禽腺病毒血清4型检测、分离鉴定及抗体的制备
发布时间：2021-01-13 18:56
禽腺病毒血清4型（Fowl adenovirus serotype 4,FAdV-4）是家禽心包积液-肝炎综合症（Hydropericardium-hepatitis syndrome,HHS）的主要病原体。自2014年以来,我国广东、河南、湖南、湖北、云南等地区的家禽暴发该疾病,给养殖业带来不同程度的损失。该病主要感染3-5周龄鸡、5-10周龄品种鸭和鹅,感染的初期没有明显症状,一周后开始出现精神沉郁,腿软无力,拉白色或淡绿色稀粪等症状,解剖有明显的浅黄色透明的心包积液和肝脏肿大以及出血的现象。本试验建立了套式PCR检测FAdV-4方法,对疑似病例进行检测,从确诊病例中分离病毒,利用分离浓缩的病毒尿囊液制备油乳剂灭活疫苗,进一步制备卵黄抗体。试验主要内容及结果如下:1 FAdV-4套式PCR检测方法的建立与应用为了对疑似感染FAdV-4的病例进行敏感、快速检测,本试验参考GenBank上发表的FAdV-4六邻体（Hexon）基因片段序列设计了2对特异性检测引物,先对反应条件进行优化,之后建立了套式PCR检测FAdV-4的实验室检测方法。应用该方法对FAdV-4标准毒株进行检测,两步P...
【文章来源】：西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：58 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
FAdV-4套式PCR扩增条件优化
西南大学兽医硕士学位论文24图2FAdV-4套式PCR敏感性试验Fig.2SensitivitytestofFAdV-4nestedPCRa:引物F1/R1PCR扩增结果;b:引物F2/R2PCR扩增结果;c:套式PCR扩增结果M:DL2000DNAMarker；1-10：10-1~10-10稀释；11-20：10-1~10-10稀释；21-30：10-1~10-10稀释a:PCRamplificationofprimerF1/R1;b:PCRamplificationofprimerF2/R2;c:ResultsofnestPCRM:DL2000DNAMarker;1-10:Dilutionof10-1~10-10;11-20:Dilutionof10-1~10-10;21-30:Dilutionof10-1~10-103.3.3FAdV-4套式PCR特异性试验用FAdV-4套式PCR条件扩增FAdV-4、GPV、MDPV、AIV、DHAV，仅有FAdV-4显示有目的条带，其他病毒的核酸在该条件下均不可扩增出目的条带结果见图3。
FAdV-4套式PCR特异性试验
【参考文献】：
期刊论文
[1]人工感染禽腺病毒血清4型对鹅天然免疫反应的影响[J]. 李雪峰,姜磊,孙金艳,李慧昕,马得莹. 中国兽医科学. 2020(02)
[2]卵黄抗体在病毒性疾病防治中的应用[J]. 王业华,单春乔,冯柳柳,陆继爽,李娟,刘艳. 动物医学进展. 2019(07)
[3]鸡安卡拉病卵黄抗体的制备与应用研究[J]. 李心海,迟兰,张林吉. 山东畜牧兽医. 2019(06)
[4]血清4型禽腺病毒研究进展[J]. 朱庆贺,张鹏宇,王观悦,王爽,陈曦,杨旭东,史同瑞. 中国兽药杂志. 2018(11)
[5]海兰褐蛋鸡Ⅰ群禽腺病毒与球虫混感的病例诊断[J]. 向大育,申红春. 今日畜牧兽医. 2018(09)
[6]禽腺病毒4型人工感染SPF鸡动态病理学观察[J]. 吴烨挺,杨志远,林健,赵际成,王小蕾,段会娟,齐志涛,潘洁,刘月焕,刘立新. 中国家禽. 2018(08)
[7]鸡心包积液综合征的诊治[J]. 费强. 兽医导刊. 2017(11)
[8]Ⅰ群禽腺病毒的流行病学和防控研究现状[J]. 楚电峰,刘相娥,薄智勇,刘秋云,冯嫣芳,刘文亭. 中国动物检疫. 2017(05)
[9]禽腺病毒Ⅰ群的研究现状[J]. 王亚楠,韩涛,李纯玲,刘中奇,宋楠,刘瑞凿,雷娜,吴培星. 中国动物保健. 2017(01)
[10]新发鸡心包积液综合征研究进展[J]. 李佳,文鹏程,韩振海,韩娥,肖红芝,郭永霞,褚军,张强,何诚. 中国兽医杂志. 2016(08)
博士论文
[1]胶东地区鸡Ⅰ群禽腺病毒的致病性及防控研究[D]. 董振杰.中国农业大学 2019
[2]Ⅰ群禽腺病毒分离鉴定与通用PCR检测及FAdV-4油乳剂灭活疫苗的研制[D]. 刘吉山.吉林大学 2018
硕士论文
[1]晋中地区Ⅰ群4型禽腺病毒的分离鉴定及致病性研究[D]. 李鑫瑞.山西农业大学 2018
