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N-氨甲酰谷氨酸对小鼠免疫机能影响的研究

发布时间:2020-10-21 14:46
   精氨酸作为维持哺乳动物尤其是幼龄动物最佳生长和氮平衡的必需氨基酸,在蛋白质的合成代谢、提高肠道免疫力以及多胺和一氧化氮的合成中都起着十分重要的作用。然而,精氨酸的使用成本相对过高,且在日粮中按有效剂量添加时还可能对其他氨基酸的代谢产生干扰。因此,在动物生产中尚不能广泛使用精氨酸。N-氨甲酰谷氨酸(NCG)作为精氨酸合成激活剂N-乙酰谷氨酸(NAG)的结构类似物,具有价格低廉、合成方便等特点,很好的弥补了精氨酸的不足,并且代谢稳定、半衰期较长,具有广泛的生物学功能。对增强机体的免疫机能有十分重要的作用。NO在机体内具有多种生物活性,而NCG能够提高NO的合成水平,增强机体的免疫机能。本试验拟以昆明小鼠为试验动物,通过连续灌胃不同剂量的NCG,研究NCG对小鼠免疫机能的调节作用。试验设对照组(A组,0mg/kg)、低剂量组(B组,500mg/kg)、中剂量组(C组,1000mg/kg)和高剂量组(D组,1500mg/kg),连续灌胃28d,分别于灌胃14d与28d后采集样品。试验结果显示:(1)NCG对小鼠的生长有一定的促进作用;(2)NCG能够显著提高小鼠的胸腺指数和脾脏指数(P0.05)(3)高剂量的NCG能增加小鼠血清中IFN-γ的含量(P0.01);(4)高剂量的NCG能显著提高小鼠血清抗体IgG的水平(P0.01);(5)高剂量的NCG能够显著提高小肠黏膜sIgA的水平(P0.01),增加小肠绒毛高度,降低隐窝深度;(6)高剂量的NCG能显著增加小鼠肝脏中NO和NOS的生成(P0.01),NO在脾脏中的含量大于肝脏,NOS在肝脏中的含量大于脾脏;(7)NCG能显著提高小鼠肝脏中SOD活力(P0.01),(8)NCG对小鼠外周血淋巴细胞的增殖无显著作用(P0.05)。结论表明,NCG能提高小鼠的免疫器官指数、血清细胞因子的含量、血清和黏膜抗体水平,并能促进小肠黏膜的发育,提示灌服NCG对小鼠的免疫机能具有一定促进作用;NCG能够提高小鼠血清、肝脏等组织中NO和NOS的合成水平,提示NCG对小鼠的免疫机能的增强作用可能与NO的合成水平升高有关。
【学位单位】:山东农业大学
【学位级别】:硕士
【学位年份】:2019
【中图分类】:S816
【部分图文】:

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1.1 NCG 的理化性质近年来研究表明,精氨酸作为维持哺乳动物尤其是幼龄动物生长发育需氨基酸,在蛋白质的合成代谢、提高肠道免疫力以及多胺和一氧化氮(中都起着十分重要的作用。然而,精氨酸的使用成本相对过高,且在日粮添加时还可能对其他氨基酸的代谢产生干扰,因此,在动物生产中尚不能酸。N-氨甲酰谷氨酸(NCG)作为精氨酸合成激活剂 N-乙酰谷氨酸(NA似物,具有价格低廉、合成方便等特点,很好弥补了精氨酸的不足,在动来越受到重视。谷氨酸的氨基被氨基甲酰化后得到 NCG。NCG 分子式为 C6H10N2O5,190.15,纯品为无色透明的晶体。NCG 不溶于水,微溶于有机溶剂,活性3.02,其盐类溶于水。目前,可通过红外光谱、核磁共振等方法鉴定 NCG效液相色谱法检测其含量。

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又是氨基甲酰磷酸合成酶-Ⅰ(CPS-Ⅰ)的变构催化剂,NCG 的性有的功效与 NAG 相同。其次,NCG 又可作为二氢吡咯-5-羧活剂,促进谷氨酰胺和脯氨酸合成精氨酸的反应。NCG 在动物发挥作用参与机体尿素循环,且其代谢稳定、半衰期较长,具有然 NCG 对 CPS-Ⅰ的亲和力稍低于 NAG,但 NCG 对氨基酰化酶NAG 在体内会迅速水解,但 NCG 无论在体内或是体外都非常的降解作用。NCG 在体内经过一系列代谢过程可以转化为 NO活性的物质。上世纪 80 年代末期,有研究证明精氨酸是 NO 的合酶(NOS)催化生成具有生物活性的 NO(Polmer et al., 198膜,进入线粒体内部激活 CPS-Ⅰ促进氨甲酰磷酸的生成,从水平。NO 和多胺在动物体内作用广泛,可促进局部血液循环,必需前体物质是不可缺少的,而 NCG 能有效提高精氨酸的含量机体的正常生理机能具有十分重要的作用。

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山东农业大学硕士专业学位论文⑧切片:将蜡块边缘修整后安装固定。切片时将厚度调至 3μm,均将切下的的蜡带用小镊子转移至 42℃水浴盒中并展开,用载玻片将其完全附着在载玻片上,并放入 60℃的烤片盒中放置 3h⑨脱蜡:将烤好后的切片浸入二甲苯溶液中,静置 10min;重复⑩复水:将脱蜡后的切片浸入无水乙醇中,静置 5min;重复一次(5min)→80%酒精(5min)→70%酒精(5min)→超纯水(5min)将复水后获得的切片进行 HE 染色,其步骤如下图所示:
【参考文献】

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