胚蛋注射黄芪多糖对肉仔鸡肠道黏膜免疫的影响

发布时间：2020-08-18 21:06

【摘要】：出壳初期,是鸡存活的关键时期,因为此时雏鸡免疫系统和消化系统等尚未发育成熟,而且体内母源抗体有限。如何提高出壳初期机体尤其是肠道的免疫功能,以抵抗外界病原体的入侵尤为重要。研究表明,胚蛋给养是一种能够在孵化期根据胚胎发育的需要提供额外营养物质来调节雏鸡早期生长发育和免疫功能的有效可行方法。黄芪多糖(Astraglus polysaccharide,APS)作为免疫增强剂,具有显著增强机体免疫力、抗氧化、促生长、促进肠道发育和提高肠道黏膜免疫的作用。因此,本试验通过卵内注射黄芪多糖对雏鸡早期肠道免疫进行调节,以提高出壳初期雏鸡免疫功能,这对预防雏鸡发育早期疾病的发生具有重要意义。为探讨卵内注射APS对雏鸡早期肠道黏膜免疫的影响,本试验选用240枚爱拔益加肉鸡(AA+肉鸡)胚蛋,随机分成4个处理组,每个处理组3个重复,每个重复20枚蛋。在孵化至18.5胚龄时,处理组Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ向羊膜腔内注射0.5mL浓度为2mg/ml、4mg/ml和8mg/ml的APS,并分别用APS_L、APS_M和APS_H表示,处理组Ⅰ于同部位注射0.5mL 0.9%生理盐水作为对照,用Control表示。在出壳当天计算各组出壳率,并分别在出壳后的第1、7、14、21d进行取材:称量体重;HE染色方法观察肠道形态结构的变化;SP免疫组化法观察肠道黏膜内IgA~+细胞的分布及数量变化;ELISA法检测空肠洗液中SIgA含量的变化;荧光定量PCR方法检测肠道中IL-2、IL-6、IFN-γ及TLR4基因mRNA表达水平的变化。试验结果如下:1.与对照组相比,胚蛋注射APS对孵化率影响不显著,但显著增加了14d及21d时的肉仔鸡体重,其中以APS_M对体重的促进作用最为明显。2.与对照组比较,胚蛋注射APS可以增加肉仔鸡小肠黏膜的绒毛高度(VH),降低隐窝深度(CD),并提高VH/CD比值从而在一定程度上促进了肠道形态结构的发育,三个浓度的APS对早期肠道形态结构的作用效果因不同时间、不同肠段和不同浓度而表现不同,其中以21d时APS_M对空肠的作用效果最为明显。3.与对照组比较,胚蛋注射APS能够在7、14、21d增加十二指肠和空肠绒毛固有层中的IgA~+细胞。但各组在不同日龄对十二指肠和空肠的促进作用并不相同,其中以APS_H组在21d时对十二指肠的促进作用最为明显。4.与对照组相比,胚蛋注射APS_M在7d和21d显著增加了SIgA抗体的分泌。2.与对照组相比,胚蛋注射APS提高了IL-2及IFN-γ并降低了IL-6基因的的表达水平,表明胚蛋注射APS能够调节机体中Th1/Th2细胞的相对平衡状态。与对照组相比,APS能够提高TLR4的表达水平,其中以7d时APS_L提高作用最为显著。综上所述,胚蛋注射APS能够有效促进肠道形态结构的发育、增加黏膜中IgA~+细胞数量和肠洗液中SIgA的含量,并提高IL-2、TLR4、IFN-γ和降低IL-6基因的mRNA表达水平,从而增强了出壳初期雏鸡的肠道黏膜免疫功能,进而给机体提供有效和及时的免疫保护。
【学位授予单位】：吉林农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：S831.5
【图文】：

示意图,行编号,示意图

图 1.1 孵化 18.5d 羊膜腔注射示意图e embryo injection of amniotic cavity of 1行编号，饲养于育雏笼内，正常光

十二指肠,绒毛,雏鸡,发育情况

7d 时 APSM组（图2.1-B）与 Control 组（图 2.1-A）相比，十二指肠绒毛排列更为紧密，VH 更长。14d 时，与 Control 组相比（图 2.1-C），APSM（图 2.1-D）及 APSH组（图 2.1-E）十二指肠绒毛排列更为紧密，VH 更长，但绒毛的宽度变窄。21d 时，与 Control组（图 2.1-F）相比，APSM组（图 2.1-G）VH 更长

空肠,雏鸡,肠腺,发育情况

与 Control 组（图2.2-A）相比，APSL（图 2.2-B）及 APSM组（图 2.2-C）空肠 VH 更长。14d 时，与 Control 组（图 2.2-D）相比，APSL组（图 2.2-E）VH 更长，肠壁增厚，但绒毛宽度变窄。21d 时，与 Control 组（图 2.2-F）相比，APSL组（图 2.2-G）绒毛排列更为紧密，肠腺更为发达，VH 更长

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