黄芩提取物抗单增李斯特菌感染的作用的研究
发布时间：2020-11-03 07:31
单核细胞增多性李斯特菌(Listeria monocytogenes;L.monocytogenes),简称单增李斯特菌,是六种常见李斯特菌中感染性最强的一种,是临床上常见李斯特菌病的主要病原体,为兼性厌氧的机会致病菌,有较强的运动能力。单增李斯特菌广泛存在于自然环境当中,常见于人类及动物的粪便、不同地区的土壤、水生环境以及各类植物和动物来源的食物(如奶酪、牛奶、鸡蛋、香肠、蔬菜等),可机会性的感染老人,孕妇,小孩等免疫力低下人群,相关感染性疾病具有较高的死亡率。随着抗生素不断地滥用和乱用,细菌耐药性逐渐成为了临床感染疾病治疗中的重要难题,单增李斯特菌作为常见的革兰氏阳性致病菌也被视为人类和动物健康的重要威胁。近年来,随着抗毒力策略的不断发展,细菌毒力因子在侵袭过程中作用越来越受到人们的关注。同其它革兰氏阳性菌一样,单增李斯特菌在侵袭过程中会表达多种毒力因子用于菌体的生存和增殖。当菌体被宿主细胞吞噬后,会被困于细胞吞噬泡中最终被溶酶体降解,而此时单增李斯特菌会大量表达适应吞噬泡中酸性环境的李斯特菌溶血素(listeriolysin O;LLO),用于协助菌体逃逸至细胞质中,进而完成增殖过程。已有研究表明,当单增李斯特菌敲除LLO编码基因后,菌体不再具备从吞噬泡中逃逸的能力,且会几乎完全丧失对模型动物的致病能力。因此LLO是单增李斯特菌感染疾病的潜在治疗靶点。本研究通过溶血实验、生长曲线和蛋白免疫印迹实验发现黄芩提取物在较低浓度范围内(8-64μg/ml)即可显著抑制培养物上清的溶血活性,但药物在这一浓度范围不影响细菌生长,也不影响细菌成孔毒素LLO的表达,而是直接中和LLO介导的成孔活性。体外细胞感染试验中,黄芩提取物处理下,降低细胞内细菌增殖,细菌介导的细胞毒性作用也显著下降。体内动物感染试验发现黄芩提取物治疗后可降低靶组织内细菌菌落定植,对细菌感染所致的动物死亡具有一定的抑制作用。黄芩具有抗肿瘤,杀菌,抗炎和清除自由基等生物学活性,是我国中医药宝库中最常用的药物之一。本研究为黄芩提取物抑制LLO溶血活性的机制研究提供了重要的实验依据,也为单增李斯特菌感染疾病的治疗研究提供了重要的理论基础和物质基础。
【学位单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：S853.7
【部分图文】：
图 1.1 黄芩提取物对细菌培养物上清液溶血活性的影响 The inhibition of Scutellaria baicalensis extract on the hembacterial supernatant物对单增李斯特菌的抑菌作用黄芩提取物是否通过抑制单增李斯特菌的生长从而影响，我们对黄芩提取物的最小抑菌浓度进行了测定，并绘制。从实验结果中我们发现，黄芩提取物的 MIC 数值约为 8-64 μg/ml）对单增李斯特菌的生长并没有显著的影响（，黄芩提取物对单增李斯特菌并没有显著的杀菌活性，且芩提取物对单增李斯特菌的生长几乎没有影响，因此可以液上清溶血活性下降的因素。
图 1.2 黄芩提取物处理下单增李斯特菌生长曲线Fig.1.2 The grown-curve of L.monocytogenes in the presence of varioconcentrations of Scutellaria baicalensis extract提取物对培养液上清中 LLO 表达的影响验证黄芩提取物对 LLO 表达的影响，我们随后进行了蛋白免疫印中我们将与不同浓度的黄芩提取物（8-64 μg/ml）孵育后的单增李上清进行 SDS-PAGE 电泳、电转后孵育 LLO 的特异性抗体。从实，不同浓度的黄芩提取物与单增李斯特菌共同孵育后，培养液上清并没有受到显著的影响（见图 1.3）。既在测试浓度内的溶血活性黄芩提取物抑制单增李斯特菌分泌 LLO 造成。
.2 黄芩提取物处理下单增李斯特菌生长own-curve of L.monocytogenes in the presentrations of Scutellaria baicalensis extrac养液上清中 LLO 表达的影响物对 LLO 表达的影响，我们随后进行同浓度的黄芩提取物（8-64 μg/ml）孵S-PAGE 电泳、电转后孵育 LLO 的特异黄芩提取物与单增李斯特菌共同孵育后著的影响（见图 1.3）。既在测试浓度内制单增李斯特菌分泌 LLO 造成。
【参考文献】
本文编号：2868281
【学位单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：S853.7
【部分图文】：
图 1.1 黄芩提取物对细菌培养物上清液溶血活性的影响 The inhibition of Scutellaria baicalensis extract on the hembacterial supernatant物对单增李斯特菌的抑菌作用黄芩提取物是否通过抑制单增李斯特菌的生长从而影响，我们对黄芩提取物的最小抑菌浓度进行了测定，并绘制。从实验结果中我们发现，黄芩提取物的 MIC 数值约为 8-64 μg/ml）对单增李斯特菌的生长并没有显著的影响（，黄芩提取物对单增李斯特菌并没有显著的杀菌活性，且芩提取物对单增李斯特菌的生长几乎没有影响，因此可以液上清溶血活性下降的因素。
图 1.2 黄芩提取物处理下单增李斯特菌生长曲线Fig.1.2 The grown-curve of L.monocytogenes in the presence of varioconcentrations of Scutellaria baicalensis extract提取物对培养液上清中 LLO 表达的影响验证黄芩提取物对 LLO 表达的影响，我们随后进行了蛋白免疫印中我们将与不同浓度的黄芩提取物（8-64 μg/ml）孵育后的单增李上清进行 SDS-PAGE 电泳、电转后孵育 LLO 的特异性抗体。从实，不同浓度的黄芩提取物与单增李斯特菌共同孵育后，培养液上清并没有受到显著的影响（见图 1.3）。既在测试浓度内的溶血活性黄芩提取物抑制单增李斯特菌分泌 LLO 造成。
.2 黄芩提取物处理下单增李斯特菌生长own-curve of L.monocytogenes in the presentrations of Scutellaria baicalensis extrac养液上清中 LLO 表达的影响物对 LLO 表达的影响，我们随后进行同浓度的黄芩提取物（8-64 μg/ml）孵S-PAGE 电泳、电转后孵育 LLO 的特异黄芩提取物与单增李斯特菌共同孵育后著的影响（见图 1.3）。既在测试浓度内制单增李斯特菌分泌 LLO 造成。
【参考文献】
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本文编号：2868281
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