[2]禽腺病毒检测方法的建立及其在弱毒疫苗污染检测中的应用[D]. 董桂伟.山东农业大学 2018
[3]Ⅰ群禽腺病毒血清4型对商品肉鸭的致病性[D]. 张敏敏.山东农业大学 2017
[4]血清4型禽腺病毒的分离、致病性及其抗体间接免疫荧光方法的初步建立[D]. 梁广成.扬州大学 2017
[5]湖北地区Ⅰ群禽腺病毒的分离鉴定及其致病性研究[D]. 徐英英.长江大学 2017
[6]血清4型禽腺病毒GX2013毒株的生物学特性鉴定和检测方法的建立[D]. 陈天骜.扬州大学 2016
本文编号：2975393
【文章来源】：西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：58 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
FAdV-4套式PCR扩增条件优化
西南大学兽医硕士学位论文24图2FAdV-4套式PCR敏感性试验Fig.2SensitivitytestofFAdV-4nestedPCRa:引物F1/R1PCR扩增结果;b:引物F2/R2PCR扩增结果;c:套式PCR扩增结果M:DL2000DNAMarker；1-10：10-1~10-10稀释；11-20：10-1~10-10稀释；21-30：10-1~10-10稀释a:PCRamplificationofprimerF1/R1;b:PCRamplificationofprimerF2/R2;c:ResultsofnestPCRM:DL2000DNAMarker;1-10:Dilutionof10-1~10-10;11-20:Dilutionof10-1~10-10;21-30:Dilutionof10-1~10-103.3.3FAdV-4套式PCR特异性试验用FAdV-4套式PCR条件扩增FAdV-4、GPV、MDPV、AIV、DHAV，仅有FAdV-4显示有目的条带，其他病毒的核酸在该条件下均不可扩增出目的条带结果见图3。
FAdV-4套式PCR特异性试验
【参考文献】：
期刊论文
[1]人工感染禽腺病毒血清4型对鹅天然免疫反应的影响[J]. 李雪峰,姜磊,孙金艳,李慧昕,马得莹. 中国兽医科学. 2020(02)
[2]卵黄抗体在病毒性疾病防治中的应用[J]. 王业华,单春乔,冯柳柳,陆继爽,李娟,刘艳. 动物医学进展. 2019(07)
[3]鸡安卡拉病卵黄抗体的制备与应用研究[J]. 李心海,迟兰,张林吉. 山东畜牧兽医. 2019(06)
[4]血清4型禽腺病毒研究进展[J]. 朱庆贺,张鹏宇,王观悦,王爽,陈曦,杨旭东,史同瑞. 中国兽药杂志. 2018(11)
[5]海兰褐蛋鸡Ⅰ群禽腺病毒与球虫混感的病例诊断[J]. 向大育,申红春. 今日畜牧兽医. 2018(09)
[6]禽腺病毒4型人工感染SPF鸡动态病理学观察[J]. 吴烨挺,杨志远,林健,赵际成,王小蕾,段会娟,齐志涛,潘洁,刘月焕,刘立新. 中国家禽. 2018(08)
[7]鸡心包积液综合征的诊治[J]. 费强. 兽医导刊. 2017(11)
[8]Ⅰ群禽腺病毒的流行病学和防控研究现状[J]. 楚电峰,刘相娥,薄智勇,刘秋云,冯嫣芳,刘文亭. 中国动物检疫. 2017(05)
[9]禽腺病毒Ⅰ群的研究现状[J]. 王亚楠,韩涛,李纯玲,刘中奇,宋楠,刘瑞凿,雷娜,吴培星. 中国动物保健. 2017(01)
[10]新发鸡心包积液综合征研究进展[J]. 李佳,文鹏程,韩振海,韩娥,肖红芝,郭永霞,褚军,张强,何诚. 中国兽医杂志. 2016(08)
博士论文
[1]胶东地区鸡Ⅰ群禽腺病毒的致病性及防控研究[D]. 董振杰.中国农业大学 2019
[2]Ⅰ群禽腺病毒分离鉴定与通用PCR检测及FAdV-4油乳剂灭活疫苗的研制[D]. 刘吉山.吉林大学 2018
硕士论文
[1]晋中地区Ⅰ群4型禽腺病毒的分离鉴定及致病性研究[D]. 李鑫瑞.山西农业大学 2018
[2]禽腺病毒检测方法的建立及其在弱毒疫苗污染检测中的应用[D]. 董桂伟.山东农业大学 2018
[3]Ⅰ群禽腺病毒血清4型对商品肉鸭的致病性[D]. 张敏敏.山东农业大学 2017
[4]血清4型禽腺病毒的分离、致病性及其抗体间接免疫荧光方法的初步建立[D]. 梁广成.扬州大学 2017
[5]湖北地区Ⅰ群禽腺病毒的分离鉴定及其致病性研究[D]. 徐英英.长江大学 2017
[6]血清4型禽腺病毒GX2013毒株的生物学特性鉴定和检测方法的建立[D]. 陈天骜.扬州大学 2016
本文编号：2975393
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