有机磷致鸡迟发性神经病相关差异表达蛋白筛选及其诱发机制研究

发布时间：2021-01-07 06:31

　　研究目的与背景：有机磷化合物致迟发性神经病（organophosphorus easter-induced delayedneuropathy，OPIDN）是指某些有机磷化合物经一次性大剂量接触或者反复多次接触，经过7-14天（或更长）的潜伏期出现的，以肢体感觉异常、运动障碍、共济失调、麻痹甚至瘫痪为主要临床特征的一类后果严重的神经退行性疾病。磷酸三邻甲苯酯（tri-o-cresyl phosphate，TOCP）被广泛用作增塑剂，软化剂，阻燃剂及机油添加剂，因为其烷基位于苯环的邻位上，是磷酸三甲苯酯三个异构体中唯一可以诱发OPIDN的化合物。目前，因为OPIDN发生确切机制不清楚而尚无有效地治疗方法，因此OPIDN的发生机制得到了广泛的关注。有机磷化合物染毒早期后除了诱发迟发神经病之外，还会表现出急性胆碱能危象和中间综合征，和以上三种病变发生机制相关的蛋白在TOCP染毒早期均会出现异常表达，很难区分表达改变的蛋白中哪些与OPIDN发生有关。国内外研究已证明在TOCP染毒前皮下注射苯甲基磺酰氟（Phenylmethanesulfonyl fluoride，PMSF）可以有效的预防OPI... 

【文章来源】：大连医科大学辽宁省

【文章页数】：98 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第一部分：构建 TOCP 诱导鸡迟发性神经病模型和 PMSF 前干预模型
    前言
    材料与方法
        1 材料
            1.1 动物
            1.2 仪器
            1.3 试剂
        2 方法
            2.1 分组及 TOCP 染毒
            2.2 OPIDN 症状观察及评分
            2.3 TOCP 染毒鸡神经组织超微结构观察
        3 统计学方法
    结果
        1 TOCP 染毒鸡 OPIDN 症状
        2 TOCP 染毒对鸡体重的影响
        3 TOCP 染毒鸡神经组织超微结构的改变
    讨论
    参考文献
    结论
第二部分：筛选 TOCP 暴露鸡中枢神经组织 OPIDN 相关蛋白
    前言
    材料与方法
        1 材料
            1.1 动物
            1.2 仪器
            1.3 试剂
        2 方法
            2.1 分组及 TOCP 染毒
            2.2 蛋白质双向电泳与图像分析
            2.3 LC–MS/MS 质谱分析及数据分析
            2.4 与 OPIDN 发生机制相关的蛋白的确定
            2.5 生物信息学分析
            2.6 Real-time RT-PCR
        3 统计学方法
    结果
        1 双向电泳筛选 TOCP 染毒鸡神经组织 OPIDN 相关差异表达蛋白质点
        2 质谱鉴定 TOCP 染毒鸡神经组织 OPIDN 相关差异表达蛋白质点
        3 Gene Ontology 和 pathway 分析结果
        4 鸡神经组织 OPIDN 相关蛋白的基因表达
    讨论
    参考文献
    结论
第三部分：TOCP 对鸡神经组织谷氨酸/谷氨酰胺循环及其关键酶表达的影响
    前言
    材料与方法
        1 材料
            1.1 动物
            1.2 仪器
            1.3 试剂
        2 方法
            2.1 分组及 TOCP 染毒
            2.2 ELISA 分析
            2.3 Real-time RT-PCR
            2.4 谷氨酰胺合成酶活性测定
            2.5 谷氨酸与谷氨酰胺浓度测定
            2.6 细胞内钙离子浓度测定
        3 统计学方法
    结果
        1 TOCP 暴露对鸡神经组织 GS 和 GLS 蛋白表达的影响
        2 TOCP 暴露对鸡神经组织 GS 和 GLS 基因表达的影响
        3 TOCP 暴露对鸡神经组织谷氨酰胺合成酶活性影响
        4 TOCP 暴露对鸡神经组织谷氨酸和谷氨酰胺浓度影响
        5 TOCP 暴露对鸡神经组织细胞内钙离子浓度影响
    讨论
    参考文献
    结论
综述
    参考文献
附录
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]三邻甲苯磷酸酯暴露鸡脊髓神经中Stathmin的差异表达[J]. 韩雪榕,朴丰源,张彦宁,王祥虎.  中华劳动卫生职业病杂志. 2011 (12)
[2]三磷甲苯磷酸酯暴露对鸡脊髓神经中髓鞘碱性蛋白表达的影响[J]. 韩雪榕,朴丰源.  大连医科大学学报. 2011(04)
[3]磷酸三邻甲苯酯对母鸡中枢神经组织线粒体中ATP含量及ATPase的影响[J]. 辛星,陈晶晶,钟志霞,曾涛,张翠丽,谢克勤,赵秀兰.  毒理学杂志. 2010(06)
[4]磷酸三邻甲苯酯对母鸡神经组织线粒体超微结构及功能的影响[J]. 辛星,钟志霞,陈晶晶,李阳,闫捷,付强强,谢克勤,赵秀兰.  环境与健康杂志. 2010(08)
[5]Stathmin蛋白的研究进展[J]. 李君山,王庆才.  泰山医学院学报. 2010(04)
[6]磷酸三邻甲苯酯对母鸡神经组织线粒体膜通透性的影响[J]. 辛星,裴晶晶,曾涛,谢克勤,朱振平,窦丹丹,赵盛,赵秀兰.  环境与健康杂志. 2009(08)
[7]鸡有机磷中毒迟发性神经病的模型建立及病理研究[J]. 傅真真,张振玲,刘毅,谢琳,王蕊,薄存香.  中国工业医学杂志. 2009(02)
[8]Stathmin调控及与疾病的关系[J]. 时多,蒋恒义,缪明永,焦炳华.  医学分子生物学杂志. 2007(04)
[9]乐果诱导的迟发性神经病大鼠模型的实验研究[J]. 王芳,岳凤霞,杨守芳.  中国实用神经疾病杂志. 2007(02)
[10]α-突触核蛋白在帕金森病发病机制中的作用[J]. 陈涛,唐北沙,廖小平.  中华神经科杂志. 2006(06)



本文编号：2962092