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利用重组腺病毒过表达PPARγ对牛肌肉细胞脂质沉积的影响

发布时间:2021-01-07 02:16
  动物肌内脂肪沉积是一个复杂的生物学过程,涉及肌肉细胞分化、脂肪细胞分化及甘油三酯代谢等多个方面。过氧化物酶体增殖物活化受体γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ, PPARγ)基因在动物的脂肪细胞分化过程中具有核心调控作用,但是PPARγ基因的表达水平与肌内脂肪含量之间的关系尚不明确。本研究旨在包装牛(Bos taurus) PPARγ基因腺病毒(Adenovirus),并分析过表达PPARγ对肌肉细胞脂质沉积的影响。将PPARγ亚克隆至腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV后,构建载体pAdTrackCMV-PPARγ。将线性化的pAdTrack-CMV-PPARγ载体和腺病毒骨架载体pAdEasy-1共转化至重组细菌大肠杆菌(Escherichia coli) BJ5183细胞中,在细菌中同源重组后,成功构建腺病毒骨架载体pAdEasy-1-PPARγ。将线性化的pAdEasy-1-PPARγ转入人(Homo sapiens) 293A细胞中包装并扩增PPARγ腺病毒。用PPARγ腺病毒感染牛肌肉细胞后,用实时荧光定量PCR (q... 

【文章来源】:农业生物技术学报. 2020,28(03)北大核心

【文章页数】:8 页

【文章目录】:
1 材料与方法
    1.1 实验材料
    1.2 主要试剂药品
    1.3 主要仪器设备
    1.4 重组腺病毒载体的构建
    1.5 重组腺病毒的包装
    1.6 腺病毒滴度的测定
    1.7 腺病毒感染牛肌肉细胞
    1.8 使用qRT-PCR检测过表达PPARγ对肌肉细胞的影响
2 结果与分析
    2.1 构建了PPARγ重组腺病毒载体
    2.2 包装并扩增了PPARγ腺病毒
    2.3 过表达PPARγ对牛肌肉细胞的影响
3 讨论
4 结论



本文编号:2961699

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