氟喹诺酮类药物多残留免疫学检测技术研究

发布时间：2021-01-15 10:19

　　氟喹诺酮（fluoroquinolones, FQs）是第三代喹诺酮类药物，也是近20年来发展最快、研究最多的一类化学合成的抗生素，因其具有抗菌谱广、低毒、高效等特点,而广泛应用于人类临床与畜牧渔养殖业中。FQs类抗菌药为人兽共用药，动物体内药物残留通过食物链进入人体,对人类健康直接产生危害,可以导致细菌耐药性产生，并诱导癌变。因此，世界各国对FQs类抗菌药在动物源性食品中的残留制定了最高残留限量标准（10-1900μg/Kg）。由于FQs药物种类繁多，建立该类药物多残留检测方法有利于高效、快速的控制动物性产品质量安全，因此FQs药物多残留检测方法是目前的研究热点和趋势。基于此，本研究经过大量的试验，研制成功了FQs多残留检测试剂盒和胶体金免疫试纸。在分析FQs类药物分子结构和免疫原性基础上，采用二环己碳二亚胺（DCC）法将Nor（因Nor的结构是多种FQs类药物的母核结构）分别与牛血清白蛋白（BSA）和卵清白蛋白（OVA）进行连接制备免疫抗原（Nor-BSA）和包被抗原（Nor-OVA）。并利用紫外扫描、SDS-PAGE电泳及动物免疫等方法进行鉴定。结果表明，动物免疫产生的多抗血清能... 

【文章来源】：河南农业大学河南省

【文章页数】：104 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

氟喹诺酮药物的结构分类萘啶酸类吡啶酸类喹啉酸类氟嗪酸类

图 1-2. Nor、BSA、Nor-BSA 紫外扫描图谱 1-2 UV scanning spectrum of Nor, BSA, Nor-描曲线变化可以看出，BSA 在 250‐300nm 之0‐360nm 之间有两个吸收峰。偶联使紫外吸联后产物最大吸收峰稍微左移，说明经过偶 果凝胶电泳结果如图 1‐3。左边的 Marker 标准 97.4KD，66.4KD，43.0KD，31.0K，20.0 K，水平线上，比 66.4KD 标准蛋白条带稍微滞蛋白条带平齐，处于同一水平线上。由图中比 BSA 的大，可以说明偶联成功。 测定结果马斯亮蓝法测定的结果见表 1‐1。从表 1‐1

1：Nor-BSA，2：Nor-BSA，3：BSA图 1-3 Nor-BSA 凝胶电泳图Fig. 1-3 SDS-PAGE electrophoresis of Nor-BSA可以看出，被两个不同的 Nor‐BSA 剂量免疫的 6 只上，其中 10μg 剂量组的第一号小鼠的多抗血清效价剂量对抗体产生的免疫效果无必然的联系。 表 1-2 多抗血清效价Tab.1-2 The titer of polyclonal antiserum1 2 3 4 2.683 2.451 2.262 2.474 2.42 2.2 2.028 2.356 2.205 1.753 1.667 1.477 1.963 1.417 1.371 1.202 1.549 0.797 0.811 0.903 1.004 0.46 0.431 0.492

【参考文献】：
期刊论文
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博士论文
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硕士论文
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[2]动物源性食品中磺胺和氟喹诺酮类兽药残留分析方法研究[D]. 姜宁.河北大学 2007
[3]氧氟沙星与二氟沙星的抗体制备及ELISA方法建立[D]. 潘孝成.安徽农业大学 2006
[4]分泌抗链霉素单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及其初步应用[D]. 杨智洪.河南农业大学 2005



本文编号：2978723