牛源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性和毒力基因的检测

发布时间：2020-07-10 00:17

【摘要】：奶牛乳房炎是对奶牛危害最大,造成经济损失最为严重的一种常发病,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的出现给临床治疗带来极大的困难。因此,对牛源MRSA的耐药性、耐药基因和毒力基因的检测和分析,可以更好的预防和治疗由该病原菌引起的疾病,有着非常重要的现实意义。本研究从303株奶牛乳房炎奶样中分离到金黄色葡萄球菌和复苏实验室保存的金黄色葡萄球菌中共分离到73株MRSA。对73株MRSA药敏实验、耐药基因和毒力基因进行了检测,结果表明:对73株MRSA耐药范围检测以青霉素、庆大霉素、卡那霉素耐药率最高,为完全耐药;其次为环丙沙星、左氧氟沙星、克林霉素、四环素、利福平等药。对 73 株 MRSA 耐药基因检测,tetM、aacA-apahD、rpoB、blaZ、norA、norB、norC、sepA、mepA、rndeA等基因在全部MRSA中均含有;其次为tettK基因、qacA/B基因等,smr基因未被检测出。对 73 株 MRSA 毒力基因检测,fnbA clfA、clfB、cna、sbrE、Map/eap、seh、hla、hld、hlg-2等基因均被检出。其次为sdrC、sdrD、ebpS、seg、sei、sea、sen、seo、sem、seb、sec,lukED、lukSF、hlg、hlb 等基因因。tst、spa、sed、see、sej、lukM、eta、etb、edin等基因未被检出。结论:(1)所分离的MRSA菌株均表现为多重耐药性,耐药范围主要集中在β-内酰胺类、喹诺酮类、氨基糖苷类、利福霉素类、四环素类、林可酰胺类等。(2)所分离的MRSA五类抗生素的耐药基因携带率较高,且与耐药表型基本一致,表明耐药基因是细菌产生耐药性的重要因素之一。(3)所分离的MRSA菌株中均携带毒力基因,其中以粘附因子、肠毒素、溶血素等基因为主,表明毒力基因与细菌所致临床症状密切相关。
【学位授予单位】：内蒙古农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：S852.61
【图文】：

基因,阳性对照,凝胶,细菌

Ｆｉｇ．邋２邋ｍｅｃＡ邋ｇｅｎｅ邋ＰＣＲ邋ｒｅｓｕｌｔｓ逡逑注：Ｍ泳道为Ｍａｒｋｅｒ；邋１、２、３、４、５、６、７、８、９泳道为样品逡逑２．邋２．邋６邋ＰＢＰ２ａ凝胶试验逡逑若阳性对照内出现颗粒凝集现象，则可确证为ＭＲＳＡ。７３株细菌均为逡逑ＭＲＳＡ。见图邋３。逡逑ｍ逦基泰邋ｙ．邋．？邋＼ｄ．＇＾Ｊ￣－逦￣ｗ＾ｆｒ邋－，＾ｆｆｒ＾ｉｔｊ－－＾－ｉ－逡逑0＾ＢＢＫ２Ｅ０１逡逑图３邋ＰＢＰ２ａ凝胶颗粒凝集结果逡逑Ｆｉｇ．３邋ＰＢＰ２ａ邋ｇｅｌ邋ｐａｒｔｉｃｌｅ邋ａｇｇｌｕｔｉｎａｔｉｏｎ邋ｒｅｓｕｌｔｓ逡逑

凝胶,阳性对照,细菌,基因

Ｊ６逦西逦逡逑ｂｐＭ１２３４５６７８９逡逑２００逦Ｉ：邋：＾ｊ邋ｉ５５ｂｐ逡逑图２邋／ｗｅｅｄ基因ＰＣＲ结果逡逑Ｆｉｇ．邋２邋ｍｅｃＡ邋ｇｅｎｅ邋ＰＣＲ邋ｒｅｓｕｌｔｓ逡逑注：Ｍ泳道为Ｍａｒｋｅｒ；邋１、２、３、４、５、６、７、８、９泳道为样品逡逑２．邋２．邋６邋ＰＢＰ２ａ凝胶试验逡逑若阳性对照内出现颗粒凝集现象，则可确证为ＭＲＳＡ。７３株细菌均为逡逑ＭＲＳＡ。见图邋３。逡逑

耐药基因,基因,片段,目的

ｂｌａＺ逦９５逦５逦９５逦３０逦５０逦３０逦７２逦３０逦７２逦７逡逑ｎｏｒＡ逦９５逦５逦９５逦４０逦５２逦４０逦７２逦４０逦７２逦８逡逑ｎｏｒＢ逦９５逦５逦９５逦２０逦５６逦１８逦７２逦１８逦７２逦６逡逑ｎｏｒＣ逦９５逦５逦９５逦２０逦５４逦１８逦７２逦１８逦７２逦６逡逑ｓｅｐＡ逦９５逦５逦９５逦１５逦５４逦１２逦７２逦１２逦７２逦５逡逑ｍｅｐＡ逦９５逦５逦９５逦５０逦５４逦５０逦７２逦５０逦７２逦１０逡逑ｍｄｅＡ逦９５逦５逦９５逦４５逦５６逦４５逦７２逦４５逦７２逦８逡逑ｑａｃＡ／逦９５逦５逦９５逦４０逦５４逦４０逦７２逦４０逦７２逦８逡逑Ｂ逡逑ｓｍｒ逦９５逦５逦９５逦２５逦５２逦２０逦７２逦２０逦７２逦５逡逑３．邋２结果及分析逡逑３．邋２．１耐药基因扩增结果逡逑对７３株ＭＲＳＡ耐药基因进行检测，阳性细菌均显示出与目的片段相符的条逡逑带，部分耐药基因ＰＣＲ扩增结果。见图４？１１。逡逑ｂＭ邋１２３４５逦６逦７逦８９逡逑

【参考文献】