γ-内脏平滑肌型actin基因的可变剪接对湖羊肌肉发育和肉质性状的调控作用

发布时间：2020-10-22 00:43

　　 湖羊是我国特有的羔皮用绵羊品种,具有性成熟早,繁殖率强,肉质细嫩的优点。但与杜泊羊等专门化肉羊品种相比,湖羊的肉用性能和屠宰率较低。本论文针对雄性初生及六月龄湖羊与杜泊羊×湖羊杂交F1代羊的肌纤维特性、MYL3与ACTG2基因的可变剪接在不同肌肉组织的表达情况进行研究,探究湖羊骨骼肌生长发育的分子机理,探寻MYL3和ACTG2基因与肌纤维生长和脂肪积累的关系,这些结果可为湖羊产肉性状的分子改良提供新的思路,也为肉用湖羊新品系的选育奠定理论基础。本试验屠宰了 12头雄性初生及六月龄纯种湖羊和杜泊×湖羊杂交F1代羊(刚出生、6月龄各半),采集了 BFM、LDM、MGM、GM、VLM、SOL和SSC7种肌肉组织,(1)利用石蜡切片、HE染色测定了不同肌肉组织的肌纤维直径和长度,利用油红O染色显示肌肉样品的脂肪分布;(2)分析了雄性纯种湖羊、杜泊×湖羊杂交羊7种肌肉组织内MYL3、ACTG2及其5' UTR可变剪接的表达情况;(3)构建ACTG25'UTR不同剪接方式的双荧光素酶报告基因,转染猪肾细胞(PK-15)和鸡成纤维细胞(DF-1),测定了荧光素酶活性和ACTG2 5'UTR不同剪接方式的表达情况。研究结果如下:(1)除雄性湖羊SOL肌纤维直径和长度在初生羊和6月龄羊间不存在显著差异外,雄性湖羊和杜泊×湖羊杂交F1代羊初生羊的BFM、LDM、MGM、GM、VLM和SSC肌纤维直径和长度均显著或极显著小于6月龄羊(P0.05或P0.01);雄性湖羊初生羊、6月龄羊的LDM样品肌纤维直径均小于同月龄的杜泊×湖羊杂交F1代羊(P0.05);雄性6月龄纯种湖羊BFM(P0.05)、LDM(P0.01)肌纤维长度显著或极显著小于同月龄杜泊×湖羊杂交羊。雄性纯种湖羊及杜泊X湖羊杂交羊初生羊BFM的脂肪含量显著低于同品种的6月龄羊(P0.05),SOL中脂肪含量极显著低于同品种6月龄羊(P0.01)。雄性纯种湖羊初生羊VLM.SSC肌肉组织中脂肪含量显著低于同品种6月龄羊(P0.05)。(2)构建了 ACTG2 5'7UTR不同剪接序列(65bp、83bp、116bp)的双荧光素酶报告基因pLUC-pLUC-83、pLUC-116载体,猪肾细胞(PK-15)和鸡成纤维细胞(DF-1)转染结果显示,pLUC-83和pLUC-116启动子活性最强,可显著提高ACTG2 83bp的5'UTR序列的载体的表达量(P0.05)。(3)初生纯种湖羊SOL中MYL3的表达量极显著高于LDM、SSC(P0.01),显著高于MGM中的表达量(P0.05);BM中MYL3的表达量显著高于LDM、SSC(P0.05);SOL中ACTG2基因5'UTR长度为83bp的剪接表达量显著高于LDM(P0.05);SSC中该种剪接形式在总的ACTG2基因表达量所占的比例显著高于BFM、GM、VLM、SOL(P0.05)。6月龄纯种湖羊BFM中MYL3基因的表达量极显著高于其他6种组织(P0.01),LDM中MYL中的表达量显著高于SSC(P0.05);BFM、MG 中ACTG2基因的表达量显著高于其它5种组织(P0.05);VLM中ACTG2 5' UTR长度为83bp的剪接的表达量显著高于LDM MGM、SSC样品(P0.05);初生杜泊×湖羊杂交羊LDM中ACTG2 5' UTR长度为83bp的剪接的表达量极显著高于BFM、MGM(P0.01),显著高于GM、VLM、SOL(P0.05);6月龄杜泊×湖羊杂交羊BFM中MYL3基因的表达量显著高于LDM、VLM、SSC(P0.05);MGM中ACTG2基因的表达量极显著高于BFM(P0.01),显著高于 GM、VLM、SSC(P0.05);SOL 中ACTG2 5' UTR 长度为 83bp 的剪接形式的表达量极显著高于其它6种组织(P0.01),且在LDM中表达量显著高于MGM、GM、VLM(P0.05)。MYL3、ACTG2基因及ACTG2 5' UTR长度为83bp的剪接形式对湖羊的肌肉生长发育及肉质都有一定的影响。
【学位单位】：浙江师范大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：S826
【部分图文】：

