牛血清白蛋白复合纳米材料的合成及对猪繁殖与呼吸综合征病毒的抑制作用研究

发布时间：2020-07-16 12:27

【摘要】：牛血清白蛋白(BSA)因其来源丰富,易纯化,价格低廉,在水中溶解性好,以及良好的生物相容性等诸多优点被广泛应用于纳米材料合成和药物传递等领域。但是到目前为止,基于BSA合成的复合纳米材料在抗病毒领域内的应用却较少报道,基于此,本实验合成了2-巯基乙烷磺酸钠作为修饰剂,BSA包封的星形碲纳米材料(Te/BSA纳米星)以及牛血清白蛋白纳米粒子(BSA NPs)作为载体负载抗病毒药物的复合纳米材料,并对其进行一系列化学表征,最后探究了它们对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)增殖的影响,具体内容如下:1.以2-巯基乙烷磺酸钠(MES),亚碲酸钠(Na_2TeO_3),BSA为原料合成三棱星形的Te/BSA纳米星,并利用紫外-可见吸收光谱(UV-vis)、红外光谱(FTIR)、水合粒径(DLS)、透射电子显微镜(TEM)、X射线光电子能谱(XPS)、X射线衍射(XRD)等对其进行化学表征。通过MTT法测定了Te/BSA纳米星对MARC-145细胞的影响,并以PRRSV为病毒模型,采用间接免疫荧光实验,空斑实验,蛋白质免疫印迹实验共同验证了Te/BSA纳米星对PRRSV增殖的抑制作用,进一步探究发现Te/BSA纳米星主要抑制PRRSV增殖周期中的穿入过程,另外Te/BSA纳米星可显著降低PRRSV诱导的细胞内活性氧(ROS)的产生。最后,用谷胱甘肽(GSH)替代MES合成出球状的Te/BSA纳米球作为对照,发现Te/BSA纳米星显示出比Te/BSA纳米球更高的抗病毒活性,表明MES不仅改变了纳米材料的形状也增强了它们对PRRSV的抗病毒活性,这一研究结果将为Te/BSA纳米星应用于抗病毒领域提供一定的借鉴意义。2.以BSA NPs作为纳米载体,负载药物(2,4-二羟基苯基)(2,6-二甲基苯基)甲酮,分子式为C_(15)H_(14)O_3,运用去溶剂化的实验方法,分别按照BSA:C_(15)H_(14)O_3为1:2、1:3、1:4的原料比合成出复合纳米材料C_(15)H_(14)O_3-BSA NPs,并对其进行了紫外光谱,透射电镜,水合粒径等化学表征,同时计算出C_(15)H_(14)O_3-BSA NPs的药物负载率以及体外释放率,发现1:2合成出的C_(15)H_(14)O_3-BSA NPs有最高的药物负载率以及体外释放率,最后评估了C_(15)H_(14)O_3-BSA NPs、C_(15)H_(14)O_3对MARC-145细胞的影响,以及对PRRSV增殖的影响。结果显示C_(15)H_(14)O_3-BSA NPs较C_(15)H_(14)O_3有更好的抗病毒效果,这为后续研究白蛋白载药在抗病毒领域的应用提供了一定的参考。
【学位授予单位】：华中农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：S852.651;TB33
【图文】：

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牛血清白蛋白复合纳米材料的合成及对猪繁殖与呼吸综合征病毒的抑制作用研究Cagno 等人(Cagno et al 2018)用癸烷磺酸做为修饰剂设计出具有模拟乙酰肝素多糖蛋白（HSPG）的纳米材料（MUS-Au NPs），癸烷磺酸的配体结构，可与病毒进行不可逆的结合，因此实现广谱不可逆的抗图 1-2）。金属纳米材料被广泛的研究于抗病毒领域，但是重金属离子及环境存在的危害仍有一定的争议(Marambio-Jones et al 2010)。

-3 糖富勒烯抑制埃博拉病毒感染示意图（Luczkowiak et al 201ematic illustration of glycofullerenes inhibiting viral infection. (Luc2013)米材料烯及其衍生物由于具有高表面积与体积比，易于表面官医药领域，近年来也被发现具有抗病毒活性。2015 年 Y化石墨烯（GO）对猪伪狂犬病病毒（PRV，DNA 病毒DV，RNA 病毒）的广谱抗病毒活性。GO 在非细胞毒 PEDV 的感染，使病毒滴度降低了 2 个对数值，并详细-4 所示，GO 和 rGO 的有效抗病毒活性可归因于独特的

本文编号：2758001