新疆部分地区新生犊牛微小隐孢子虫流行病学调查

发布时间：2020-11-22 02:19

　　 随着我国养牛业集约化养殖不断加快,犊牛腹泻防控已成为亟待解决的重要问题。微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)是重要的人兽共患机会性致病原虫,是目前公认的引起犊牛腹泻的四种主要病原之一,在世界范围内流行广泛。牛被认为是导致人类人畜共患微小隐孢子虫病的主要宿主,且与许多人类介水隐孢子虫病的爆发有关,具有较大的人兽共患风险。本研究从奶牛业生产实际出发,对新疆部分地区新生犊牛微小隐孢子虫进行流行病学调查,掌握新生犊牛微小隐孢子虫的感染情况及流行特点,可为了解微小隐孢子虫在动物和人之间传播的潜在危害性、传播动态,以及为我国新疆奶牛源微小隐孢子虫流行病学研究及防治提供基础资料。(1)于2017年9月至2018年7月期间,采用饱和蔗糖溶液漂浮法、改良抗酸染色法、巢式PCR、PCR-RFLP分析和隐孢子虫SSU rRNA基因序列分析,对新疆乌什、阿拉尔、温宿、石河子、呼图壁、铁门关和奎屯7个地区12个集约化奶牛养殖场232头1月龄内新生犊牛粪便进行微小隐孢子虫感染情况调查。显微镜检查发现隐孢子虫直径4~6μm,具有蓝紫色的折光性,呈卵球形或椭圆形,具有1个大的残体和4个子孢子;经改良抗酸染色法染色后,隐孢子虫卵囊呈玫瑰红色,周边背景呈淡蓝色。基于SSU rRNA基因对12个奶牛场的232头1月龄内新生犊牛粪便DNA样品进行巢式PCR扩增,隐孢子虫总体感染率38.4%,微小隐孢子虫感染率为37.9%,研究发现腹泻和未腹泻犊牛之间微小隐孢子虫感染率在统计学上存在极显著差异(P0.001)。基于SSU rRNA基因的RFLP分析和序列分析,共鉴定出3种隐孢子虫虫种:微小隐孢子虫、牛隐孢子虫和瑞氏隐孢子虫,其中微小隐孢子虫是优势感染虫种,在研究区域新生犊牛中普遍存在,具有较大的人兽共患风险。(2)于2017年9月至2018月9月期间,对新疆南疆阿克苏地区两规模化牛场进行了1年的跟踪调查,采用方差齐性分析发现微小隐孢子虫感染率季节性差异不明显(P0.05),十团牛场微小隐孢子虫感染无季节差异(P0.05),五团牛场夏季和冬季微小隐孢子虫感染率存在差异(P=0.044)。
【学位单位】：塔里木大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：S858.23
【部分图文】：

图 2-1 新疆部分地区新生犊牛粪便样品地理分布phical origins of faecal samples from neonatal calves in part及溶液表 2-1 主要试剂Table 2-1 Main reagents试剂名称es of Reagents生产厂Manufapotassium dichromate) 天津福晨化学试L2000Marker 大连 TaKabo II 限制性内切酶 大连 TaKaiew I 型核酸染料 北京博奥拓达科PCR Super Mix (+dye) 北京全式金生物. Stool DNA Kit 美国 Omega B琼脂糖 美国 Sigma-A

下隐孢子虫的检出率较低。采用饱和蔗糖溶液漂浮法，对232份新生犊牛粪便样品进行检查，结果发现，最早可在4日龄犊牛粪便中检测到隐孢子虫卵囊。在饱和蔗糖溶液中，隐孢子卵囊呈近卵圆形，呈现淡蓝紫色，周围蓝绿色折光带明显，见图2-2；经改良酸染色法染色后，隐孢子虫卵囊呈玫瑰红色，周边背景呈淡蓝色，对比明显，见图2-3。图 2-2 饱和蔗糖溶液中隐孢子虫 图 2-3 经改良抗酸染色的隐孢卵囊形态观察(400 ×) 子虫卵囊形态观察(1000 ×)Figure2-2 Morphological observation Figure2-3 Morphological observation ofof Cryptosporidium oocysts in saturated Cryptosporidium oocysts stained bysucrose solution flotation(400 ×) improved acid-fast staining(1000 ×)

结果发现，最早可在4日龄犊牛粪便中检测到隐孢子虫卵囊。在饱和蔗糖溶液中，隐孢子卵囊呈近卵圆形，呈现淡蓝紫色，周围蓝绿色折光带明显，见图2-2；经改良酸染色法染色后，隐孢子虫卵囊呈玫瑰红色，周边背景呈淡蓝色，对比明显，见图2-3。图 2-2 饱和蔗糖溶液中隐孢子虫 图 2-3 经改良抗酸染色的隐孢卵囊形态观察(400 ×) 子虫卵囊形态观察(1000 ×)Figure2-2 Morphological observation Figure2-3 Morphological observation ofof Cryptosporidium oocysts in saturated Cryptosporidium oocysts stained bysucrose solution flotation(400 ×) improved acid-fast staining(1000 ×)
【参考文献】

相关期刊论文 前3条

1 王臣荣;齐萌;李俊强;张振杰;刘鹏飞;余复昌;曹建科;宁长申;张龙现;;规模化引种场进口奶牛隐孢子虫种类、基因亚型鉴定及其生物安全评价[J];中国人兽共患病学报;2015年11期

2 方艳琴;杜帅之;郭雅旭;林青;赵光辉;;不同Ⅱd亚型微小隐孢子虫对BALB/c小鼠的感染性[J];西北农业学报;2014年12期

3 曹斌斌;赵勐;林涛;马翀;曹杰;齐长明;;犊牛腹泻病因及治疗方法[J];中国奶牛;2012年05期

本文编号：2893952