骨质疏松症蛋鸡十二指肠和肾脏中钙磷代谢相关因子表达变化研究

发布时间：2020-10-08 22:54

　　笼养蛋鸡骨质疏松症(cage layer osteoporosis,CLO)是当前笼养蛋鸡生产中易发的疾病之一。目前大多数学者认为,该病的发生是由于蛋鸡体内钙磷平衡被打破所造成的。蛋鸡钙磷代谢过程由十二指肠、肾脏、蛋壳腺和骨共同调节。在产蛋后期,蛋鸡需要及时补充大量的钙质以满足产蛋需求,否则会动用骨钙,长此以往最终会引发骨质疏松症。但到今天为止,CLO发生的确切机制尚不清楚。本试验通过诱导CLO模型,检测CLO模型血液、十二指肠和肾脏中与钙磷代谢相关的因子、骨生物学指标以及肾脏组织形态学的变化,以期从中发现规律,揭示CLO的发病机制,为生产中CLO的防治提供理论依据。将海兰褐商品蛋鸡(73周龄共216只)作为试验动物,进行低钙日粮的饲喂以制备CLO模型,比色法、微板法检测血清中与钙磷代谢相关生化指标变化;常规方法检测骨指数、骨密度、胫骨三点弯曲载荷和最大应力;micro-CT扫描胫骨,并对胫骨进行TRAP染色制作骨切片,观测骨组织形态学变化;Real time PCR方法检测十二指肠、肾脏中与钙磷代谢相关因子mRNA表达水平;HE染色和电镜观察肾脏组织形态学变化情况。试验结果显示:1.本试验成功制备出CLO模型,CLO发生时,血清Ca、P含量降低;碱性磷酸酶(ALP)和抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)含量升高;骨骼生物力学指标降低;皮质骨和髓质骨溶解,破骨细胞(OC)增多,胫骨皮质骨部分变薄,髓质骨部分骨小梁数量减少、体积变小。2.骨质疏松蛋鸡十二指肠钙结合蛋白(CaBP-D28k)和维生素D受体(VDR)mRNA表达量显著上调,钠磷协同转运蛋白2b(NaPi-Ⅱb)mRNA表达量显著下调,随着CLO程度的加剧浆膜钙ATP酶(PMCA1b)mRNA表达量先上调后下调,钠钙交换体(NCX1)mRNA表达量先下调后上调,表明CLO时十二指肠对钙的吸收能力增强,对磷的吸收能力减弱。3.骨质疏松蛋鸡肾脏中24-羟化酶(Cyp24al)、钙通道瞬时感受器电位香草素受体5(TRPV5)、钙通道瞬时感受器电位香草素受体6(TRPV6)、NCX1和钠磷协同转运蛋白2a(NaPi-IIa)mRNA表达量显著下调,甲状旁腺激素受体(PTHR)、CaBP-D28k、PMCA1b、成纤维生长因子受体1(FGFR1)、成纤维生长因子受体3(FGFR3)、成纤维生长因子受体4(FGFR4)和Klotho mRNA表达量上调,表明肾脏对钙的重吸收能增强,对磷的吸收能力减弱,对磷的排泄能力增强。4、骨质疏松蛋鸡肾小管壁层破裂,肾小管上皮细胞胞质空泡化,肾小管内有渗出物,线粒体破裂,线粒体膨大、嵴溶解或断裂,表明CLO时肾脏结构发生破坏。本试验结果表明:蛋鸡发生CLO时,骨重建活动活跃,但破骨活动强于成骨活动,骨骼生物学指标降低,十二指肠和肾脏对钙的吸收/重吸收能力增强,十二指肠和肾脏对磷的吸收能力减弱,肾脏对磷的排泄能力增强。
【学位单位】：沈阳农业大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：S858.31
【部分图文】：

胫骨,周龄,低钙,组图

17对照组低钙模型 1 组低钙模型 2 组图 13 77 周龄 CLO 胫骨 micro-CT 扫描结果Fig13 CLO tibial micro-CT scan results of 77 weeks old age

胫骨,周龄,低钙

对照组低钙模型 1 组低钙模型 2 组图 14 79 周龄 CLO 胫骨 micro-CT 扫描结果Fig14 CLO tibial micro-CT scan results of 79 weeks old age3.2.3 胫骨 TRAP 染色结果：77、79 周龄 CLO 胫骨 TRAP 染色结果如图 15 和图 16 所示，在镜下放大 200 倍可

周龄,胫骨,低钙,十二指肠

对照组低钙模型 1 组低钙模型 2 组图 16 79 周龄胫骨 TRAP 染色观察 OC 数量（200×）Fig16 Tibial TRAP staining at 79 weeks of age to observe the number of OC（200×）3.3 十二指肠中钙磷代谢相关因子表达检测结果十二指肠中的 1,25-(OH)2VD 与其受体 VDR 结合后，可促进进入细胞内 Ca2+与

【参考文献】