粪类圆线虫感染沙鼠模型的建立及CRISPR/Cas9基因敲除方法的初步尝试
发布时间：2021-01-19 12:43
粪类圆线虫（Strongyloides stercoralis）是一种常见且分布广泛,危害严重的肠道寄生线虫,主要感染犬、人和其它灵长类动物。由于粪类圆线虫独特的生活史,它可以在宿主体内和体外进行交替繁殖。同时粪类圆线虫自由生活雌虫具有性腺合胞体结构,与雌雄同体的秀丽隐杆线虫（Caenorhabditis elegans）结构非常相似,因此可以将转基因质粒显微注射至其性腺,达到研究其基因的目的。针对寄生线虫,目前没有有效的疫苗,只能依靠化学药物进行杀灭和控制。但是由于几十年来重复使用几种常用杀虫药物,使得虫体对其产生了耐药性,因此开发抗寄生线虫疫苗和寻找新的潜在的药物作用靶点迫在眉睫,而转基因技术则是应用于研究寄生线虫基因功能所必须的一种重要工具。起源于细菌和古细菌经过长期适应性免疫逐步形成的Ⅱ型成簇的有规律间隔短回文重复系统[Clustered regularly interspaced short palindromic repeats（CRISPR）/CRISPR-associated nuclease 9（Cas9）,CRISPR/Cas9],配合向导RNA（g RNA）成为C...
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：98 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
粪类圆线虫的生活史示意图
图 1-2：粪类圆线虫及其虫卵的形态示意图（周艺燕等 2012）Fig.1-2: The morphology of Strongyloides stercoralis and egg3 粪类圆线虫病的症状及其流行病学慢性感染：当一次接触少量粪类圆线感染性三期幼虫（iL3）虫时，会形成慢性，这种情况比较多见。患者通常不表现出明显不适症状，但有时也表现出轻微痛、腹泻、厌食、消化不良、恶心呕吐和消瘦等不良症状。急性感染：当一次性接触大量感染性三期幼虫（iL3）时，只需数分钟即可从皮入体内，并引起轻微的瘙痒、红肿。约 1 周后，幼虫移行到肺部和支气管时，通常表现为哮喘、肺炎或支气管炎。约 2-3 周过后，进入小肠的寄生雌虫（PF产卵，形成慢性疾病，不会出现明显不适症状。情况严重的患者出现临床症状为便秘、痉挛、间歇性腹泻、腹痛（林金祥等 2000, 高世华等 2005）。重度感染：感染粪类圆线虫的多数患者在感染早期呈现无症状或轻微症状，因病与机体免疫功能的状态紧密相关。当机体因后天性免疫缺陷，长期大剂量使素和免疫抑制剂或其它疾病导致免疫力和抵抗力大幅下降时，会引起粪类圆线
（4.0%）的粪类圆线虫（Nicolas et al 2006）。然而在危地马拉 14914 名孕妇进行检测，并应用低敏感性诊断方法，报告的流lar et al 1989）。这是比较使用不同诊断方法的进行调查的一个难民和移民进行的研究，其中大部分发现在移民和难民中感染75%，感染率在很大程度上取决于难民的原籍。在 1990 年的加诊断工具，发现越南难民的患病率为 11.8%，而柬埔寨难民的orkos et al 1990）。在许多国家，如果移民在医院就诊，就会经沙特阿拉伯进行的一项研究分析了来自不同亚洲国家的 5518 0.6%。其中菲律宾为 0.4%，印度尼西亚为 0.5%，斯里兰卡为，泰国为 3.4%（Madani et al 1995）。1996 年的调查结果显示，22%，主要流行在我国东南部及南部地区，感染率最高的是海南 1997）。1999 年有报道山东省博兴县居民该虫感染率为 1.29性别差异（郭建东等 2005）。2007 年有报道云南省勐海县居%(33/283)（姜进勇等 2008）。最新 2017 年报道广西凌云县居（8/130）（罗秀秀 2017）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]不同干扰荒漠生境中子午沙鼠的繁殖及种群动态特征[J]. 杨素文,袁帅,付和平,包达尔罕,满都呼,叶丽娜,岳闯,武晓东. 动物学杂志. 2017(05)
[2]广西凌云县土源性线虫土壤污染调查分析[J]. 罗秀秀,方钰,莫彬华,李秀慧,解继胜,孔保庆,漆光紫,覃凌峰,邓积广. 右江民族医学院学报. 2017(02)
[3]十二指肠粪类圆线虫病的临床、病理及内镜特征[J]. 郭晓红,杨根源,院秀娟,叶峙良. 胃肠病学和肝病学杂志. 2016(11)
[4]封闭群子午沙鼠的寄生虫感染及药物净化效果[J]. 徐艺玫,王新国,史深,罗芸,张燕,燕顺生,戴小华,赵红琼. 中国实验动物学报. 2016(05)
[5]长爪沙鼠的行为和生理生态学研究进展[J]. 张学英,迟庆生,刘伟,王德华. 中国科学:生命科学. 2016(01)
[6]sgRNAcas9软件图形用户界面开发及应用[J]. 赵长志,张懿,李广磊,陈济良,李京津,任瑞敏,倪攀,赵书红,谢胜松. 遗传. 2015(10)
[7]我国土源性线虫病监测现状及今后监测工作重点[J]. 陈颖丹,臧炜. 中国血吸虫病防治杂志. 2015(02)
[8]以肠梗阻为表现的粪类圆线虫1例报道并文献复习[J]. 王本贤,陈晓琴,周力. 中国伤残医学. 2014(10)
