新城疫病毒La Sota C5株反向遗传操作平台的优化及Class Ⅰ/Ⅱ嵌合弱毒株的构建与免疫原性评价
发布时间：2021-01-15 21:54
新城疫（Newcastle disease,ND）是由新城疫病毒（Newcastle disease virus,NDV）强毒株引起的一种具有高度传染性的烈性传染病,被世界动物卫生组织（OIE）列为需报告疾病之一。NDV属于副黏病毒科（Paramyxoviridae）,副黏病毒亚科（Paramyxovirinae）,禽腮腺炎病毒属（Avuluvirus）的成员,是单股、负链、不分节段、有囊膜的RNA病毒。本研究对实验室前期构建的La Sota C5反向遗传平台进行了改造和优化,发现改造后的感染性克隆GLaSotaC5与LaSota序列完全一致;且其拯救效率有明显提高。在此基础上构建了 JS10 M/F/HN三个基因替换的重组病毒GLaSotaC5M/F/HN,并比较了其免疫原性。1.新城疫病毒La Sota C5株感染性克隆的改造与优化参照La Sota C5株的全基因序列,将基因组分成4段,经RT-PCR从La Sota C5株感染的尿囊液中扩增目的片段,分别连入克隆载体中;然后顺次克隆到pMD-20T载体中,构建含有La Sota C5基因组大部分片段的中间质粒T-ABCD。该质粒...
【文章来源】：扬州大学江苏省
【文章页数】：91 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２－１?ＴＶＴ－ＧＬａ?Ｓｏｔａ?Ｃ５构建模式图??Ｆｉｇ．２－１?Ｔｈｅ?ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｅｄ?ＴＶＴ－Ｌａ?Ｓｏｔａ?Ｃ５?ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ??
戴建华新域疫病毒Ｌａ?ＳｏｔａＣ５株反向遗传操作平台的优化及其应用们发现拯救毒株的ＭＤＴ值大于１２０ｈ？比亲本毒株ＬａＳｏｔａＣ５毒株ＬａＳｏｔａ?Ｃ５和拯救毒株攻毒实验组的１０只鸡均不死亡，和０．１８。表明拯救毒株与其亲本毒株的致病性相似。为了比较在ＤＦ１细胞上对亲本毒株和拯救病毒进行了的生长曲线的实时间节点的ＴＣＩＤ５Ｇ相似，这表明拯救毒株的复制动力和效率与
ｃ?ＤＦ－１?ｃｅｌｌ?ｃｒｏｓｓ－ｎｅｔｒａｌｉｚａｔｉｏｎ?ｔｅｓｔ??２．４交叉保护结果??免疫后３５ｄ（攻毒前），免疫组均产生了显著水平的ＨＩ抗体，见图４－１。两组血清以Ｌａ??Ｓｏｔａ为抗原测得的抗体效价稍高于Ｇ?Ｌａ?Ｓｏｔａ?Ｍ／Ｆ／ＨＮ为抗原所测效价；Ｌａ?Ｓｏｔａ组和Ｇ?Ｌａ??Ｓｏｔａ?Ｍ／Ｆ／ＨＮ组都在免疫后２１天ＨＩ水平达到最高峰之后两者抗体水平都缓慢下降。??８厂?????ＧＬａＭＦＨ？＾??ｌ．ａＳｃｔ?ａ??７?？?＾??Ｚ??０??约????０?３?７?１０?１４?２１?２８?３５??Ｄａｙｓ?ｐｏｓｔ?ｉｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎ??图４－１免疫后ＨＩ抗体的动态曲线??Ｆｉｇ．４－１?Ｍｅａｎ?ＨＩ?（?Ｌｏｇ２）?ｒｅｓｐｏｎｓｅ?ａｆｔｅｒ?ｉｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎ??免疫３５天后，选用ＮＤＶ基因ＶＩＩ型代表ＺＪｌ株，ＩＸ型强毒Ｆ４８和Ｃｌａｓｓ?Ｉ强毒９ａ５ｂ??对各组鸡进行攻毒，攻毒后Ｌａ?Ｓｏｔａ及ＧＬａ?Ｓｏｔａ?Ｃ５Ｍ／Ｆ／ＨＮ免疫组１０天内均未发病，而??ＰＢＳ攻毒对照组鸡则在攻毒后７ｄ内全部死亡（见表４－５
【参考文献】：
期刊论文
[1]家禽肠道黏膜屏障结构及功能研究进展[J]. 冯焱,张芬鹊,李建慧. 中国家禽. 2016(04)
[2]肠道黏膜免疫的研究[J]. 陈建辉,李慧峰,雷照亮,李清宏. 黑龙江畜牧兽医. 2016(01)
[3]黏膜免疫系统研究进展[J]. 张欣悦,高永翔,谢怡敏. 中药与临床. 2015(05)
[4]野生水禽源ClassⅠ新城疫病毒对SPF鸡的致病性研究[J]. 杨少华,许传田,黄艳艳,张琳,黄庆华,胡北侠,朱曼玲,张秀美. 畜牧兽医学报. 2015(09)
[5]黏膜免疫系统及黏膜免疫研究进展[J]. 王悦芸,刘琪,安欣宇,周如月,冯晓声,贾爱卿,王贵平. 畜牧与兽医. 2015(07)
[6]禽类黏膜免疫系统的研究[J]. 刘红. 黑龙江畜牧兽医. 2014(23)
[7]家禽疫苗诱导的粘膜免疫应答[J]. 刘开春,孟春春,仇旭升,孙英杰,谭磊,宋翠萍,彭大新,丁铲. 中国动物传染病学报. 2014(06)
[8]动物肠道黏膜免疫系统研究进展[J]. 祁珊珊,郑红星. 黑龙江畜牧兽医. 2014(13)
[9]新城疫病毒La Sota C5株感染性克隆的构建及病毒拯救[J]. 汪军卿,张向乐,孟春春,仇旭升,孙英杰,谭磊,宋翠萍,丁铲. 中国动物传染病学报. 2013(06)
[10]家禽黏膜免疫系统与疫苗免疫[J]. 张蕊,高雪丽,郑世民. 中国家禽. 2012(16)
硕士论文
[1]新城疫La Sota C5株反向遗传平台建立及鸡IFN-β单克隆抗体制备[D]. 张向乐.中国农业科学院 2013
本文编号：2979578
【文章来源】：扬州大学江苏省
【文章页数】：91 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２－１?ＴＶＴ－ＧＬａ?Ｓｏｔａ?Ｃ５构建模式图??Ｆｉｇ．２－１?Ｔｈｅ?ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｅｄ?ＴＶＴ－Ｌａ?Ｓｏｔａ?Ｃ５?ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ??
