解淀粉芽孢杆菌对动物抗氧化功能的影响及其作用机制的研究

发布时间：2021-01-05 11:36

　　氧化应激是机体在遭受有害刺激时,体内活性氧产生过多,氧化程度超出氧化物的清除,导致多种形式组织损伤的过程。本研究首先利用过氧化氢（H2O2）诱导的仔猪肠上皮细胞（porcine intestinal epithelial cell-1,IPEC-1）氧化应激模型筛选出一株抗氧化功能较好的芽孢杆菌菌株——解淀粉芽孢杆菌SC06。随后通过动物试验研究了 SC06对仔猪生长、肠道抗氧化状态和自噬水平的影响,并通过研究SC06对IPEC-1的保护作用,揭示了 SC06改善机体抗氧化功能的作用机理,最后用高脂日粮诱导小鼠氧化应激和脂肪肝,以探究SC06改善小鼠氧化应激、肝脏脂肪变性和心理福利的作用,初步揭示SC06调控宿主抗氧化能力和提高动物健康水平的分子机理。本研究共包括以下5部分试验:试验一体外氧化应激模型的建立及具抗氧化功能芽孢杆菌的筛选（1）IPEC-1氧化应激模型的建立:采用不同浓度H202处理IPEC-1不同时间,IPEC-1细胞活力测定结果显示:当用300 μmol/L H2O2处理细胞12h时,细胞活力下降一半。概率单位法计算结果为,当用H202处理细胞12h时,H2O2的半数致... 

【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【部分图文】：

图１．１?ＲＯＳ的来源??Ｆｉｇｕｒｅ?１．１?Ｓｏｕｒｃｅｓ?ｏｆ?ＲＯＳ??

在过去几十年中，人们发现不同种的益生菌可通过不同的方式提高宿主抗氧??化能力。但是，关于益生菌抗氧化机理的研究较少。因此，以下内容对已知的关??于益生菌抗氧化机制的研究进行了总结（图１．２）。??１．６．１螯合金属离子能力??螯合剂，例如乙二胺四乙酸（ＥＤＴＡ）、水合红菲绕啉二磺酸钠（ＢＰＳ）、青??霉胺和去铁敏等，能够捕获金属铁离子并抑制金属离子氧化（Ｇｕｔｔｅｒｉｄｇｅ?ｅｔａｌ．??１９７９）。１９９９年Ｌｉｎ和Ｙｅｎ测定了?１９种ＬＡＢ螯合金属离子（铁离子和铜离子）??的能力（Ｌｉｎ?ａｎｄ?Ｙｅｎ，?１９９９）。结果显示嗜热链球菌８２１螯合铁离子和铜离子的??能力最强，且其他菌株也有螯合铁离子和铜离子的能力。此外，另一研究发现干??５??

