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脂磷壁酸在植物乳杆菌免疫调节过程中的作用研究

发布时间:2021-01-09 15:06
  本试验主要研究了脂磷壁酸在植物乳杆菌与HT-29细胞互作及免疫应答过程中的作用。采用冷酚法提取植物乳杆菌脂磷壁酸,用红外光谱仪及核磁共振仪鉴定该提取物结构。红外谱图表征了一种有磷酸甘油结构和有酰胺、糖残基等基团的物质,符合脂磷壁酸的主要官能团结构,核磁共振谱图发现了甘油和糖基、D-Ala、-NHCOCH3(s)、-CH(CO)CH3(d)等脂磷壁酸的主要结构,可断定此物质为脂磷壁酸。研究脂磷壁酸是否在植物乳杆菌粘附过程中发挥作用。试验分三个处理:Ⅰ组用荧光标记的细菌(1×109CFU/mL)处理HT-29细胞2h;Ⅱ组用50μg/mL脂磷壁酸处理HT-29细胞2h,再用荧光标记的细菌(1×109CFU/mL)处理HT-29细胞2h;Ⅲ组用100μg/mL脂磷壁酸处理理HT-29细胞2h,再用荧光标记的细菌(1×109CFU/mL)处理HT-29细胞2h。在荧光倒置显微镜下观察发现,Ⅰ组细菌粘附数为最多,Ⅱ组次之,Ⅲ组最少。可说明脂磷壁酸在植物乳杆菌粘附过程中发挥作用。与对照组相比,植物乳杆菌短时间处理HT-29细胞,对其IL-10、IL-12、TNF-a及IL-6的蛋白表达量均无显著影... 

【文章来源】:山东农业大学山东省

【文章页数】:59 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
縮略语
中文摘要
Abstract
1 前言
    1.1 植物乳杆菌研究进展
        1.1.1 植物乳杆菌益生作用研究
        1.1.2 植物乳杆菌免疫调节作用研究进展
        1.1.3 植物乳杆菌的应用
        1.1.4 乳酸杆菌粘附作用研究进展
    1.2 脂磷壁酸概述
        1.2.1 LTA的粘附定植作用
        1.2.2 LTA的免疫调节作用及其作用成分
        1.2.3 LTA的抗体识别作用
        1.2.4 LTA结构的多样性
    1.3 LTA提取纯化
2 材料与方法
    2.1 植物乳杆菌脂磷壁酸的提取与鉴定
        2.1.1 试验材料
        2.1.2 研究方法
    2.2 脂磷壁酸在植物乳杆菌粘附、定植过程中的作用解析
        2.2.1 试验材料
        2.2.2 试验设计
        2.2.3 试验方法
    2.3 植物乳杆菌及脂磷壁酸对HT-29细胞免疫刺激的研究
        2.3.1 试验材料
        2.3.2 试验设计
        2.3.3 试验方法
3 结果与分析
    3.1 植物乳杆菌脂磷壁酸鉴定
        3.1.1 植物乳杆菌脂磷壁酸的红外图谱鉴定
        3.1.2 植物乳杆菌脂磷壁酸的核磁共振图谱鉴定
    3.2 脂磷壁酸对HT-29细胞粘附作用
    3.3 植物乳杆菌及pLTA对HT-29细胞免疫水平的影响
        3.3.1 植物乳杆菌及pLTA短时间作用HT-29细胞对免疫因子蛋白水平的影响
        3.3.2 植物乳杆菌及pLTA长时间作用HT-29细胞对免疫因子蛋白水平的影响
        3.3.3 植物乳杆菌及pLTA对HT-29细胞的免疫相关因子的RNA表达的影响
4 讨论
    4.1 脂磷壁酸结构图谱分析
    4.2 脂磷壁酸在植物乳杆菌与HT-29细胞粘附过程中的作用
    4.3 植物乳杆菌对HT-29细胞免疫功能的影响
    4.4 植物乳杆菌脂磷壁酸(pLTA)对HT-29细胞免疫功能的影响
5 结论
    5.1 总体结论
    5.2 创新点
    5.3 不足之处及进一步解决的问题
6 参考文献
7 附录
8 致谢
9 攻读硕士学位期间的研究成果


【参考文献】:
期刊论文
[1]磷壁酸在细菌黏附、定植及免疫调节过程中的作用[J]. 王进波,倪江,高权新,齐莉莉.  动物营养学报. 2013(09)
[2]乳酸杆菌与肠道黏附相关表面因子及其机制的研究进展[J]. 汪海峰,章文明,汪以真,刘建新.  动物营养学报. 2011(02)
[3]A群链球菌脂磷壁酸的提取纯化及其抑瘤活性[J]. 白莹,孙民,邱芳萍,王志兵.  浙江大学学报(农业与生命科学版). 2010(04)
[4]脂磷壁酸的提取纯化及抑菌活性研究[J]. 白莹,孙民,邱芳萍.  长春工业大学学报(自然科学版). 2009(04)
[5]Lactobacillus plantarum inhibits epithelial barrier dysfunction and interleukin-8 secretion induced by tumor necrosis factor-a[J]. Jae Sung Ko,Hye Ran Yang,Ju Young Chang,Jeong Kee Seo.  World Journal of Gastroenterology. 2007(13)
[6]植物乳杆菌黏附大鼠小肠黏液及机制的研究[J]. 孙进,乐国伟,施用晖,苏广伟.  微生物学杂志. 2006(02)
[7]植物乳杆菌的生理功能与应用[J]. 肖仔君,钟瑞敏,陈惠音,杨汝德.  中国食品添加剂. 2005(02)
[8]Probiotics inhibit TNF-α-induced interleukin-8 secretion of HT29 cells[J]. Ai-Ping Bai Qin Ouyang Chun-Hui Wang,Department of Gastroenterology,Huaxi Hospital,Sichuan University,Chengdu 610041,Sichuan Province,ChinaWen Zhang,Department of Hepatology,First Hospital of Xiangfan City,Xiangfan 441000,Hubei Province,ChinaSheng-Fu Li,Institute of Transplantation and Immunology,Huaxi Hospital,Sichuan University,Chengdu 610041,Sichuan Province,China.  World Journal of Gastroenterology. 2004(03)
[9]生物合成γ-氨基丁酸的乳酸菌的筛选[J]. 许建军,江波,许时婴.  食品科技. 2002(10)
[10]非离子型去垢剂TritonX-114提取两歧双歧杆菌的脂磷壁酸[J]. 乐军,胡宏.  中国微生态学杂志. 1997(04)

博士论文
[1]内蒙古牧区传统乳制品中乳杆菌生物学特性及其益生作用的研究[D]. 周雨霞.内蒙古农业大学 2006



本文编号:2966886

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