新疆部分地区牛副结核病流行病学调查及抗体ELISA检测方法研究
发布时间：2021-01-11 13:37
牛副结核病是由副结核分支杆菌（Mycobacterium avium subsp.Paratuberculosis,MAP）引起的慢性增生性肠炎,主要表现为肠道出现浆液性分泌物,伴随长期腹泻以及体况不良,有时危及病畜生命,使畜牧业遭受经济损失。国外是强制通报的传染病,我国定为二类动物疫病。新疆地区牛场时有该病发生,但存在临床与其他疾病易混淆,难于鉴别诊断的问题。本项研究对新疆不同地区牛场血清进行抗体检测,对临床疑似病例进行分子生物学诊断,探索建立该病的血清学ELISA检测方法,为该病的诊断和防控提供技术支持。目的:调查新疆不同地区牛场牛副结核病血清抗体阳性情况,利用分子生物学方法诊断牛副结核病疑似病例,掌握临床该病流行和发病情况;筛选副结核分枝杆菌重要抗原蛋白,建立该病抗体检测的间接ELISA方法,为建立适合本地区的牛副结核病的诊断方法提供参考意见。方法:1.采集新疆石河子、沙湾、奎屯等13个地区的牛场血液样本681份进行抗体检测;2.对临床64份疑似发病牛粪便样本进行PCR法检测;3.分析牛副结核分枝杆菌重要抗原蛋白表位构建串联重组蛋白MAP3290-1595表达载体,转化大肠杆菌经...
【文章来源】： 张哲 石河子大学
【文章页数】：61 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
部分牛血清Figure2-1Somebovineseru阴对阳对
疑似牛副结Figure2-2Pictureofclinicalsympto
21图2-3粪便样本抗酸染色镜检结果（100*10）Figure2-3Microscopicexaminationresultsofacid-faststainingofstoolsamples（100*10）2.2嵌套法PCR检测结果对新疆不同地区64份样本进行嵌套法PCR检测。检测牛副结核病使用本章1.1.3中基于IS900特异性片段的MAP引物进行，片段大小452bp；结果见图2-4。图2-4部分牛副结核病PCR诊断结果Figure2-4PCRdiagnosisresultsofsomebovineparatuberculosis根据对这64份临床粪便样本进行检测，结果如表2-10所示；牛副结核病核酸阳性的有52个样本，总阳性率为81.25%，沙湾采集了16份样本，阳性数14份，阳性率87.50%；布尔津地区采集了11份样本，阳性数9份，阳性率81.82%；石河子地区采集了4份样本，阳性数3份，阳性率75.00%；昌吉地区采集了8份样本，阳性数5份，阳性率62.50%；奎屯地区采集了25份样本，阳性数21份，阳性率84.00%；12345678910M11121314151617452bp-100x10700bp400bp100bp
【参考文献】：
期刊论文
[1]新疆南疆某牛场牛副结核流行病学调查研究[J]. 穆拉提·阿不都米吉提,石长青,吴建勇,朱广艺,王廷龙,胡建军. 塔里木大学学报. 2019(02)
[2]副结核分支杆菌MAP0862蛋白的表达及临床应用[J]. 解晓莉,孙阳阳,程凯慧,楚会萌,张亮,王基隆,杨美,杨宏军. 山东农业科学. 2019(02)
[3]宁夏地区奶牛副结核病的血清学调查[J]. 高海慧,康晓冬. 中国畜牧兽医文摘. 2017(10)
[4]副结核分枝杆菌MAP0862蛋白的表达及在间接ELISA中的初步应用[J]. 张振,冯宇,张阁,朱良全,蒋卉,丁家波,赵鹏,常维山. 畜牧兽医学报. 2016(04)
[5]牛分枝杆菌Mb1230基因的表达纯化及其活性评价[J]. 李明,贾红,鑫婷,郭晓宇,袁维锋,侯邵华,侯强,高新桃,吴竞,董瑞凯,杨宏军,刘来兴,朱鸿飞. 中国畜牧兽医. 2015(10)
[6]副结核分歧杆菌IS900基因的检测方法[J]. 郭莹莹,陈关勇,马世福. 养殖技术顾问. 2014(04)
[7]副结核分枝杆菌MAP1588C蛋白的原核表达与抗原性分析[J]. 刘银冰,陈利苹,鄢秋龙,曹俊,刘思国. 中国动物传染病学报. 2012(06)
[8]牛乳中副结核分枝杆菌套式PCR检测方法的建立[J]. 巩强,巩红霞. 中国生物制品学杂志. 2012(08)
[9]牛副结核分枝杆菌LAMP快速检测方法的建立[J]. 王建峰,黄素文,刘思国,倪建波,王春,张吉红,于纪棉,朱堂明,黄绍棠. 中国预防兽医学报. 2012(07)
[10]几种表现消化道症状牛传染病的鉴别诊断[J]. 赵艳芳,巴根那,胡格金,孟宝山. 畜牧与饲料科学. 2012(02)
博士论文
[1]牛病毒性腹泻病毒持续性感染的分子机制研究及其定点突变株的构建[D]. 付强.石河子大学 2015
[2]牛病毒性腹泻病毒囊膜蛋白E2与牛胚胎滋养层细胞相互作用的分子机制研究[D]. 任艳.石河子大学 2010
硕士论文
[1]我国6省市牛副结核病流行病学调查[D]. 崔金磊.内蒙古农业大学 2016
[2]牛副结核病诊断方法的建立及其初步应用[D]. 张振.山东农业大学 2016
[3]副结核分枝杆菌34kD蛋白在牛副结核ELISA检测中的应用研究[D]. 艾兵.吉林农业大学 2015
[4]规模化奶牛场副结核快速诊断方法的比较[D]. 林涛.甘肃农业大学 2012
[5]牛副结核胶体金免疫层析方法的建立[D]. 乔榛.河北农业大学 2010
