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犊牛与成年牛卵泡液差异蛋白质组学分析

发布时间:2021-01-20 11:23
  幼畜体外胚胎培养体系(JIVET)对于充分挖掘优良母畜的生产潜能具有重要意义,不仅有助于加快遗传改良的进程,而且对于商品化胚胎生产也是具有重大的推动作用。犊牛卵母细胞体外发育能力远低于成年牛,卵泡液是卵母细胞生长发育的微环境,卵母细胞体外发育潜能与卵泡液中蛋白成分紧密相关。本研究以超数排卵后犊牛和成年牛卵泡液为研究对象,利用基质辅助激光解离串联时间质谱技术(MALDI-TOFMS)对卵泡液中多肽进行差异分析,并利用双向电泳技术对卵泡液蛋白质组学进行差异蛋白比较。通过这两种技术对卵泡液中蛋白质组学进行全面分析,试图找到与卵母细胞生长发育相关的关键多肽和差异蛋白,为犊牛卵母细胞体外培养体系的完善奠定理论基础。本试验的研究结果总结如下。1.采用基质辅助激光解离串联时间质谱技术(MALDI-TOFMS)对新鲜卵泡液多肽成分进行分析。分别成功构建了两组卵泡液的质谱多肽信号峰模型图谱;在成年牛组中出现30-40个信号峰,犊牛中有60-80个;其中成年牛卵泡液有2个特有信号峰,核质比分别为1218.58(m/z)和1509.77(m/z),犊牛有1个特有信号峰,核质比为953.54(m/z);利用M... 

【文章来源】:广西大学广西壮族自治区 211工程院校

【文章页数】:59 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
ABSTRACT
中英文对照
第一章 文献综述
    1 蛋白质组学研究技术
        1.1 双向电泳技术
        1.2 质谱分析技术研究进展
    2 卵泡液的概述
        2.1 卵泡液形成过程
        2.2 活性分子对卵泡液形成调控
        2.3 卵泡液与卵母细胞
    3 卵泡液中蛋白质研究进展
        3.1 质谱技术对卵泡液中蛋白鉴定
        3.2 双向电泳技术对卵泡液中蛋白鉴定
    4 研究目的与意义
第二章 MALDI-TOF MS对超排犊牛和成年牛卵泡液多肽信息分析
    1 材料与方法
        1.1 主要仪器试剂
        1.2 主要试剂
        1.3 卵泡液的获取
        1.4 实验方法
    2 结果与分析
        2.1 超数排卵效果分析
        2.2 超排犊牛和成年牛卵泡液多肽参考模型图谱构建
        2.3 卵泡液质谱峰面积比较
        2.4 MASCOT搜库对卵泡液多肽信息鉴定
    3 讨论
    4 结论
第三章 犊牛与成年牛卵泡液蛋白质组学差异分析
    1 材料和方法
        1.1 材料与试剂
        1.2 实验方法
    2 结果与分析
        2.1 犊牛和成年牛卵泡液双向电泳蛋白质图谱构建
        2.2 犊牛与成年牛卵泡液图谱总蛋白比较
        2.3 犊牛和成年牛卵泡液中差异蛋白分析
    3 讨论
        3.1 转铁蛋白对卵泡发育及卵母细胞成熟的影响
        3.2 卵母细胞成熟因子mos对卵泡发育及卵母细胞成熟的影响
        3.3 BCL2L12对卵泡发育及卵母细胞影响
        3.4 肿瘤坏死因子α对卵泡发育及卵母细胞成熟的影响
    4 结论
参考文献
致谢
攻读硕士期间发表学术论文


【参考文献】:
期刊论文
[1]肿瘤坏死因子-α与卵巢反应性及妊娠的相关性探讨[J]. 赵敏,李娜,林大凯,程丽平.  中国生育健康杂志. 2012 (06)
[2]犊牛超数排卵方法的研究[J]. 郑自华,毛献宝,陈宝剑,潘斌,黎江,范晓明,沈创,韦英明.  中国畜牧兽医. 2012(07)
[3]水牛卵泡液液相色谱分离及差异蛋白质分析[J]. 付强,杨丽,刘振方,张明,卢克焕.  中国畜牧兽医. 2012(04)
[4]双向电泳技术筛选乙肝患者血清中标志蛋白[J]. 吴志鹏,谢志勇,林丽彬,柯益彬,李春来.  黑龙江医药科学. 2012(01)
[5]利用MALDI-TOF质谱比较水牛卵泡液多肽变化的研究[J]. 付强,刘振方,杨丽,张明,卢克焕.  中国畜牧兽医. 2012(01)
[6]切割穹窿海马伞后大鼠与正常大鼠海马蛋白质组双向电泳图谱比较[J]. 秦建兵,李浩明,金国华,田美玲,衣昕,谭雪锋,张新化.  南通大学学报(医学版). 2011(04)
[7]卵泡液蛋白质组学2-DE体系的构建与应用[J]. 戴国,卢光琇.  激光生物学报. 2011(03)
[8]“胰岛素-转铁蛋白-硒钠”对山羊卵母细胞体外成熟及胚胎发育的影响[J]. 刘凤军,张玉玲,杨自军,王国华,张涌.  安徽农业科学. 2008(28)
[9]人胆汁蛋白质组双向荧光差异凝胶电泳图谱的建立与差异分析[J]. 陈波,刘小方,邹声泉,鲁艳军,汪昕.  中华实验外科杂志. 2008 (04)
[10]血清蛋白质组双向凝胶电泳技术的建立[J]. 母昭德,彭咏波,易发平,邱宗荫.  重庆医科大学学报. 2006(06)

博士论文
[1]超促排卵周期卵泡发育特点及卵母细胞发育潜能的相关机制研究[D]. 吴琰婷.浙江大学 2008
[2]猪卵母细胞和早期胚胎中c-mos和Oct-4基因表达以及RNAi研究[D]. 刘丽清.东北农业大学 2007
[3]人卵泡发育过程中卵泡液蛋白质组学研究[D]. 李黎.第一军医大学 2007

硕士论文
[1]绵羊卵泡液蛋白的蛋白质组学分析[D]. 徐铁山.甘肃农业大学 2010
[2]唾液蛋白质组2D-MALDI-TOF/MS的分析及初步应用[D]. 申琳琳.重庆医科大学 2008



本文编号:2988954

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