大熊猫源普通变形杆菌分离鉴定及致病性分析
发布时间:2021-01-09 10:20
为探明福州某患病大熊猫的病因,研究病原菌的生物学特性、药物敏感性及致病性,从患病大熊猫的粪便中分离、纯化病原菌,经培养特性、形态学观察、生化试验及16S rRNA PCR扩增、测序及进化树分析等系统鉴定,并对鉴定菌进行药敏试验、动物致病性试验、组织病理学观察及毒力因子检测。结果分离到1株具有迁徙生长特点的革兰阴性杆菌,生化特性与普通变形杆菌(Proteus vulgaris)相一致,16S rRNA基因序列与普通变形杆菌的相似性为99.9%,进化树分析显示,与普通变形杆菌处于同一分支,确定分离菌为普通变形杆菌,命名为GP19株。该分离菌至少携带ureC、mrpA、fli L、flhA、flhB、flhD和pmbA等7种毒力基因,小鼠腹腔接种后12 h内死亡,半数致死量(LD50)为9.73×106CFU/m L。病理切片观察可见肝、脾、肺、肾、脑等实质器官淤血、出血,十二指肠肠绒毛大量坏死、脱落。药敏试验表明,该菌对环丙沙星、头孢克肟和氨曲南等23种药物敏感,对林可霉素、强力霉素和头孢唑啉等13种药物耐药。以上研究表明,患病大熊猫粪便中存在携带多种毒力因子的普通变形杆菌,并表现出较强的...
【文章来源】:中国兽医科学. 2020,50(11)北大核心
【文章页数】:10 页
【部分图文】:
临床病料及细菌的分离培养
图2 分离菌形态学观察(革兰染色,箭头指的是菌体,1 000×)
利用细菌16S r RNA引物对分离菌进行PCR扩增,结果(图3)显示,大约在1500 bp处可见单一、明亮的特异性条带。将PCR扩增产物测序及组装,与NCBI中已公布的序列进行BLAST比对,结果显示,分离菌与普通变形杆菌的同源性为99.9%。选取变形杆菌属相关菌株构建系统进化树,结果分离菌与普通变形杆菌聚集在同一个小分支上(图4),进一步确证分离菌GP19株为普通变形杆菌。2.4 致病性试验及组织病变观察
【参考文献】:
期刊论文
[1]病死猪大肠埃希菌与变形杆菌的分离鉴定和药敏试验[J]. 路振香,孙坤,夏礼贤,郭伟娜,刘畅. 动物医学进展. 2018(02)
[2]北京动物园3只亚成体大熊猫粪便菌群比较分析[J]. 刘燕,王曦,刘学锋,李林海,郑常明,夏茂华,张成林. 野生动物学报. 2018(01)
[3]变形杆菌的分离鉴定及其毒力与耐药相关基因检测[J]. 路振香,孙坤,郭伟娜,刘畅,朱元招,程金龙. 畜牧与兽医. 2017(12)
[4]基于高通量测序技术研究成年大熊猫肠道菌群[J]. 何永果,晋蕾,李果,李才武,李蓓,李伟,张亚辉,胡正泉,黄炎,张和民,邹立扣. 应用与环境生物学报. 2017(05)
[5]斑点叉尾鮰源普通变形杆菌的分离、鉴定及药敏特性[J]. 杨移斌,余琳雪,杨秋红,刘永涛,胥宁,杨先乐,艾晓辉. 微生物学通报. 2017(10)
[6]暹罗鳄鱼致病性普通变形杆菌的分离与鉴定[J]. 陈福艳,黄国城,黄彩林,欧阳贤华,罗洪林,杨学明,黄婷,黄钧,梁万文. 江西农业. 2016(11)
[7]扬子鳄源变形杆菌生物学特性研究[J]. 任怡飞,颜家坤,操江民,费荣梅. 畜牧与兽医. 2016(05)
[8]大熊猫疾控风雨十年路[J]. 何宏轩,罗颖. 中国林业. 2015 (15)
[9]猪链球菌2型昆明鼠动物病理模型的建立[J]. 刘国平,梁雄燕,李江华,杨小林,程太平,金升藻,唐登华,吴斌,陈焕春. 中国兽医学报. 2008(07)
[10]大熊猫肠道疾病致病菌[J]. 孙飞龙,刘敬贤,席丹,王万云,高更更,冯宁,杨水云. 经济动物学报. 2002(02)
本文编号:2966461
【文章来源】:中国兽医科学. 2020,50(11)北大核心
【文章页数】:10 页
【部分图文】:
临床病料及细菌的分离培养
图2 分离菌形态学观察(革兰染色,箭头指的是菌体,1 000×)
利用细菌16S r RNA引物对分离菌进行PCR扩增,结果(图3)显示,大约在1500 bp处可见单一、明亮的特异性条带。将PCR扩增产物测序及组装,与NCBI中已公布的序列进行BLAST比对,结果显示,分离菌与普通变形杆菌的同源性为99.9%。选取变形杆菌属相关菌株构建系统进化树,结果分离菌与普通变形杆菌聚集在同一个小分支上(图4),进一步确证分离菌GP19株为普通变形杆菌。2.4 致病性试验及组织病变观察
【参考文献】:
期刊论文
[1]病死猪大肠埃希菌与变形杆菌的分离鉴定和药敏试验[J]. 路振香,孙坤,夏礼贤,郭伟娜,刘畅. 动物医学进展. 2018(02)
[2]北京动物园3只亚成体大熊猫粪便菌群比较分析[J]. 刘燕,王曦,刘学锋,李林海,郑常明,夏茂华,张成林. 野生动物学报. 2018(01)
[3]变形杆菌的分离鉴定及其毒力与耐药相关基因检测[J]. 路振香,孙坤,郭伟娜,刘畅,朱元招,程金龙. 畜牧与兽医. 2017(12)
[4]基于高通量测序技术研究成年大熊猫肠道菌群[J]. 何永果,晋蕾,李果,李才武,李蓓,李伟,张亚辉,胡正泉,黄炎,张和民,邹立扣. 应用与环境生物学报. 2017(05)
[5]斑点叉尾鮰源普通变形杆菌的分离、鉴定及药敏特性[J]. 杨移斌,余琳雪,杨秋红,刘永涛,胥宁,杨先乐,艾晓辉. 微生物学通报. 2017(10)
[6]暹罗鳄鱼致病性普通变形杆菌的分离与鉴定[J]. 陈福艳,黄国城,黄彩林,欧阳贤华,罗洪林,杨学明,黄婷,黄钧,梁万文. 江西农业. 2016(11)
[7]扬子鳄源变形杆菌生物学特性研究[J]. 任怡飞,颜家坤,操江民,费荣梅. 畜牧与兽医. 2016(05)
[8]大熊猫疾控风雨十年路[J]. 何宏轩,罗颖. 中国林业. 2015 (15)
[9]猪链球菌2型昆明鼠动物病理模型的建立[J]. 刘国平,梁雄燕,李江华,杨小林,程太平,金升藻,唐登华,吴斌,陈焕春. 中国兽医学报. 2008(07)
[10]大熊猫肠道疾病致病菌[J]. 孙飞龙,刘敬贤,席丹,王万云,高更更,冯宁,杨水云. 经济动物学报. 2002(02)
本文编号:2966461
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