鹅褪黑素受体Mel-1c基因的克隆和血清褪黑素含量的研究

发布时间：2021-01-05 17:14

　　褪黑素（melatonin, MLT）是主要由松果体合成分泌的一种神经内分泌激素,其分泌规律呈典型的昼夜节律以及季节性变化,褪黑素的浓度在夜间升高,白天降低；在长日照季节,褪黑素浓度较低,短日照季节浓度较高。褪黑素通过作用于下丘脑-垂体-性腺轴中的多个位点,调节光照信息和生殖系统的关系,在季节性繁殖动物对于光照敏感性的调控上,褪黑素就表现为刺激短日照繁殖动物的繁殖活动,抑制长日照繁殖动物的繁殖活动,褪黑素还参与动物的生殖、内分泌、免疫和神经系统的生物调节。褪黑素通过与受体结合来发挥其生理功能,鹅体内存在三种褪黑素受体Mel-la、Mel-lb、Mel-lc,其中Mel-lc受体只存在于禽类、两栖类和鱼类中,未在哺乳动物中发现。本试验旨在克隆出鹅的褪黑素受体Mel-lc基因的全长编码序列,寻找鹅Mel-1c基因编码区SNP位点的分布情况。并测定鹅血清中褪黑素的含量,分析其与品种和季节间的关系,以期为通过调控褪黑素来提高动物繁殖性能提供理论依据。本研究选用鹅为研究对象,提取脑组织的总RNA,采用SMARTerRACE技术,扩增得到1158bp的鹅Mel-lc的DNA序列,通过NCBI中已经... 

【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：45 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
    1 褪黑素简介
    2 褪黑素的生物合成、代谢与分布
        2.1 褪黑素的生物合成
        2.2 褪黑素的代谢
        2.3 褪黑激素分布和调节
        2.4 褪黑素的节律变化和调节机制
    3 褪黑素的生理作用
        3.1 褪黑素对繁殖系统的作用
    4 褪黑素受体
        4.1 命名与分类
        4.2 结构和生物学特性
        4.3 体内分布
    5 SMARTer RACE技术原理
        5.1 SMARTer RACE技术简介
        5.2 RACE引物的设计
        5.3 5'RACE反应试验原理
        5.4 SMARTer RACE技术的优点和缺点
        5.5 RACE技术中的常见问题及对策
    6 SNP分子标记
    7 试验研究内容与意义
第二章 试验内容
    试验一 鹅褪黑素受体Mel-1c基因的克隆与多态性分析
        1 引言
        2 试验材料
            2.1 试验动物
            2.2 主要试剂
            2.3 主要仪器
        3 试验方法
            3.1 SMARTer RACE扩增Mel-1c基因
            3.2 序列分析及进化树构建
            3.3 Mel-1c基因多态性分析
        4 结果分析
            4.1 保守区域扩增PCR产物扩增结果
            4.2 总RNA的提取
            4.3 Mel-1c基因序列的克隆、测序
            4.4 序列分析
            4.5 Mel-1c基因序列同源性比较和进化树分析
            4.6 DNA提取及PCR扩增
            4.7 PCR产物测序分析SNP位点
        5 讨论
    试验二 鹅血清褪黑素含量的研究
        1 引言
        2 试验材料
            2.1 试验动物
            2.2 样本的采集与保存
            2.3 主要试剂
            2.4 主要仪器
        3 试验方法
            3.1 样品的稀释
            3.2 样品、标准品和质控品中褪黑素的提取
            3.3 ELISA试验测定样品、标准品和质控品的褪黑素含量
            3.4 褪黑激素含量的计算方法
            3.5 统计分析
        4 结果分析
        5 讨论
第三章 结论
    1 主要研究成果
    2 值得进一步研究的相关问题
参考文献
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]皖西白鹅产蛋特性研究[J]. 岳理,姜润深,耿照玉,杨秀娟,袁绍友,刘春喜.  河北农业科学. 2008(05)
[2]褪黑激素-牛血清蛋白主动免疫对皖西白鹅性腺表征的影响[J]. 凌明亮,黄仁术.  中国兽医学报. 2007(01)
[3]褪黑激素及其生理功能研究进展[J]. 焦传珍.  生物学教学. 2005(02)
[4]褪黑激素对动物生殖的作用及其调控[J]. 茆达干,杨利国,吴结革.  草食家畜. 2001(03)
[5]人胚胎肾上腺皮质褪黑素受体亚型蛋白的分布[J]. 陆祖谦,刘志民,何金,刘会敏,赵瑛,彭树勋.  第二军医大学学报. 2001(01)
[6]人胚胎中枢神经系统褪黑素受体的鉴定及生物学特性[J]. 赵瑛,邵福源,何淑芬,彭树勋.  第二军医大学学报. 2001(01)
[7]人胚胎甲状腺褪黑素受体mRNA的检测[J]. 孙中安,刘志民,黄超.  第二军医大学学报. 2000(11)
[8]松果体研究进展[J]. 叶百宽,郭霞珍.  解剖科学进展. 2000(01)
[9]SNP-为人类基因组描绘新的蓝图[J]. 刘万清,贺林.  遗传. 1998(06)
[10]鸟类及鼠类的胸腺、腔上囊及脾脏褪黑素受体的鉴定及意义[J]. 赵瑛,刘志民,彭树勋.  上海免疫学杂志. 1998(02)



本文编号：2959001