高产纤维分解酶木霉和黑曲霉诱变选育及发酵条件优化
发布时间：2020-12-21 20:38
我国能量饲料存在较大缺口,2016年玉米全年进口量达到了330万t。秸秆产量丰富,蕴含大量潜在能值。但秸秆纤维含量高,不易被动物消化利用,若经科学处理可作为能量资源的补充。1.通过对7株木霉菌株,利用DNS酶活测定和玉米秸秆刚果红培养基法,筛选出高产纤维分解酶的菌株,为其高效筛选提供参考。2.对筛选出的木霉菌株和黑曲霉（实验室保藏菌）进行诱变选育,（紫外、硫酸二乙酯、紫外-硫酸二乙酯复合诱变）获得产纤维分解酶高的突变菌,并对其产酶发酵条件和水解秸秆能力进行研究。（1）木霉和黑曲霉经紫外、硫酸二乙酯、紫外-硫酸二乙酯复合诱变筛选出了一株突变菌康氏木霉UH-1和黑曲霉X1U4-1。与原菌相比,康氏木霉UH-1木聚糖酶提高了42.7%,纤维素酶提高了78.5%。黑曲霉X1U4-1滤纸酶提高了66.7%。（2）康氏木霉UH-1最适的固态发酵条件为硫酸铵添加量2%、接种量1.1 ml、含水量67%、发酵时间84 h,在此条件下滤纸酶活达到0.86 U/g、纤维素酶活99.81 U/g、木聚糖酶活1150.32 U/g。黑曲霉X1U4-1最适固态发酵条件为发酵时间72 h、玉米芯:麸皮=3:7、接...
【文章来源】：内蒙古农业大学内蒙古自治区
【文章页数】：75 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
木霉菌产透明圈情况
产纤维分解酶菌株初筛和复筛：在最佳致死率条件下，经多轮紫外突变菌株长得快，菌丝短、产孢子晚、透明圈大的菌落用 0.9%的后涂到传代培养基上，培养 4-6 天长出单菌落后收集保藏并稀释成体发酵培养基上进行发酵测定其纤维素酶活、木聚糖酶活和滤纸酶小确定高产纤维分解菌株。变菌紫外、化学交叉复合诱变菌紫外、化学交叉复合诱变步骤同上述一致，挑选出最优突变菌与分析子适宜萌发时间
图 4 木霉不同化学反应时间下的致死率Fig. 4 Mortality of trichoderma under different chemical reaction tim霉在化学诱变不同反应时间孢子致死率，从图 4 中看出康氏度为 20%时反应 30 min 致死率达到了 85%以上，绿色木霉 13%时反应 30 min 致死率达到了 85%以上。因此康氏木霉 13006 佳化学诱变反应时间为 30 min。菌初筛与复筛霉 13006 和绿色木霉 13010 经多轮紫外诱变和化学诱变处理，养基上培养 7d 后透明圈直径较大的突变株，紫外诱变和化学见图 1-5，初筛突变菌株在固态发酵培养基中各个酶活，见表
【参考文献】：
期刊论文
[1]溶解性多糖单加氧酶的研究进展[J]. 孙小宝,万嘉欣,曹佳雯,斯越秀,王谦. 生物工程学报. 2018(02)
[2]固态生物发酵研究进展与未来发展趋势[J]. 张铁鹰. 饲料与畜牧. 2017(17)
[3]微生物降解玉米秸秆的研究进展[J]. 张斯童,兰雪,李哲,陈光. 吉林农业大学学报. 2016(05)
[4]绿色木霉与黑曲霉混合发酵产纤维素酶的研究[J]. 姜伯玲,王曙阳,李文建,董妙音,陈积红,刘敬,胡伟. 中国酿造. 2015(07)
[5]中国饲料工业发展若干重大问题探讨[J]. 蔡辉益. 饲料工业. 2012(10)
[6]里氏木霉与黑曲霉混合发酵产纤维素酶及其水解特性[J]. 宋娜娜,宋向阳,欧阳嘉,勇强. 生物加工过程. 2010(05)