[6]BVDV-2分离株XJ-04全基因组测序和抗BVDV单克隆抗体制备及初步应用[D]. 林燕清.扬州大学 2010
[7]副结核病DNA疫苗的构建及其免疫效果评价[D]. 王聃.延边大学 2009
[8]牛副结核病的病原检测[D]. 张继才.云南农业大学 2008
[9]牛副结核病多重组抗原间接ELISA方法的建立及应用[D]. 迟磊.吉林农业大学 2007
本文编号：2970863
【文章来源】： 张哲 石河子大学
【文章页数】：61 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
部分牛血清Figure2-1Somebovineseru阴对阳对
疑似牛副结Figure2-2Pictureofclinicalsympto
21图2-3粪便样本抗酸染色镜检结果（100*10）Figure2-3Microscopicexaminationresultsofacid-faststainingofstoolsamples（100*10）2.2嵌套法PCR检测结果对新疆不同地区64份样本进行嵌套法PCR检测。检测牛副结核病使用本章1.1.3中基于IS900特异性片段的MAP引物进行，片段大小452bp；结果见图2-4。图2-4部分牛副结核病PCR诊断结果Figure2-4PCRdiagnosisresultsofsomebovineparatuberculosis根据对这64份临床粪便样本进行检测，结果如表2-10所示；牛副结核病核酸阳性的有52个样本，总阳性率为81.25%，沙湾采集了16份样本，阳性数14份，阳性率87.50%；布尔津地区采集了11份样本，阳性数9份，阳性率81.82%；石河子地区采集了4份样本，阳性数3份，阳性率75.00%；昌吉地区采集了8份样本，阳性数5份，阳性率62.50%；奎屯地区采集了25份样本，阳性数21份，阳性率84.00%；12345678910M11121314151617452bp-100x10700bp400bp100bp
【参考文献】：
期刊论文
[1]新疆南疆某牛场牛副结核流行病学调查研究[J]. 穆拉提·阿不都米吉提,石长青,吴建勇,朱广艺,王廷龙,胡建军. 塔里木大学学报. 2019(02)
[2]副结核分支杆菌MAP0862蛋白的表达及临床应用[J]. 解晓莉,孙阳阳,程凯慧,楚会萌,张亮,王基隆,杨美,杨宏军. 山东农业科学. 2019(02)
[3]宁夏地区奶牛副结核病的血清学调查[J]. 高海慧,康晓冬. 中国畜牧兽医文摘. 2017(10)
[4]副结核分枝杆菌MAP0862蛋白的表达及在间接ELISA中的初步应用[J]. 张振,冯宇,张阁,朱良全,蒋卉,丁家波,赵鹏,常维山. 畜牧兽医学报. 2016(04)
[5]牛分枝杆菌Mb1230基因的表达纯化及其活性评价[J]. 李明,贾红,鑫婷,郭晓宇,袁维锋,侯邵华,侯强,高新桃,吴竞,董瑞凯,杨宏军,刘来兴,朱鸿飞. 中国畜牧兽医. 2015(10)
[6]副结核分歧杆菌IS900基因的检测方法[J]. 郭莹莹,陈关勇,马世福. 养殖技术顾问. 2014(04)
[7]副结核分枝杆菌MAP1588C蛋白的原核表达与抗原性分析[J]. 刘银冰,陈利苹,鄢秋龙,曹俊,刘思国. 中国动物传染病学报. 2012(06)
[8]牛乳中副结核分枝杆菌套式PCR检测方法的建立[J]. 巩强,巩红霞. 中国生物制品学杂志. 2012(08)
[9]牛副结核分枝杆菌LAMP快速检测方法的建立[J]. 王建峰,黄素文,刘思国,倪建波,王春,张吉红,于纪棉,朱堂明,黄绍棠. 中国预防兽医学报. 2012(07)
[10]几种表现消化道症状牛传染病的鉴别诊断[J]. 赵艳芳,巴根那,胡格金,孟宝山. 畜牧与饲料科学. 2012(02)
博士论文
[1]牛病毒性腹泻病毒持续性感染的分子机制研究及其定点突变株的构建[D]. 付强.石河子大学 2015
[2]牛病毒性腹泻病毒囊膜蛋白E2与牛胚胎滋养层细胞相互作用的分子机制研究[D]. 任艳.石河子大学 2010
硕士论文
[1]我国6省市牛副结核病流行病学调查[D]. 崔金磊.内蒙古农业大学 2016
[2]牛副结核病诊断方法的建立及其初步应用[D]. 张振.山东农业大学 2016
[3]副结核分枝杆菌34kD蛋白在牛副结核ELISA检测中的应用研究[D]. 艾兵.吉林农业大学 2015
[4]规模化奶牛场副结核快速诊断方法的比较[D]. 林涛.甘肃农业大学 2012
[5]牛副结核胶体金免疫层析方法的建立[D]. 乔榛.河北农业大学 2010
[6]BVDV-2分离株XJ-04全基因组测序和抗BVDV单克隆抗体制备及初步应用[D]. 林燕清.扬州大学 2010
[7]副结核病DNA疫苗的构建及其免疫效果评价[D]. 王聃.延边大学 2009
[8]牛副结核病的病原检测[D]. 张继才.云南农业大学 2008
[9]牛副结核病多重组抗原间接ELISA方法的建立及应用[D]. 迟磊.吉林农业大学 2007
本文编号：2970863
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/dongwuyixue/2970863.html
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