兔雌性胚胎干细胞X染色体活性状态的研究

发布时间：2021-01-19 01:08

　　X染色体的活性状态与雌性胚胎干细胞（embryonic stem cells, ES cells）或诱导多能细胞（iuduced pluripotent stem cells, iPS cells）的多能状态有重要的相关性。双活性X染色体是雌性ES或iPS细胞具有生殖系嵌合能力的一种重要标志。兔是一种常用的实验室动物,虽然已经有较多的兔ES和iPS细胞系建立,但是一直未获得具有生殖系嵌合能力的细胞系,制约了转基因兔和兔胚胎发育等相关研究的进展。至今为止,在兔ES和iPS细胞的研究中,未见有关于X染色体活性状态的报道。本课题以B28-6、NJ12、NJ10等3株兔雌性ES细胞为研究对象,对兔雌性ES细胞X染色体活性状态进行研究。在前期研究中发现,兔雌性ES细胞系与人ES细胞类似,X染色体活性状态存在不同类别。3株兔雌性ES细胞在早期传代的条件下（P<10）均已经启动X染色体失活（Xchromosome inactive, XCI）。其中B28-6、NJ12免疫荧光染色H3K27me3点状着色,Xist正常表达,表现为一条活性一条失活的X染色体（XiXistXa）。有趣的是,余下的一... 

【文章来源】：中国农业大学北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：119 页

【学位级别】：博士

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中文摘要
Abstract
主要缩写
第一章 引言
    1.1 ES细胞和iPS细胞简介
    1.2 Naive和primed多能状态
    1.3 X染色体失活的机制
    1.4 ES细胞X染色体的活性状态
    1.5 兔ES及iPS细胞的研究进展
    1.6 本研究的目的和意义
第二章 材料与方法
    2.1 兔ES细胞系的建立及鉴定
    2.2 兔ES细胞X染色体活性状态的鉴定
    2.3 Ⅲ类兔ES细胞重编程
    2.4 mESC-like兔ES细胞系的鉴定
第三章 实验结果与分析
    3.1 兔ES细胞系的建立和鉴定
    3.2 兔雌性ES细胞X染色体活性存在多种状态
    3.3 Ⅲ类兔ES细胞体内分化能力缺陷伴癌基因高表达
    3.4 Ⅲ类兔ES细胞重编程
    3.5 mESC-like兔ES细胞系的鉴定
    3.6 mESC-like兔ES细胞类似于小鼠ES细胞
    3.7 Ⅲ类兔ES细胞X染色体重激活
    3.8 mESC-like兔ES细胞体内分化能力提高癌基因表达下降
第四章 讨论与展望
结论
参考文献
致谢
附录 引物序列
作者简历



本文编号：2986030