血小板活化因子（PAF）对牦牛卵母细胞体外成熟与早期胚胎发育的影响

发布时间：2020-12-08 18:52

　　牦牛是生活在青藏高原及毗邻地区不可替代的畜种,为当地牧民提供重要的生产和生活资料,但牦牛卵母细胞体外成熟（IVM）率和胚胎发育率低,很大程度上限制了牦牛胚胎移植的推广应用。血小板活化因子（PAF）在繁殖和发育过程中具有重要调控作用。因此,本研究拟探讨PAF对牦牛卵母细胞IVM、早期胚胎发育的影响及其分子调控。试验将牦牛1 025个卵丘卵母细胞复合体（COCs）分别在含不同PAF浓度(0、10^-8、10^-7、10^-6 moL/L)的IVM液中成熟后,与奶牛精子体外受精（IVF）和胚胎体外培养（IVC）,比较分析各组卵母细胞成熟率、卵裂率和囊胚率;采用qPCR检测成熟卵母细胞及不同发育阶段的胚胎中凋亡基因（BAX和BCL-2）、表皮生长因子（EGF）及其受体（EGFR）、发育相关基因（C-fos、OCT-4和NANOG）等基因的相对表达量。结果表明:（1）IVM液中PAF浓度为10^-77 moL/L组的卵母细胞成熟率（92.16±0.19%）、卵裂率（77.2±0.85%）和囊胚率（46.71±0.68... 

【文章来源】：西南民族大学四川省

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

PAF的化学分子结构式（Ishiietal.,2000）

计分析SPSS软件对实验数据进行分析，单因素方差分析牦牛卵母细胞Mean±SD”表示；牦牛成熟卵母细胞各个相关基因的表达差组的 Ct 值作为参考，采用比较阈值法（ 2-ΔΔCt法）进行相对定SS 软件用 LSD 进行方差分析和显著性检验，P＞0.05 表示差异与分析卵母细胞成熟卵母细胞体外成熟培养 24 h 后如图 2-1，蓝色圆圈圈出部分为胞，未圈出的卵母细胞可见其卵丘细胞均扩张明显，属于成熟

平（P<0.05）；OCT-4 基因的 mRNA 表达水平在 PAF 浓度为 0、10-8、10-7m微量表达，在 PAF 浓度为 10-6moL/L 时不表达；NANOG 基因的 mRNA 平在 PAF 浓度为 10-8、10-7、10-6moL/L 时微量表达，在 PAF 浓度为 0 时到表达。在牦牛成熟卵母细胞中表皮生长因子 EGF 及其受体 EGFR 的表均高于其他基因的表达水平。

【参考文献】：
期刊论文
[1]牦牛分布特点及其种群数量[J]. 孟庆辉,陈永杏,董红敏,白加德,刘艳菊,郭青云,成振华.  家畜生态学报. 2017(03)
[2]体外受精生产犏牛胚胎与移植试验研究[J]. 孙永刚,徐惊涛,才让东智,马志杰.  畜牧兽医学报. 2013(05)
[3]转录因子0ct4、Sox2和Nanog在早期胚胎发育过程中的表达调控[J]. 李东伟,李文雍.  生物学杂志. 2007(03)
[4]小鼠早期胚胎发育过程中细胞凋亡及凋亡基因表达的检测[J]. 李威,王连卿,苏静艳,袁丽丽,严云勤.  细胞生物学杂志. 2006(04)
[5]小鼠早期胚胎发育过程中TGF-α和EGF-R mRNA的表达[J]. 严云勤,谭景和,张黎霞.  动物学报. 2002(04)

博士论文
[1]EGF、TGFα、EGFR在绵羊早期胚胎中的表达和作用研究[D]. 周平.内蒙古大学 2007
[2]猪卵母细胞和早期胚胎中c-mos和Oct-4基因表达以及RNAi研究[D]. 刘丽清.东北农业大学 2007



本文编号：2905522