[7]固态发酵麸皮和玉米芯生产拟康氏木霉孢子的研究[J]. 孙斐,陈靠山,张鹏英. 中国农学通报. 2010(06)
[8]微生物降解纤维素的研究概况[J]. 文少白,李勤奋,侯宪文,李光义,邓晓. 中国农学通报. 2010(01)
[9]纤维素酶在反刍动物营养中的研究进展[J]. 邱定杰,刘庆华. 福建畜牧兽医. 2008(S1)
[10]玉米秸杆发酵生产蛋白饲料的研究[J]. 李海红,同帜,仝攀瑞. 西北大学学报(自然科学版). 2003(06)
博士论文
[1]复合酶处理玉米秸秆对肉羊生产性能及破解纤维结构机制的研究[D]. 王红梅.中国农业科学院 2017
[2]玉米深加工企业成长动力的作用机理研究[D]. 李锐.吉林农业大学 2013
[3]木霉菌株产酶培养及其特定底物酶解过程研究[D]. 冯月.北京林业大学 2012
[4]康氏木霉AS3.2774纤维素酶系的诱导、阻遏、纯化及鉴定研究[D]. 林元山.广西大学 2011
[5]饲用酶制剂生物学价值评价技术研究[D]. 王宁娟.中国农业科学院 2009
[6]固态发酵植酸酶、溶菌酶对肉仔鸡及仔猪的应用研究[D]. 朱忠珂.西北农林科技大学 2008
硕士论文
[1]利用FTIR技术评定玉米秸秆营养价值的研究[D]. 丁雪.东北农业大学 2016
[2]木聚糖酶产生菌的筛选、发酵条件优化及其酶学性质研究[D]. 冯波.湖南农业大学 2016
[3]提高木霉属纤维素酶系中β-葡萄糖苷酶活性的研究[D]. 李敏霞.齐鲁工业大学 2014
[4]纤维素酶和半纤维素酶高产菌株的筛选[D]. 董桓.河北大学 2014
[5]一株产纤维素酶菌株的筛选、鉴定及发酵条件优化[D]. 杨丽娜.西北农林科技大学 2013
[6]一株产纤维素酶真菌的筛选鉴定、酶学性质和发酵产酶条件的研究[D]. 潘乐毅.湖南农业大学 2012
[7]里氏木霉Rut-C30产纤维素酶条件优化及酶解生物质的基础研究[D]. 李勇昊.吉林大学 2012
[8]稻草纤维降解菌的选育及其应用[D]. 初世宇.湖南农业大学 2011
[9]秸秆纤维素高效降解菌株的筛选及对秸秆降解效果初步研究[D]. 殷中伟.中国农业科学院 2010
[10]产几丁质酶木霉的诱变选育及对玉米纹枯病的生物防治[D]. 赵丹萍.四川农业大学 2010
本文编号：2930468
【文章来源】：内蒙古农业大学内蒙古自治区
【文章页数】：75 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
木霉菌产透明圈情况
产纤维分解酶菌株初筛和复筛：在最佳致死率条件下，经多轮紫外突变菌株长得快，菌丝短、产孢子晚、透明圈大的菌落用 0.9%的后涂到传代培养基上，培养 4-6 天长出单菌落后收集保藏并稀释成体发酵培养基上进行发酵测定其纤维素酶活、木聚糖酶活和滤纸酶小确定高产纤维分解菌株。变菌紫外、化学交叉复合诱变菌紫外、化学交叉复合诱变步骤同上述一致，挑选出最优突变菌与分析子适宜萌发时间
图 4 木霉不同化学反应时间下的致死率Fig. 4 Mortality of trichoderma under different chemical reaction tim霉在化学诱变不同反应时间孢子致死率，从图 4 中看出康氏度为 20%时反应 30 min 致死率达到了 85%以上，绿色木霉 13%时反应 30 min 致死率达到了 85%以上。因此康氏木霉 13006 佳化学诱变反应时间为 30 min。菌初筛与复筛霉 13006 和绿色木霉 13010 经多轮紫外诱变和化学诱变处理，养基上培养 7d 后透明圈直径较大的突变株，紫外诱变和化学见图 1-5，初筛突变菌株在固态发酵培养基中各个酶活，见表