禮ＩＳ９??纯种湖羊ＬＤＭ直径?杜泊ｘ湖羊杂交羊ＬＺＷ直径??图２－３?６月龄雄性湖羊、杜泊ｘ湖羊杂交羊５尸Ｍ、ＺｉＷ横切面石蜡切片ＨＥ染色（２０〇ｘ）??Ｆｉｇ．２－３?Ｃｒｏｓｓ?ｓｅｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ＬＤＭ?ａｎｄ?ＢＦＭ?ｏｆ?ｓｉｘ－ｍｏｎｔｈ?ｏｌｄ?ｍａｌｅ?Ｈｕ?ｓｈｅｅｐ?ａｎｄ?Ｄｏｒｐｅｒ?ｘ?Ｈｕ??ｓｈｅｅｐ?（２００?ｘ）??１４??

纯种湖羊ＬＤＭ长度?杜泊ｘ湖羊杂交羊ＺＪＷ长度??图２４?６月龄雄性湖羊、杜泊ｘ湖羊杂交羊５／＾Ｍ、ＺＺ）Ｍ纵切面石蜡切片ＨＥ染色（２０〇ｘ）??Ｆｉｇ．２－４?Ｌｏｎｇｉｔｕｄｅ?ｓｅｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ＬＤ

纯种湖羊ＬＤＭ长度?杜泊ｘ湖羊杂交羊ＺＪＷ长度??２４?６月龄雄性湖羊、杜泊ｘ湖羊杂交羊５／＾Ｍ、ＺＺ）Ｍ纵切面石蜡切片ＨＥ染色（２０〇Ｆｉｇ．２－４?Ｌｏｎｇｉｔｕｄｅ?ｓｅｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ＬＤＭ?ａｎｄ?ＢＦＭ?ｏｆ?ｓｉｘ－ｍｏｎｔｈ?ｏｌｄ?ｍａｌｅ?Ｈｕ?ｓｈｅｅｐ?ａｎｄ?ＤｏｒｐｅＨｕ?ｓｈｅｅｐ?（２００?ｘ）??２５０?？??Ｉ画画ｉ?１?〇器｜?■画ｉ?｜?〇器??直径（ＨＭ）?长度（ＨＭ）??－
【参考文献】

相关期刊论文 前10条

1 王红杨;刘冉冉;赵桂苹;郑麦青;李庆贺;李鹏;刘丽;文杰;;鸡肌肉组织实时荧光定量PCR及Western杂交内参基因的筛选[J];畜牧兽医学报;2015年07期

2 张斌;王静;宋敏艳;刘学洪;李杨;史宪伟;;槟榔江水牛ACTA1基因多态性与生长性状的相关性研究[J];中国牛业科学;2014年06期

3 张冉;林浴霜;;牛心型α肌动蛋白基因的进化及表达研究[J];中国畜牧兽医;2013年08期

4 谌启亮;彭增起;沈明霞;吴海娟;王复龙;卢桂松;;牛肉肌纤维直径和结缔组织含量与嫩度相关性研究[J];食品科学;2012年13期

5 李航;王彬彬;高秉仁;柳江燕;赵启明;陈文胜;王炜;杨堃;;一个新的ACTC1基因5'端剪切位点突变可能在先天性心脏病室间隔缺损发病中起重要作用(英文)[J];中国组织工程研究;2012年11期

6 胡新旭;赵丽红;张勇;周映华;高书锋;刘惠知;张德元;;肌纤维特性与肉品质关系的研究进展[J];饲料研究;2012年03期

7 田万年;张守发;李香子;高青山;金鑫;严昌国;;延边黄牛α-肌动蛋白1基因的多态性及其与生长性状的相关分析[J];中国畜牧兽医;2011年08期

8 崔丽艳;杨硕;张捷;;LCN2基因启动子区荧光素酶报告基因载体的构建及鉴定[J];中国误诊学杂志;2011年21期

9 朱道立;陈佩林;王康乐;葛娟;别林;;小鼠快、慢肌卫星细胞的分离培养及β肌动蛋白的表达[J];上海交通大学学报(医学版);2011年01期

10 赵有璋;;杜泊羊及其在我国初步利用效果[J];现代畜牧兽医;2011年01期

相关硕士学位论文 前2条

1 陈颖;两型骨骼肌纤维在体外培养过程中的相互转换[D];遵义医学院;2016年

2 王伟;湖羊种质资源的保护及开发利用[D];苏州大学;2007年

本文编号：2850834