Butyrivibrio fibrisolvens(溶纤维丁酸弧菌)、Pseudobbtyrivibrio(假丁酸弧菌属)等多种微生物参与了c9,t11 CLA的合成,但参与二十二碳六烯酸生物氢化的微生物可能与亚油酸、亚麻酸不同。
【学位授予单位】：宁夏大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：S826.5
【图文】：

亚麻酸,亚油酸,途径,反刍动物

５．６逦９２逡逑猪肉逦０．６逦８２逡逑鸡肉逦０．９逦８４逡逑火鸡肉逦２．５逦７６逡逑三文鱼逦０．３逦ｎ．ｄ逡逑湖红点鲑鱼逦０．５逦ｎ．ｄ逡逑虫下逦０．６逦ｎ．邋ｄ逡逑红花油逦０．７逦４４逡逑葵籽油逦0．邋４逦３８逡逑菜籽油逦0．邋５逦４４逡逑逦玉米油逦０２逦３９逦逡逑注：引自Ｃｈｉｎ等（１９９２）。逡逑１．５．２反刍动物ＣＬＡ合成途径逡逑反刍动物体脂或乳脂ＣＬＡ合成途径主要有二种，第一是亚油酸、亚麻酸等多不饱和脂肪酸逡逑（ＰＵＦＡ）在反刍动物瘤胃内被微生物直接异构化为ｃ９，ｔｌｌ邋ＣＬＡ和ｔｌ０，ｃｌ２邋ＣＬＡ，然后通过瘤胃逡逑壁吸收转化为乳脂或体脂（Ｅｎｓｅｒ等，１９９９）；第二是日粮中的多不饱和脂肪酸被瘤胃微生物生物逡逑氢化（ＢＨ），转变为硬脂酸的过程，生成了ＴＶＡ邋（ｔｉｌ邋Ｃ１８：ｌ）、ｔｌＯ油酸等异构体，ＴＶＡ被吸逡逑收进入体内，在肝脏、乳腺组织、脂肪组织等机体组织中被Ａ９去饱和酶脱氢生成ＣＬＡ邋（Ｇｒｉｉｎａｒｉ逡逑等，１９９９；邋Ｋｈａｎａ丨等，２００４）。逡逑逦邋逦邋０逡逑

回归分析,皮下脂肪,回归模型,背最长肌

４．２．５组织中ＴＶＡ与ｃ９，ｔｌ邋１邋ＣＬＡ含量相关性分析逦－一－逡逑对不同组织的ｃ９，ｔｉｌ邋ＣＬＡ和ＴＶＡ相互间进行了回归分析，见图４。对皮下脂肪、背最长肌逡逑的ＴＶＡ和ｃ９，邋ｔｉｌ邋ＣＬＡ含量之间作了回归分析，回归模型为Ｙ＝０．邋０５５２Ｘ＋１２．邋３２３邋，逡逑Ｙ＝０．０６２９Ｘ＋０．邋２８０３，决定系数分别为邋Ｒ２＝０．邋７４１７邋（Ｐ＜０．０１），邋Ｒ２＝０．邋７４８６邋（Ｐ＜０．０１），表明皮下脂肪、逡逑背最长肌的ＴＶＡ和ｃ９，邋ｔｉｌ邋ＣＬＡ之间有着较强的相关性。逡逑对血浆ＴＶＡ、ｃ９，ｔｌｌ邋ＣＬＡ与皮下脂肪ｃ９，ｔｌｌ邋ＣＬＡ含量之间作了回归分析，回归模型为逡逑Ｙ＝６８．８５１Ｘ＋３．邋４９６５，邋ＹＭ８５．９６Ｘ＋２．邋４２６９，决定系数分别为邋Ｒ２＝０．邋６８９２邋（Ｐ＜０．０１），邋Ｒ２＝０．邋７４７８逡逑（Ｐ＜０．０１），表明血浆的ＴＶＡ、ｃ９，ｔｌｌ邋ＣＬＡ均和皮下脂肪的ｃ９，ｔｌｌ邋ＣＬＡ相关性较强。逡逑对瘤胃液ＴＶＡ、ｃ９，邋ｔｉｌ邋ＣＬＡ与皮下脂肪ｃ９，邋ｔｉｌ邋ＣＬＡ含量之间作了回归分析，回归模型为逡逑Ｙ＝８．２６０９Ｘ＋１０．７５７

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