２．３．１?ＩＰＥＣ－１氧化应激模型的建立??随着Ｈ２０２浓度及处理时间的增加，ＩＰＥＣ－１的存活力呈下降趋势。当用３００??ｐｍｏｌ／ＬＨ２０２处理细胞１２ｈ时，细胞活力下降一半（图２．１）。通过概率单位法??计算结果发现，当用Ｈ２０２处理细胞１２?ｈ时，Ｈ２０２的半数致死剂量为３２３．５９??｜ｉｍｏｌ／Ｌ。因此，后续试验可用３００?｜ｉｍｏｌ／Ｌ?Ｈ２〇２处理细胞１２?ｈ以诱导氧化应激。??１５０－｜??丨?一?１?ｈ??７?－＊？?３?ｈ??＾?１００－、、?６ｈ??１???＾Ｔ?＋?１２ｈ??°?Ｔ＾Ｓ＾ｔ??０＿?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ??０?２００?４００?６００?８００??Ｈ２〇２?ｆｉｎａｌ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?（ｐｍｏｌ／Ｌ）??图２．１Ｈ２０２对ＩＰＥＣ－１活性的影响（《?＝?６）??Ｆｉｇｕｒｅ?２．１?Ｃｅｌｌ?ｖｉａｂｉｌｉｔｙ?ｗｉｔｈ?Ｈ２〇２?ｔｒｅａｔｍｅｎｔ．?ＩＰＥＣ－１?ｃｅｌｌｓ?ｗｅｒｅ?ｔｒｅａｔｅｄ?ｗｉｔｈ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ??ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ?ｏｆ?Ｈ２Ｏ２?（〇，?ｌ〇〇，?２００，?３００，?４００，?５００，?６００，?７００?ｊｉｍｏｌ／Ｌ）?ｆｏｒ?１，３，?６，?１２?ｈ．?Ｃｅｌｌ?ｖｉａｂｉｌｉｔｙ??ｗａｓ?ｄｅｔｅｉｍｉｎｅｄ?ｂｙ?ＭＴＴ?ａｓｓａｙ．?Ｒｅｓｕｌｔｓ?ａｒｅ?ｇｉｖｅｎ?ａｓ?ｍｅａｎ?士?ＳＤ?（／？?＝?６）．??２．３．２?ＩＰＥＣ－１氧化应激生物指标的确定??如表２．３所示，册－７的表达与Ｈ２０２处理时间呈正相关，且Ｒ２达到０．９６４１。??此外

【参考文献】：
期刊论文
[1]苜草素对产蛋高峰期蛋鸡脂肪肝出血综合征预防作用研究[J]. 杨长进,董晓芳,佟建明,高玉鹏.  动物营养学报. 2015(07)
[2]日粮中添加枯草芽孢杆菌B10对高脂日粮诱导的小鼠脂肪代谢及抗氧化的影响（英文）[J]. Kai LEI,Ya-li LI,Yang WANG,Jing WEN,Hong-zhao WU,Dong-you YU,Wei-fen LI.  Journal of Zhejiang University-Science B（Biomedicine & Biotechnology）. 2015(06)
[3]Application of Probiotics in Pig Industry as a Substitute of Antibiotics[J]. Sha Wenfeng,Zhu Juan,Gu Yongjian,Dai Hui,Qiu Liangwei.  Animal Husbandry and Feed Science. 2015(01)
[4]Plasma metabolomic profiles and immune responses of piglets after weaning and challenge with E.coli[J]. Sugiharto Sugiharto,Mette S Hedemann,Charlotte Lauridsen.  Journal of Animal Science and Biotechnology. 2014(03)
[5]Ingestion of Lactobacillus strain reduces anxiety and improves cognitive function in the hyperammonemia rat[J]. LUO Jia,WANG Tao,LIANG Shan,HU Xu,LI Wei,JIN Feng.  Science China（Life Sciences）. 2014(03)
[6]益生菌替代抗生素控制肉种鸡坏死性肠炎的效果[J]. Venkat Shelke,Prakash Chandra Saini,黄生树.  饲料工业. 2013(21)
[7]Protective effects of two Lactobacillus plantarum strains in hyperlipidemic mice[J]. Li-Xin Wang,Kai Liu,Da-Wei Gao,Ji-Kui Hao.  World Journal of Gastroenterology. 2013(20)
[8]农场动物福利的评估[J]. 尹国安,孙国鹏.  家畜生态学报. 2013(05)
[9]农场动物福利现状及对策[J]. 顾招兵,杨飞云,林保忠,刘作华.  中国农学通报. 2011(03)
[10]甜菜碱预防蛋鸡脂肪肝出血综合征的研究[J]. 张彩英,曹华斌,胡国良,郭小权,曹洪峰,黄爱民.  中国畜牧兽医. 2010(10)

硕士论文
[1]用益生菌制剂代替断奶仔猪日粮中抗生素的实验研究[D]. 肖宏德.华中农业大学 2013



本文编号：2958588