HMGB1/TLR2对奶牛卵巢颗粒细胞排卵相关基因的影响及姜黄素对其干预作用

发布时间：2021-01-10 11:21

　　卵巢疾病是导致奶牛繁殖障碍的重要原因之一。深入探讨奶牛卵巢生理功能和发病学机制,可为奶牛卵巢疾病更加合理治疗方案的制定和靶向治疗药物的筛选提供科学依据。大量研究证明,哺乳动物排卵过程类似于炎症,先天免疫在其中发挥着重要作用。TLRs是动物先天免疫系统中一类具有重要功能的PRRs,已被证明存在于多种哺乳动物卵巢组织,在卵巢生理活动和卵巢相关疾病发生发展过程中发挥重要作用。随着人们对TLRs在卵巢先天免疫研究方面的深入,TLR2/4的内源性配体HMGB1在卵泡液中的作用引起了研究者的兴趣。但是到目前为止,HMGB1和TLRs在卵巢活动及相关卵巢疾病中的功能还不甚明确,其在奶牛卵巢颗粒细胞中的作用研究报道较少。本论文以原代奶牛卵巢颗粒细胞为对象,采用qRT-PCR、免疫印迹、免疫组化、免疫共沉淀、间接免疫荧光、ELISA和基因沉默等技术,研究了HMGB1和TLR2在不同发育阶段卵泡来源的颗粒细胞中的表达规律及调控其表达的因素,分析了HMGB1/TLR2对排卵相关基因的影响及姜黄素通过HMGB1/TLR2/NF-κB对排卵相关基因的干预作用。结果表明:来源于不同发育阶段的健康卵泡颗粒细胞均可高... 

【文章来源】：中国农业科学院北京市

【文章页数】：103 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

姜黄素对卵巢颗粒细胞活性的影响

为了观察不同浓度姜黄素对颗粒细胞凋亡和坏死的影响,采用FITC-Annexin V and PIApoptosis试剂盒进行荧光显微镜检测。结果显示,20μg/m L姜黄素孵育24 hr显著增加了颗粒细胞的凋亡和坏死数量,40μg/m L姜黄素孵育24 hr致使细胞基本完全坏死脱落。1.25μg/m L、2.5μg/m L、5μg/m L和10μg/m L姜黄素对细胞凋亡和坏死没有显著影响。图5-2 FITC-Annexin V and PI凋亡试剂盒检测姜黄素对颗粒细胞凋亡及坏死的影响(10×10)

图5-2 FITC-Annexin V and PI凋亡试剂盒检测姜黄素对颗粒细胞凋亡及坏死的影响(10×10)5.3.3 姜黄素对HMGB1 诱导的TLR2 及排卵相关基因转录水平的影响

【参考文献】：
期刊论文
[1]Prediction of the anti-inflammatory mechanisms of curcumin by module-based protein interaction network analysis[J]. Yanxiong Gan,Shichao Zheng,Jan P.A.Baak,Silei Zhao,Yongfeng Zheng,Nini Luo,Wan Liao,Chaomei Fu.  Acta Pharmaceutica Sinica B. 2015(06)

博士论文
[1]白介素-6对奶牛卵巢颗粒细胞排卵相关基因表达的调节机制[D]. 杨盟.中国农业科学院 2017



本文编号：2968611