紫茎泽兰乙醇提取制剂工艺优化、临床试验及毒理学相关研究

发布时间：2020-09-23 10:02

　　 螨病是一种动物体表常见的慢性、接触性寄生虫病,在如今的养殖行业中疥螨科或者痒螨科的螨病寄生最为常见,治疗螨虫病的化学药物在目前临床上占主导地位,化学药物引来的高残留、抗性、对环境危害大等问题已经引起全社会的关注。紫茎泽兰(Eupatorium adenophorum)作为外来物种之一,它属于多年生草本植物,原来产地是美洲的墨西哥,随着人们对这种外来入侵植物的不断深入研究,它虽然对30个以上的国家带来了生态环境危害,但是利用从紫茎泽兰中提取出来的物质却能是很好的杀灭很多农业害虫和畜牧寄生虫,尤其对疥螨病和痒螨病杀灭活性效果好,具有被开发为植物源杀螨剂的巨大潜力。为了开发新型治疗螨虫病的药物制剂,本课题对紫茎泽兰植物的提取工艺进行研究,在此基础上对提取出来的药液进行简单的加工处理得到透皮制剂,并对制剂的安全性、临床杀螨效果、毒理学进行试验研究。结果如下:一、紫茎泽兰乙醇提取工艺研究以杀螨活性成分9-羰基-10,11-去氢泽兰酮(EuptoxA)为测定指标,采用热回流提取法,对乙醇体积分数、料液比、提取次数、提取时间四个因素进行考察,设计L_9(3~4)正交实验确定最佳提取工艺条件。结果为:紫茎泽兰外用杀螨剂的最佳提取工艺是乙醇的体积分数为95%,料液之比为1:20(g/ml),提取的时间时1h,提取的次数是3次。二、紫茎泽兰制剂皮肤安全性和临床杀螨效果评价采用急性毒性和刺激性试验,评价了紫茎泽兰透皮制剂体外用药的安全性。结果表明:该制剂外用对动物没有急性毒性反应,经过完整皮肤组和破损组皮肤的用药试验,给药72 h后没有出现刺激性。临床杀痒螨和疥螨效果评价试验中,设杀螨透皮剂A、B、C、D组(分别为加氮酮生药含量为1.0g·mL~(-1)、0.5g·mL~(-1)和不加氮酮生药含量为1.0g·mL~(-1)、0.5g·mL~(-1),涂擦)、伊维菌素E阳性对照组(含伊维菌素0.2mg,注射)和0.9%生理盐水F空白对照组(涂擦),杀螨效果最好的是生药含量为1.0 g·mL~(-1)加氮酮高剂量组。三、紫茎泽兰制剂的急性毒性试验研究将昆明种小白鼠250只分成不同组,通过预试验确定出小白鼠给药剂量的大致范围,然后选取60只,采用灌胃给药的方式进行正式试验,试验在给小白鼠灌药之后,连续观察7d,每天要对小白鼠的中毒反应情况以及死亡情况进行记录,根据寇氏法计算出LD_(50)和95%的可信限。试验结果为:紫茎泽兰透皮制剂的LD_(50)为92.68g/kg,LD_(50)的95%可信限87.02~105.15g/kg,能够引起心、肝、脾、肺、肾和肠等病变。四、紫茎泽兰制剂的亚慢性毒性试验研究80只SD大鼠随机分4组,每组20只,通过灌胃的方法对大鼠进行施药,剂量大小分别是:1/10LD_(50)高剂量组、1/25LD_(50)中剂量组、1/50LD_(50)低剂量组与0g/kg体重的对照组,连续灌胃28d。试验期间观察临床状况,称量每周大鼠体重并以此调整灌胃剂量。在试验结束后进行动物血液学指标的测定并进行病理,解剖学观察,同时对每组动物的主要脏器进行湿重称量,根据称量结果来进行脏器指数的计算。结果表明:紫茎泽兰外用杀螨制剂对大鼠的生长发育、血液学、脏器指数有性别差异性,对大鼠的总体影响不明显,也没有规律性。
【学位单位】：四川农业大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：S859
【部分图文】：

1.2.8 数据处理用 Excel 作图，设计正交试验对提取工艺进行优化。2 结果与分析2.1 单因素试验2.1.1 乙醇体积分数对紫茎泽兰植物中紫荆泽兰素 A 提取率的由图 1-2 得出，紫茎泽兰素 A 的提取率随乙醇体积分数的增呈现出增加的趋势，并且在 95%时达到最高。0.5

Fig.1-2The influence ofvolume percentage of ethonal on euptoxA extraction rate2.1.2 提取时间对紫茎泽兰植物中紫荆泽兰素 A 提取率的影响由图1-3得出，紫茎泽兰素A提取率随着提取时间的增加而呈现增加趋势。00.050.10.150.20.250.30.350.40.450.50 2 0 4 0 6 0 8 0 1 0 0茎泽兰醇提液中紫UEPTXOA取率提乙醇体积分数18

图 1-3 提取时间对紫茎泽兰素 A 提取率的影响Fig.1-3 The influence of extraction time on euptoxA extraction rate2.1.3 料液比对紫茎泽兰植物中紫荆泽兰素 A 提取率的影响由图 1-4 得出，紫茎泽兰素 A 的提取率随着提取时间的增加而呈现不趋势，在 2h 时达到最高。00.050.10.150 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5茎泽兰醇提液中紫提取时间/H0.3

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本文编号：2825189