戴建华新域疫病毒Ｌａ?ＳｏｔａＣ５株反向遗传操作平台的优化及其应用们发现拯救毒株的ＭＤＴ值大于１２０ｈ？比亲本毒株ＬａＳｏｔａＣ５毒株ＬａＳｏｔａ?Ｃ５和拯救毒株攻毒实验组的１０只鸡均不死亡，和０．１８。表明拯救毒株与其亲本毒株的致病性相似。为了比较在ＤＦ１细胞上对亲本毒株和拯救病毒进行了的生长曲线的实时间节点的ＴＣＩＤ５Ｇ相似，这表明拯救毒株的复制动力和效率与
ｃ?ＤＦ－１?ｃｅｌｌ?ｃｒｏｓｓ－ｎｅｔｒａｌｉｚａｔｉｏｎ?ｔｅｓｔ??２．４交叉保护结果??免疫后３５ｄ（攻毒前），免疫组均产生了显著水平的ＨＩ抗体，见图４－１。两组血清以Ｌａ??Ｓｏｔａ为抗原测得的抗体效价稍高于Ｇ?Ｌａ?Ｓｏｔａ?Ｍ／Ｆ／ＨＮ为抗原所测效价；Ｌａ?Ｓｏｔａ组和Ｇ?Ｌａ??Ｓｏｔａ?Ｍ／Ｆ／ＨＮ组都在免疫后２１天ＨＩ水平达到最高峰之后两者抗体水平都缓慢下降。??８厂?????ＧＬａＭＦＨ？＾??ｌ．ａＳｃｔ?ａ??７?？?＾??Ｚ??０??约????０?３?７?１０?１４?２１?２８?３５??Ｄａｙｓ?ｐｏｓｔ?ｉｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎ??图４－１免疫后ＨＩ抗体的动态曲线??Ｆｉｇ．４－１?Ｍｅａｎ?ＨＩ?（?Ｌｏｇ２）?ｒｅｓｐｏｎｓｅ?ａｆｔｅｒ?ｉｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎ??免疫３５天后，选用ＮＤＶ基因ＶＩＩ型代表ＺＪｌ株，ＩＸ型强毒Ｆ４８和Ｃｌａｓｓ?Ｉ强毒９ａ５ｂ??对各组鸡进行攻毒，攻毒后Ｌａ?Ｓｏｔａ及ＧＬａ?Ｓｏｔａ?Ｃ５Ｍ／Ｆ／ＨＮ免疫组１０天内均未发病，而??ＰＢＳ攻毒对照组鸡则在攻毒后７ｄ内全部死亡（见表４－５
【参考文献】：
期刊论文
[1]家禽肠道黏膜屏障结构及功能研究进展[J]. 冯焱,张芬鹊,李建慧. 中国家禽. 2016(04)
[2]肠道黏膜免疫的研究[J]. 陈建辉,李慧峰,雷照亮,李清宏. 黑龙江畜牧兽医. 2016(01)
[3]黏膜免疫系统研究进展[J]. 张欣悦,高永翔,谢怡敏. 中药与临床. 2015(05)
[4]野生水禽源ClassⅠ新城疫病毒对SPF鸡的致病性研究[J]. 杨少华,许传田,黄艳艳,张琳,黄庆华,胡北侠,朱曼玲,张秀美. 畜牧兽医学报. 2015(09)
[5]黏膜免疫系统及黏膜免疫研究进展[J]. 王悦芸,刘琪,安欣宇,周如月,冯晓声,贾爱卿,王贵平. 畜牧与兽医. 2015(07)
[6]禽类黏膜免疫系统的研究[J]. 刘红. 黑龙江畜牧兽医. 2014(23)
[7]家禽疫苗诱导的粘膜免疫应答[J]. 刘开春,孟春春,仇旭升,孙英杰,谭磊,宋翠萍,彭大新,丁铲. 中国动物传染病学报. 2014(06)
[8]动物肠道黏膜免疫系统研究进展[J]. 祁珊珊,郑红星. 黑龙江畜牧兽医. 2014(13)
[9]新城疫病毒La Sota C5株感染性克隆的构建及病毒拯救[J]. 汪军卿,张向乐,孟春春,仇旭升,孙英杰,谭磊,宋翠萍,丁铲. 中国动物传染病学报. 2013(06)
[10]家禽黏膜免疫系统与疫苗免疫[J]. 张蕊,高雪丽,郑世民. 中国家禽. 2012(16)
硕士论文
[1]新城疫La Sota C5株反向遗传平台建立及鸡IFN-β单克隆抗体制备[D]. 张向乐.中国农业科学院 2013
本文编号：2979578
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