NDRG1蛋白促进禽流感H5N1亚型病毒在细胞内复制

发布时间：2020-07-19 12:28

【摘要】：流感是一种常见的以呼吸道发病为主的具有高度传染性疾病。该疾病由正粘病毒科流感病毒属中A型流感病毒引起的。流感病毒属于严格细胞内寄生物,需要借助宿主细胞内的细胞因子和合成机制来完成自身的复制。同时,病毒入侵将会引起宿主的免疫应答,来抵御病毒入侵。因此,研究病毒与宿主细胞的相互作用是一件非常重要有意义的课题,可以更好地理解宿主是如何抵御病毒入侵的,而病毒又是如何逃避宿主细胞免疫应答来完成复制的,这有助于寻找新的抗病毒靶位点。NDRG1蛋白是一种细胞质蛋白,在上皮细胞中高表达,具有多种生物学功能和调控众多细胞信号通路的调控因子,在细胞周期调控,细胞成熟、分化,血管生成,肿瘤抑制和P53介导的细胞凋亡中均起着重要作用,而抑制NF-κB信号通路活性是它一个很重要功能。因此,对NDRG1蛋白与流感病毒复制之间是否存在联系很感兴趣。本文研究了NDRG1蛋白对禽流感H5N1亚型病毒在A549细胞中复制的作用。首先,禽流感病毒进行感染A549细胞试验,用荧光定量PCR和Western Blot检测显示,接种病毒后细胞内NDRG1表达量上升,即流感病毒可以诱导细胞内NDRG1蛋白表达。接着构建了靶向NDRG1基因的RNAi载体和表达载体,通过低表达和过表达NDRG1来研究对流感病毒的复制的影响。结果发现,当NDRG1低表达时,病毒的复制能力也下降了;而过表达时病毒的复制能力也增强了。也就是说NDRG1可以促进病毒复制。最后,由于NDRG1蛋白可以通过抑制IKKβ位点来弱化NF-κB信号通路活性。因此,构建了IKKβ表达载体,通过细胞因子IFN-β、IL-8的表达水平和病毒复制能力来研究该载体是否能克服NDRG1蛋白对NF-κB信号通路的弱化作用。结果显示,IKKβ表达载体可以克服NDRG1的弱化作用,同时病毒的复制能力也下降了。从而说明NDRG1蛋白可以通过抑制NF-κB信号通路降低细胞先天免疫应答来促进病毒复制的。
【学位授予单位】：河北科技师范学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S852.65
【图文】：

宿主,流感病毒,自然界,中流

第一章绪论1.1 流感病毒概述流行性感冒（简称流感）是一种常见的以呼吸道发病为主的具有高度传的病毒性疾病。该疾病由正粘病毒科流感病毒属中 A 型流感病毒（influenzirus，IAVs）引起的。流感没有国界限制，是一种全球性疾病，每年大约造00 万到 500 万临床感染病例，其中有 25 万到 50 万致死病例[1, 2]。IAVs 可以感染多种动物，如人类、猪、马、海洋哺乳动物和各种鸟类等一般在种内传播，偶尔也会跨物种传播[3, 4]。水禽作为流感病毒的自然宿主乎携带了 A 型流感病毒的全部亚型[5, 6]。因此，它们被认为是其他流感病毒头，是由它们传播给其它动物的（见图 1-1）。

大流行,流感病毒,历史上,文献

图 1-2 历史上有记录的流感病毒 5 次大流行（引自文献[8]）Fig 1-2 Fith recorded pandemics of IAVs in historyH3N2 和 B 型流感病毒是人类目前季节性流感病毒暴发为止，有记录的流感大流行发生了 5 次，20 世纪发生发生了一次（见图 1-2）。1918 年暴发的“西班牙流感”是起的，共造成了超过 5 000 万人死亡。而 1957 年暴发”的 H2N2 亚型病毒代替了之前 H1N1 亚型在人类社会中

历年,亚型,宿主,病毒

图 1-3 历年 H5N1 感染和死亡人数ses and deaths of human infection avian influenza A/H5N1 virus ov，不仅是人源流感病毒对人类健康存在着巨大的危害，在潜在风险，对公共健康构成了潜在威胁。这不仅需要毒流行、传播情况，研究它们在禽类和其它宿主中进化还要研究它们在宿主体内与宿主分子的相互作用关系，新的策略。毒分类和命名病毒内部的基质蛋白（matrix，M）和核蛋白（nucleopr可以分为甲（A）、乙（B）和丙（C）三型。而根据病毒集素（hemagglutinin, HA）和神经氨酸酶（neuraminidaIAVs 可以分为不同亚型[5]。到目前为止，人类已经从自A 亚型和 11 个 NA 亚型[14]。除了 H17N10 和 H18N11 目

【参考文献】