LPS对母兔下丘脑、卵巢和输卵管中TLR4、TLR2及其相关免疫细胞因子表达的影响
发布时间:2021-01-17 08:21
脂多糖(LPS)是革兰氏阴性菌的细胞壁成分,是TLR4和TLR2的共同配体,同时也是病原分子相关模式物(PAMP)的典型代表。作为一种内毒素,它能够诱导机体产生与感染革兰氏阴性菌相同的免疫应激过程。本研究中采用耳缘静脉注射一定量的LPS,模拟母兔自然状态下感染革兰氏阴性菌时的免疫应激过程。旨在研究革兰氏阴性菌感染对母兔下丘脑、卵巢和输卵管中TLR4、TLR2以及其下游免疫细胞因子IL-1β、IL-6和TNF-α表达的影响。通过荧光定量PCR检测TLR4、TLR2、IL-1β、IL-6以及TNF-α的转录水平,利用ELISA检测IL-1β、 IL-6以及TNF-α的蛋白表达量。荧光定量PCR结果显示:下丘脑、卵巢和输卵管中均有TLR4、TLR2、IL-1β、 IL-6和TNF-α的转录,注射生理盐水后TLR4各个时间点转录水平与0h相比差异不显著(P>0.05), TLR2在下丘脑中6h和输卵管中3h显著高于0h(P<0.05),各个组织中1.5-12h,免疫细胞因子的转录水平与Oh相比没有显著变化(P>0.05);LPS诱导后,与0h相比TLR4转录水平仅在卵巢中显著...
【文章来源】:四川农业大学四川省 211工程院校
【文章页数】:52 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
ABSTRACT
1 文献综述
1.1 TLR2与TLR4的概述
1.1.1 TLR2与TLR4的发现及分子结构
1.1.2 TLR2与TLR4的相应配体及识别特点
1.1.3 TLR2与TLR4的信号传导通路
1.1.4 TLR2与TLR4的研究近况
1.1.5 TLR2与TLR4与动物繁殖疾病
1.1.6 TLRs的生物学意义及应用展望
1.2 免疫细胞因子概述
1.2.1 免疫细胞因子研究进展
1.2.2 免疫细胞因子与雌性动物繁殖疾病
1.3 本研究的目的和意义
2 材料方法
2.1 实验动物
2.2 试验材料
2.2.1 试剂药品
2.2.2 主要溶液的配制
2.3 主要仪器设备
2.4 试验步骤
2.4.1 总RNA的提取
2.4.2 反转录过程
2.4.3 实时定量PCR过程(以GAPDH为内参)
2.4.4 组织全蛋白的提取
2.4.5 蛋白质浓度测定
2.4.6 IL-1β、IL-6和TNF-α的ELISA检测
2.5 数据分析
3 结果与分析
3.1 总RNA的提取
3.2 标准曲线的制作
3.3 荧光定量PCR产物的特异性
3.4 LPS对TLR4在输卵管、卵巢和下丘脑中转录水平的影响
3.5 LPS对TLR2在输卵管、卵巢和下丘脑中转录水平的影响
3.6 LPS对输卵管、卵巢、下丘脑中IL-1β表达水平的影响
3.7 LPS对输卵管、卵巢、下丘脑中IL-6的表达水平的影响
3.8 LPS对输卵管、卵巢、下丘脑中TNF-α的表达水平的影响
4 讨论
4.1 LPS感染对下丘脑、卵巢以及输卵管中TLR4、TLR2转录水平的影响
4.2 LPS感染对下丘脑、卵巢以及输卵管中IL-1β表达的影响
4.3 LPS感染对下丘脑、卵巢以及输卵管中IL-6表达的影响
4.4 LPS感染对下丘脑、卵巢以及输卵管中TNF-α表达的影响
5 结论
参考文献
致谢
攻读硕士学位期间发表的论文
【参考文献】:
期刊论文
[1]缺血后处理对脑缺血再灌注大鼠TNF-α和IL-1β表达影响[J]. 吕敬雷,王鹏,隋雪琴,高翔,赵仁亮. 齐鲁医学杂志. 2012(04)
[2]Expression and Immune Effect of Toll-Like Receptor 4 in Human Trophoblast Cells[J]. 邓飞涛,韩芳,吴超英. Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences). 2009(03)
