犬源益生芽孢杆菌的筛选及初步应用

发布时间：2020-10-17 08:45

　　 犬细菌性腹泻是临床中常见的疾病,主要是由于肠道中菌群比例失调而引发的。临床治疗一般选用抗生素加补液疗法。近期,因抗生素的不合理使用而出现的耐药菌株,使得细菌病的治疗越来越复杂。芽孢杆菌作为安全性和抗逆性都极佳的益生菌已在畜牧行业被广泛应用,但对犬功效的报道还较少。因此,本研究旨在筛选优良的犬源芽孢杆菌,研究其对动物免疫功能的影响,以便为其日后在犬日粮中的合理使用奠定一定基础。本研究采用热处理法从犬粪中分离芽孢杆菌,通过抑菌试验,药物敏感性试验,耐酸、胆盐和高温试验筛选出一株芽孢杆菌,经形态学、生化试验和16S rDNA序列分析鉴定为枯草芽孢杆菌,命名为QY-20。以昆明鼠为试验动物,观察枯草芽孢杆菌对鼠伤寒沙门菌感染动物的保护力。选取48只小鼠,随机分为SP组、BS组、LB组和SL组,分别灌胃生理盐水、10~8 CFU/mL枯草芽孢杆菌、10%肠胃宝益生菌、10~8 CFU/mL枯草芽孢杆菌和10%肠胃宝益生菌的等量混合菌剂,剂量均为0.2 mL/只,试验期四周。分别于试验开始第14天和第28天,每组随机选择3只小鼠,进行眼球采血,无菌摘取胸腺、脾脏并收集盲肠内容物,测出免疫器官指数以及盲肠内容物中菌群的变化;用ELISA方法对收集到的血清进行IgG、IL-4、INF-γ的检测,试验第28天时,将各组剩余小鼠以3LD_(50)腹腔注射鼠伤寒沙门菌,观察枯草芽孢杆菌对小鼠的保护力,测出脾脏和肠内容物中的荷菌量,并制作空肠石蜡包埋切片。结果表明:(1)随着试验天数的增加,各试验组昆明鼠体重都有不同程度增长,BS组增长最明显。(2)饲喂枯草芽孢杆菌QY-20能显著增加小鼠盲肠中乳酸菌数目,降低大肠杆菌数目。(3)饲喂枯草芽孢杆菌QY-20后,BS组脾脏指数、胸腺指数、血清中IgG、IL-4、IFN-γ水平较SP组均显著或极显著增加;SL组胸腺指数、血清中IL-4、IFN-γ水平较LB组均增加显著。(4)BS组死亡率比SP组低66.7%,SL组死亡率比LB组低16.7%。(5)饲喂枯草芽孢杆菌QY-20能显著或极显著减少盲肠内容物和脾脏中鼠伤寒沙门菌的数量。(6)攻毒后SP组肠道损伤最严重,BS组损伤最轻微;SL组损伤较LB组轻微。从以上结果可知,枯草芽孢杆菌QY-20可以提高昆明鼠的免疫功能和对鼠伤寒沙门菌感染的抵抗力,其与肠胃宝益生菌共同作用效果优于后者单独使用。
【学位单位】：吉林农业大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：S816
【部分图文】：

图 1.1 芽孢杆菌菌落形态 图 1.2 芽孢杆菌液体培养形态Fig.1.1 Colonial morphology of Bacillus Fig.1.2 Bacillus liquid culture morpho2 芽孢杆菌的筛选2.1 革兰染色结果镜检视野中可见两端呈紫色的杆菌，中间有一个与菌体同宽的椭圆形未。具体形态如图 1.3 所示。2.2 芽孢染色结果镜检视野中呈现中央绿色，两端粉红色的杆状菌体，两端颜色较深。具图 1.4 所示。

图 1.1 芽孢杆菌菌落形态 图 1.2 芽孢杆菌液体培养形态Fig.1.1 Colonial morphology of Bacillus Fig.1.2 Bacillus liquid culture morpho2 芽孢杆菌的筛选2.1 革兰染色结果镜检视野中可见两端呈紫色的杆菌，中间有一个与菌体同宽的椭圆形未。具体形态如图 1.3 所示。2.2 芽孢染色结果镜检视野中呈现中央绿色，两端粉红色的杆状菌体，两端颜色较深。具图 1.4 所示。

图 1.1 芽孢杆菌菌落形态 图 1.2 芽孢杆菌液体培养形态Fig.1.1 Colonial morphology of Bacillus Fig.1.2 Bacillus liquid culture morphol孢杆菌的筛选 革兰染色结果检视野中可见两端呈紫色的杆菌，中间有一个与菌体同宽的椭圆形未着具体形态如图 1.3 所示。 芽孢染色结果检视野中呈现中央绿色，两端粉红色的杆状菌体，两端颜色较深。具体 1.4 所示。
【参考文献】

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3 吴英韬;袁杰利;;益生菌在肠道疾病治疗中的应用[J];传染病信息;2015年04期

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5 祝天龙;李奎;邵强;王迎松;盛云华;陈峥玙;王友明;;枯草芽孢杆菌制剂对弱仔猪生长性能、免疫指标的影响[J];黑龙江畜牧兽医;2015年11期

6 郑和娟;薛辛东;;益生菌预防新生儿坏死性小肠结肠炎应用进展[J];中国实用儿科杂志;2015年02期

7 冯卓;刘艳环;肖家美;朱言柱;李海涛;钟宏鹏;苗利光;;MSL抗菌肽对鼠伤寒沙门氏菌感染的预防作用[J];特产研究;2014年04期

8 姚营;李晓宇;徐永平;金礼吉;宗颖;王妮;王林会;;鼠伤寒沙门氏菌诱导昆明小鼠肠道感染模型的建立[J];现代生物医学进展;2014年28期

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10 刘昆;犬源益生芽孢杆菌的筛选及其对攻毒幼犬的保护作用[D];四川农业大学;2009年

本文编号：2844556