[9]广州管圆线虫在长爪沙鼠体内的发育及其引起的病理损害[J]. 韦永芳,陈代雄,梁成结,罗晓东,朱郇悯. 中国人兽共患病学报. 2014(01)
[10]干燥综合征感染粪类圆线虫病1例报告并文献分析[J]. 陈月馨,谢瑾灼,沈浩贤,周承惇. 热带医学杂志. 2011(10)
硕士论文
[1]我国沙鼠属和短耳沙鼠属的系统进化分析[D]. 罗光杰.兰州大学 2016
[2]子午沙鼠和长爪沙鼠的分子系统地理学研究[D]. 梁君.安徽大学 2007
本文编号：2987008
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：98 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
粪类圆线虫的生活史示意图
图 1-2：粪类圆线虫及其虫卵的形态示意图（周艺燕等 2012）Fig.1-2: The morphology of Strongyloides stercoralis and egg3 粪类圆线虫病的症状及其流行病学慢性感染：当一次接触少量粪类圆线感染性三期幼虫（iL3）虫时，会形成慢性，这种情况比较多见。患者通常不表现出明显不适症状，但有时也表现出轻微痛、腹泻、厌食、消化不良、恶心呕吐和消瘦等不良症状。急性感染：当一次性接触大量感染性三期幼虫（iL3）时，只需数分钟即可从皮入体内，并引起轻微的瘙痒、红肿。约 1 周后，幼虫移行到肺部和支气管时，通常表现为哮喘、肺炎或支气管炎。约 2-3 周过后，进入小肠的寄生雌虫（PF产卵，形成慢性疾病，不会出现明显不适症状。情况严重的患者出现临床症状为便秘、痉挛、间歇性腹泻、腹痛（林金祥等 2000, 高世华等 2005）。重度感染：感染粪类圆线虫的多数患者在感染早期呈现无症状或轻微症状，因病与机体免疫功能的状态紧密相关。当机体因后天性免疫缺陷，长期大剂量使素和免疫抑制剂或其它疾病导致免疫力和抵抗力大幅下降时，会引起粪类圆线
（4.0%）的粪类圆线虫（Nicolas et al 2006）。然而在危地马拉 14914 名孕妇进行检测，并应用低敏感性诊断方法，报告的流lar et al 1989）。这是比较使用不同诊断方法的进行调查的一个难民和移民进行的研究，其中大部分发现在移民和难民中感染75%，感染率在很大程度上取决于难民的原籍。在 1990 年的加诊断工具，发现越南难民的患病率为 11.8%，而柬埔寨难民的orkos et al 1990）。在许多国家，如果移民在医院就诊，就会经沙特阿拉伯进行的一项研究分析了来自不同亚洲国家的 5518 0.6%。其中菲律宾为 0.4%，印度尼西亚为 0.5%，斯里兰卡为，泰国为 3.4%（Madani et al 1995）。1996 年的调查结果显示，22%，主要流行在我国东南部及南部地区，感染率最高的是海南 1997）。1999 年有报道山东省博兴县居民该虫感染率为 1.29性别差异（郭建东等 2005）。2007 年有报道云南省勐海县居%(33/283)（姜进勇等 2008）。最新 2017 年报道广西凌云县居（8/130）（罗秀秀 2017）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]不同干扰荒漠生境中子午沙鼠的繁殖及种群动态特征[J]. 杨素文,袁帅,付和平,包达尔罕,满都呼,叶丽娜,岳闯,武晓东. 动物学杂志. 2017(05)
[2]广西凌云县土源性线虫土壤污染调查分析[J]. 罗秀秀,方钰,莫彬华,李秀慧,解继胜,孔保庆,漆光紫,覃凌峰,邓积广. 右江民族医学院学报. 2017(02)
[3]十二指肠粪类圆线虫病的临床、病理及内镜特征[J]. 郭晓红,杨根源,院秀娟,叶峙良. 胃肠病学和肝病学杂志. 2016(11)
[4]封闭群子午沙鼠的寄生虫感染及药物净化效果[J]. 徐艺玫,王新国,史深,罗芸,张燕,燕顺生,戴小华,赵红琼. 中国实验动物学报. 2016(05)
[5]长爪沙鼠的行为和生理生态学研究进展[J]. 张学英,迟庆生,刘伟,王德华. 中国科学:生命科学. 2016(01)
[6]sgRNAcas9软件图形用户界面开发及应用[J]. 赵长志,张懿,李广磊,陈济良,李京津,任瑞敏,倪攀,赵书红,谢胜松. 遗传. 2015(10)
[7]我国土源性线虫病监测现状及今后监测工作重点[J]. 陈颖丹,臧炜. 中国血吸虫病防治杂志. 2015(02)
[8]以肠梗阻为表现的粪类圆线虫1例报道并文献复习[J]. 王本贤,陈晓琴,周力. 中国伤残医学. 2014(10)
[9]广州管圆线虫在长爪沙鼠体内的发育及其引起的病理损害[J]. 韦永芳,陈代雄,梁成结,罗晓东,朱郇悯. 中国人兽共患病学报. 2014(01)
[10]干燥综合征感染粪类圆线虫病1例报告并文献分析[J]. 陈月馨,谢瑾灼,沈浩贤,周承惇. 热带医学杂志. 2011(10)
硕士论文
[1]我国沙鼠属和短耳沙鼠属的系统进化分析[D]. 罗光杰.兰州大学 2016
[2]子午沙鼠和长爪沙鼠的分子系统地理学研究[D]. 梁君.安徽大学 2007
本文编号：2987008
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