[3]Toll样受体与临床疾病关系的研究进展[J]. 嵇武,李宁. 中国误诊学杂志. 2007(16)
[4]几种细胞因子在妊娠滋养细胞疾病监测中的应用[J]. 李茜,金玮. 中国初级卫生保健. 2005(06)
[5]慢性盆腔炎输卵管病理与IL-2 IL-6的关系[J]. 赵广兴,马宝璋,袁家麟. 辽宁中医杂志. 2003(09)
本文编号:2982520
【文章来源】:四川农业大学四川省 211工程院校
【文章页数】:52 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
ABSTRACT
1 文献综述
1.1 TLR2与TLR4的概述
1.1.1 TLR2与TLR4的发现及分子结构
1.1.2 TLR2与TLR4的相应配体及识别特点
1.1.3 TLR2与TLR4的信号传导通路
1.1.4 TLR2与TLR4的研究近况
1.1.5 TLR2与TLR4与动物繁殖疾病
1.1.6 TLRs的生物学意义及应用展望
1.2 免疫细胞因子概述
1.2.1 免疫细胞因子研究进展
1.2.2 免疫细胞因子与雌性动物繁殖疾病
1.3 本研究的目的和意义
2 材料方法
2.1 实验动物
2.2 试验材料
2.2.1 试剂药品
2.2.2 主要溶液的配制
2.3 主要仪器设备
2.4 试验步骤
2.4.1 总RNA的提取
2.4.2 反转录过程
2.4.3 实时定量PCR过程(以GAPDH为内参)
2.4.4 组织全蛋白的提取
2.4.5 蛋白质浓度测定
2.4.6 IL-1β、IL-6和TNF-α的ELISA检测
2.5 数据分析
3 结果与分析
3.1 总RNA的提取
3.2 标准曲线的制作
3.3 荧光定量PCR产物的特异性
3.4 LPS对TLR4在输卵管、卵巢和下丘脑中转录水平的影响
3.5 LPS对TLR2在输卵管、卵巢和下丘脑中转录水平的影响
3.6 LPS对输卵管、卵巢、下丘脑中IL-1β表达水平的影响
3.7 LPS对输卵管、卵巢、下丘脑中IL-6的表达水平的影响
3.8 LPS对输卵管、卵巢、下丘脑中TNF-α的表达水平的影响
4 讨论
4.1 LPS感染对下丘脑、卵巢以及输卵管中TLR4、TLR2转录水平的影响
4.2 LPS感染对下丘脑、卵巢以及输卵管中IL-1β表达的影响
4.3 LPS感染对下丘脑、卵巢以及输卵管中IL-6表达的影响
4.4 LPS感染对下丘脑、卵巢以及输卵管中TNF-α表达的影响
5 结论
参考文献
致谢
攻读硕士学位期间发表的论文
【参考文献】:
期刊论文
[1]缺血后处理对脑缺血再灌注大鼠TNF-α和IL-1β表达影响[J]. 吕敬雷,王鹏,隋雪琴,高翔,赵仁亮. 齐鲁医学杂志. 2012(04)
[2]Expression and Immune Effect of Toll-Like Receptor 4 in Human Trophoblast Cells[J]. 邓飞涛,韩芳,吴超英. Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences). 2009(03)
[3]Toll样受体与临床疾病关系的研究进展[J]. 嵇武,李宁. 中国误诊学杂志. 2007(16)
[4]几种细胞因子在妊娠滋养细胞疾病监测中的应用[J]. 李茜,金玮. 中国初级卫生保健. 2005(06)
[5]慢性盆腔炎输卵管病理与IL-2 IL-6的关系[J]. 赵广兴,马宝璋,袁家麟. 辽宁中医杂志. 2003(09)
本文编号:2982520
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