四川地区猪群中耐甲氧西林金黄色葡萄球的分离鉴定和耐药性研究

发布时间：2021-01-16 06:38

　　现在的养猪业规模巨大,相关动物产品的使用和食用人群众多,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（Methicillin-Resistantst Staphylococcus aureus,MRSA）的发现引发了各界对养猪业及其产品的普遍关注。到目前为止,由MRSA引起的人畜感染所占的比例呈逐年上升的趋势,并且常引起感染的爆发和流行、影响甚大。mecA基因是MRSA特有的耐药基因,femA功能基因是MRSA耐药性的辅助因子,两者在其耐药性中都起到了一定的作用。因此本试验采用mecA、femA基因检测,结果阳性则诊断为MRSA。本文旨在对从四川猪场采集120份样品中分离的猪源金黄色葡萄球菌进行PCR、扩增mecA和femA基因。对鉴定出的猪源MRSA进行耐药性检测与SCCmec分型。本试验主要研究结果如下：1.金黄色葡萄球菌的分离纯化：2013年3月至年2013年12月期间,在四川地区12个规模化猪场采集猪鼻腔拭子、粪便样品共计120份。采样后接种血清琼脂、37℃培养18h,在平板上挑取金黄、柠檬黄或灰白色、边缘整齐而且表面光滑的圆形菌落。革兰氏染色、镜检后,接种于卵黄甘露醇高盐琼脂培养基。在35℃、培... 

【文章来源】：四川农业大学四川省 211工程院校

【文章页数】：46 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
符号说明
第一章 文献综述
    1 MRSA的起源
    2 MRSA的传染途径及危害
    3 MRSA的形态结构及培养特性
    4 MRSA的耐药性
        4.1 甲氧西林的药理特性
        4.2 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药特点
        4.3 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药机理
        4.4 MRSA菌株的致病因子
    5 MRSA的常规实验室检测方法
        5.1 卵黄甘露醇高盐琼脂培养基对MRSA的初步分离
        5.2 MRSA的K-B检测方法
        5.3 最低抑菌浓度法
        5.4 E试验法
        5.5 乳胶凝集法
    6 MRSA的耐药基因检测
        6.1 β-内酰胺类药物耐药基因的检测
        6.2 氨基糖苷类药物耐药基因
        6.3 大环内酯类-林可霉素-链阳菌素B-耐药基因
        6.4 四环素类药物耐药基因
        6.5 喹诺酮类药物耐药基因
        6.6 万古霉素耐药基因
        6.7 细菌生物被膜与耐药及其检测
    7 MRSA的分子生物学基因分型方法
        7.1 葡萄球菌染色体mec盒分型（staphylococcal hromosomalcassette（SCC）mec,SCCmec）
        7.2 脉冲场凝胶电泳分型
        7.3 多位点序列分型
        7.4 可变数目串联重复分型（variable number tandem repea,tVNTR）
        7.5 金葡菌蛋白A基因多态性分型
    8 MRSA的治疗及预防
        8.1 防治MRSA的常见药物
        8.2 防治MRSA的有效新药（已上市或在研发阶段的药物）
        8.3 防治MRSA的用药方法及其他措施
    9 本实验的研究目的和意义
第二章 四川地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的分离鉴定
    1 材料与方法
        1.1 材料
        1.2 试验方法
    2 结果
        2.1 四川各地区猪场的SA、MRSA检测结果
        2.2 猪源金黄色葡萄球菌mecA-fem耐药基因的PCR检测结果
        2.3 SCCmec基因的分型结果
        2.4 MRSA的测序结果
        2.5 MRSA的耐药试验结果
        2.6 猪源MRSA的基因型和多重耐药性的关系
    3 讨论
        3.1 四川省各地区猪源SA菌株的初步分离
        3.2 MRSA菌株的检测、分型情况
        3.3 MRSA菌株的耐药性分析
        3.4 MRSA菌株的耐药性、基因型和环境的相互关系
第四章 结论
参考文献
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]耐甲氧西林金黄色葡萄球菌基因诊断及多重PCR SCCmec基因分型方法的建立[J]. 程建平,曾浩,邹全明,毛旭虎,郭鹰,肖斌,丁红雷.  中华医院感染学杂志. 2012(11)
[2]金黄色葡萄球菌临床分离株的耐药谱变迁[J]. 周勇,杨乐和,林雪峰,李云雷,郑隆,方超,李继法,徐显,余方友,王良兴.  中华医院感染学杂志. 2012(11)
[3]耐甲氧西林金黄色葡萄球菌三种检测方法的评价[J]. 毕丽凤,徐倩,李洪志,陈洋.  中国误诊学杂志. 2011(23)
[4]耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分子流行病学研究[J]. 师志云,赵志军,贾伟,李刚,杨晓燕,张楠,魏军.  中华医院感染学杂志. 2011(14)
[5]头孢西丁纸片法检测MRSA的评价[J]. 王燕,范琳,彭慧平.  中国医疗前沿. 2011(06)
[6]临床分离耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药性及分子流行病学研究[J]. 赵彩芸,肖永红,王珊,李耘,刘健,杨维维,郝凤兰.  中国临床药理学杂志. 2011(02)
[7]动物及其制品中的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌[J]. 沈定树,周雪艳.  中国卫生检验杂志. 2011(01)
[8]猪源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药性及其SCCmec基因分型研究[J]. 王新,黄山,周婷,刘俊宁,杨保伟,席美丽,申进玲,只帅,孟江洪.  中国预防兽医学报. 2010(12)
[9]耐甲氧西林金黄色葡萄球菌在动物流行病学中的研究进展[J]. 戴方伟,柯贤福,周莎桑,宋晓明,萨晓婴.  中国比较医学杂志. 2010(07)
[10]金黄色葡萄球菌耐盐生长的形态观察及机理的初步研究[J]. 陈俊,张惠萍,朱希贵,黎琼艳,陈培富.  云南农业大学学报(自然科学版). 2010(04)



本文编号：2980338