黄芪多糖脂质体免疫增强剂的研究与应用

发布时间：2021-01-15 09:43

　　黄芪多糖是中药黄芪的主要有效成分之一,具有提高免疫力、抗肿瘤、抗氧化、抗菌和抗癌等作用。脂质体作为一种新型的给药载体,具有靶向释药、缓释、无免疫原性、降低药物毒副作用,提高生物利用度等优势,近年来作为药物载体已被广泛应用。本研究选择黄芪多糖脂质体（APSL）为研究对象,优化了APSL的制备工艺,测定了APSL的体外、体内增强免疫活性和增强免疫的作用机理,并实际应用到鸡新城疫和猪瘟的免疫。本研究的目的,旨在探讨黄芪多糖和脂质体的协同增强免疫作用,开发新型免疫增强剂,提高畜禽疫苗的免疫效果。研究分为以下6个部分：试验Ⅰ、黄芪多糖脂质体制备工艺的优化 采用薄膜分散-微孔滤膜挤压法制备黄芪多糖脂质体,以包封率和载药量为指标,以脂药比、膜材比和超声时间为因素水平,用L9（34）正交设计对制备条件进行优选,用鱼精蛋白法测定黄芪多糖脂质体的包封率,并用透射电镜测定其形态和粒径。结果显示,薄膜分散-微孔滤膜挤压法制备黄芪多糖脂质体的最佳条件为脂药比为10：1,膜材比8：1,超声时间为20 min。验证试验结果表明,采用最佳条件制备的黄芪多糖脂质体包封率和载药量较高,形态和粒径较均匀,重现性好。试验Ⅱ、... 

【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：90 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
前言
文献综述
    第一章 免疫增强剂研究进展
        1 免疫增强剂的概念
        2 免疫增强剂的标准
        3 免疫增强剂的作用机理
        4 免疫增强剂的分类
        5 常用免疫增强剂
            5.1 铝佐剂
            5.2 油乳佐剂
            5.3 细胞因子
            5.4 转移因子
            5.5 细菌CpG-DNA
            5.6 纳米佐剂
            5.7 中药类免疫增强剂
            5.8 脂质体
            5.9 免疫刺激复合物
            5.10 其他
        参考文献
    第二章 脂质体的研究进展
        1 脂质体的结构
        2 脂质体的制备
            2.1 注入法
            2.2 薄膜分散法
            2.3 超声波分散法
            2.4 逆相蒸发法
            2.5 冻干法
            2.6 高压乳匀法
            2.7 钙融合法
            2.8 其他
        3 脂质体的作用特点
        4 脂质体在医学领域的应用
            4.1 作为疫苗佐剂
            4.2 作为药物载体
        5 新型脂质体的研究
        参考文献
    第三章 黄芪多糖的研究进展
        1 黄芪的化学成分
        2 黄芪的药理作用
            2.1 调节心血管
            2.2 增强免疫
            2.3 抗肿瘤
            2.4 其他作用
        3 黄芪多糖的增强免疫作用
            3.1 增强细胞免疫
            3.2 增强体液免疫
            3.3 促进免疫器官发育
            3.4 其他
        4 黄芪多糖在动物生产中的应用
        5 黄芪多糖脂质体的研究
        参考文献
试验研究
    第四章 正交试验优化黄芪多糖脂质体的制备工艺
        1 材料与方法
            1.1 试验药物
            1.2 主要试剂
            1.3 主要仪器设备
            1.4 黄芪多糖（APS）的制备
            1.5 脂质体制备工艺影响因素的考察
            1.6 正交设计优化脂质体处方
            1.7 APS脂质体的制备
            1.8 APS脂质体包封率和载药量的测定
            1.9 APS脂质体中糖含量的测定
        2 结果与分析
            2.1 正交试验结果分析
            2.2 APS脂质体形态及粒径测定结果
            2.3 验证试验
        3 讨论
        参考文献
    第五章 黄芪多糖脂质的体外增强免疫活性的测定
        1 材料与方法
            1.1 试验药物
            1.2 主要试剂
            1.3 主要仪器
            1.4 T淋巴细胞增殖的测定
            1.5 B淋巴细胞增殖的测定
            1.9 数据分析
        2 结果与分析
            2.1 APSL单独作用时T淋巴细胞增殖的变化
            2.2 APSL与PHA共同作用时T淋巴细胞增殖的变化
            2.3 APSL单独作用时B淋巴细胞增殖的变化
            2.4 APSL与LPS共同作用时B淋巴细胞增殖的变化
        3 讨论
        参考文献
    第六章 黄芪多糖脂质体的体内增强活性的测定
        1 材料与方法
            1.1 黄芪多糖脂质体的制备
            1.2 疫苗
            1.3 动物分组及处理
            1.4 血清HI抗体效价测定
            1.5 血清细胞因子测定
            1.6 数据分析
        2 结果
            2.1 淋巴细胞增殖变化
            2.2 抗体效价变化
            2.3 血清IFN-γ浓度的变化
            2.4 血清IL-2浓度的变化
            2.5 血清IL-4浓度的变化
            2.6 血清IL-10浓度的变化
        3 讨论
        参考文献
    第七章 黄芪多糖脂质体对细胞因子的影响
        1 材料与方法
            1.1 试验药物
            1.2 主要试剂
            1.3 主要仪器设备
            1.4 四种细胞因子mRNA表达的测定
                1.4.1 鸡外周血T淋巴细胞的培养
                1.4.2 细胞中总RNA的提取
                1.4.3 反转录（RT）
                1.4.4 PCR引物的设计
                1.4.5 Real-time PCR测定
            1.5 数据分析
        2 结果
            2.1 反应条件的优化
            2.2 IFN-γmRNA表达量的变化
            2.3 IL-2 mRNA表达量的变化
            2.4 IL-4 mRNA表达量的变化
            2.5 IL-10 mRNA表达量的变化
        3 讨论
        参考文献
    第八章 黄芪多糖脂质体在鸡新城疫免疫中的应用
        1 材料与方法
            1.1 试验药物
            1.2 新城疫疫苗及检测抗原
            1.3 主要试剂及仪器
            1.4 动物及分组处理
            1.5 血清抗体效价的测定
            1.6 数据分析
        2 结果
            2.1 A场血清抗体效价的变化
            2.2 B场血清抗体效价的变化
        3 讨论
        参考文献
    第九章 黄芪多糖脂质体在猪瘟免疫中的应用
        1 材料与方法
            1.1 试验药物
            1.2 疫苗
            1.3 主要试剂及仪器
            1.4 动物及分组处理
            1.5 血清抗体效价的测定
            1.6 数据分析
        2 结果
            2.1 A场血清抗体效价的变化
            2.2 B场血清抗体效价的变化
        3 讨论
        参考文献
全文结论
致谢


【参考文献】：
期刊论文
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硕士论文
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本文编号：2978683