【参考文献】：
期刊论文
[1]溶解性多糖单加氧酶的研究进展[J]. 孙小宝,万嘉欣,曹佳雯,斯越秀,王谦. 生物工程学报. 2018(02)
[2]固态生物发酵研究进展与未来发展趋势[J]. 张铁鹰. 饲料与畜牧. 2017(17)
[3]微生物降解玉米秸秆的研究进展[J]. 张斯童,兰雪,李哲,陈光. 吉林农业大学学报. 2016(05)
[4]绿色木霉与黑曲霉混合发酵产纤维素酶的研究[J]. 姜伯玲,王曙阳,李文建,董妙音,陈积红,刘敬,胡伟. 中国酿造. 2015(07)
[5]中国饲料工业发展若干重大问题探讨[J]. 蔡辉益. 饲料工业. 2012(10)
[6]里氏木霉与黑曲霉混合发酵产纤维素酶及其水解特性[J]. 宋娜娜,宋向阳,欧阳嘉,勇强. 生物加工过程. 2010(05)
[7]固态发酵麸皮和玉米芯生产拟康氏木霉孢子的研究[J]. 孙斐,陈靠山,张鹏英. 中国农学通报. 2010(06)
[8]微生物降解纤维素的研究概况[J]. 文少白,李勤奋,侯宪文,李光义,邓晓. 中国农学通报. 2010(01)
[9]纤维素酶在反刍动物营养中的研究进展[J]. 邱定杰,刘庆华. 福建畜牧兽医. 2008(S1)
[10]玉米秸杆发酵生产蛋白饲料的研究[J]. 李海红,同帜,仝攀瑞. 西北大学学报(自然科学版). 2003(06)
博士论文
[1]复合酶处理玉米秸秆对肉羊生产性能及破解纤维结构机制的研究[D]. 王红梅.中国农业科学院 2017
[2]玉米深加工企业成长动力的作用机理研究[D]. 李锐.吉林农业大学 2013
[3]木霉菌株产酶培养及其特定底物酶解过程研究[D]. 冯月.北京林业大学 2012
[4]康氏木霉AS3.2774纤维素酶系的诱导、阻遏、纯化及鉴定研究[D]. 林元山.广西大学 2011
[5]饲用酶制剂生物学价值评价技术研究[D]. 王宁娟.中国农业科学院 2009
[6]固态发酵植酸酶、溶菌酶对肉仔鸡及仔猪的应用研究[D]. 朱忠珂.西北农林科技大学 2008
硕士论文
[1]利用FTIR技术评定玉米秸秆营养价值的研究[D]. 丁雪.东北农业大学 2016
[2]木聚糖酶产生菌的筛选、发酵条件优化及其酶学性质研究[D]. 冯波.湖南农业大学 2016
[3]提高木霉属纤维素酶系中β-葡萄糖苷酶活性的研究[D]. 李敏霞.齐鲁工业大学 2014
[4]纤维素酶和半纤维素酶高产菌株的筛选[D]. 董桓.河北大学 2014
[5]一株产纤维素酶菌株的筛选、鉴定及发酵条件优化[D]. 杨丽娜.西北农林科技大学 2013
[6]一株产纤维素酶真菌的筛选鉴定、酶学性质和发酵产酶条件的研究[D]. 潘乐毅.湖南农业大学 2012
[7]里氏木霉Rut-C30产纤维素酶条件优化及酶解生物质的基础研究[D]. 李勇昊.吉林大学 2012
[8]稻草纤维降解菌的选育及其应用[D]. 初世宇.湖南农业大学 2011
[9]秸秆纤维素高效降解菌株的筛选及对秸秆降解效果初步研究[D]. 殷中伟.中国农业科学院 2010
[10]产几丁质酶木霉的诱变选育及对玉米纹枯病的生物防治[D]. 赵丹萍.四川农业大学 2010
本文编号：2930468
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/dongwuyixue/2930468.html
最近更新
教材专著
