两个单增李斯特菌分离株的毒力测定和基因组测序及比较基因组学分析

发布时间：2021-01-13 22:39

　　单核细胞增生性李斯特菌（Listeria monocytogenges, Lm）简称单增李斯特菌,是人畜共患病李斯特菌病（listeriosis）的病原菌,是食源性致病菌,易感染免疫力低下者,导致胃肠炎、脑膜炎、败血病和流产等。Lm是兼性胞内菌,可作为研究细胞内感染和细胞免疫的模式细菌,还可作为研制抗胞内感染和肿瘤的疫苗的载体菌株。本研究对来源于食品的两株Lm分离株LM605和LM201进行了毒力的体内外测定、基因组测序和针对毒力基因的比较基因组学分析,拟为以LM605或LM201为出发菌株进行Lm的致病机理的探索和减毒活疫苗载体的研制打基础。1.LM605和LM201的体外毒力测定溶血实验表明,两分离株均可形成较小的β溶血环。细胞粘附侵袭实验表明,两分离株对RAW264.7细胞的粘附侵袭能力显著强于对照菌株L. innocua LI56（P<0.01）,LM201的粘附侵袭能力略高于LM605（P>0.05）。生物被膜（biofilm）形成能力测定结果表明,37℃培养24h,两分离株均具有中等生物被膜形成能力（20Dc<OD<40Dc）。2.LM605和LM2... 

【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：58 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略语表
1 文献综述
    1.1 单增李斯特菌简介
        1.1.1 生物学特性
        1.1.2 血清分型
        1.1.3 致病机制
        1.1.4 毒力因子
    1.2 微生物基因组学研究概述
    1.3 微生物比较基因组学研究概述
    1.4 单增李斯特菌基因组学研究进展
2 研究目的和意义
3 材料与方法
    3.1 材料
        3.1.1 菌种
        3.1.2 实验动物和细胞株
        3.1.3 主要试剂
        3.1.4 主要器材
        3.1.5 主要溶液配制
        3.1.6 生物信息学分析软件
    3.2 方法
        3.2.1 LM605和LM201的体外毒力测定
        3.2.2 LM605和LM201的体内毒力测定
        3.2.3 LM605和LM201的基因组测序、拼接和注释
        3.2.4 利用基因组序列进行血清分型
        3.2.5 主要毒力基因的序列分析
        3.2.6 进化分析
        3.2.7 利用基因组序列进行致病相关基因的推测
4 结果与分析
    4.1 LM605和LM201的体外毒力测定结果
        4.1.1 菌落形态和革兰氏染色特性
        4.1.2 溶血性测定结果
        4.1.3 生化鉴定结果
        4.1.4 生物被膜形成能力的比较结果
        4.1.5 LM605和LM201对细胞的粘附侵袭能力测定结果
    4.2 LM605和LM201的体内毒力测定结果
50)的测定结果">        4.2.1 小鼠半数致死量(LD₅₀)的测定结果
        4.2.2 临床症状
        4.2.3 病理解剖学变化
        4.2.4 病理组织学变化
    4.3 LM605和LM201的基因组测序结果与分析
        4.3.1 基因组DNA的提取检测结果
        4.3.2 基因组测序、拼接和注释结果
    4.4 LM605和LM201的比较基因组学分析
        4.4.1 利用基因组序列进行血清分型的结果
        4.4.2 16S rRNA系统进化树构建与分析
        4.4.3 主要毒力基因的序列分析
        4.4.4 主要毒力基因编码的氨基酸序列的分子进化树构建与分析
        4.4.5 利用基因组序列进行致病相关基因推测的结果
5 讨论
    5.1 单增李斯特菌体内毒力测定分析
    5.2 生物被膜（bacteria biofilm）形成能力的分析
    5.3 基因组测序
    5.4 血清分型
    5.5 进化分析
    5.6 毒力基因的推测
6 结论
参考文献
致谢
附录



本文编号：2975679