糖皮质激素对肉鸡骨骼肌葡萄糖摄取的影响及机制研究

发布时间：2021-01-21 02:52

　　本研究利用外源导入糖皮质激素的方法，从体内和体外两个试验模型探讨糖皮质激素对家禽骨骼肌葡萄糖代谢机制的研究。活体试验：一方面通过分离肌肉细胞粗膜、细胞质膜和细胞内膜，探讨葡萄糖转运载体候选蛋白的移位情况；另一方面通过外源导入糖皮质激素的方法，建立应激模型，研究了糖皮质激素和日粮氨基酸对肉仔鸡葡萄糖代谢的影响，以及糖皮质激素、日粮氨基酸及急性灌服葡萄糖对葡萄糖代谢的交互影响，初步探讨了糖皮质激素调控骨骼肌葡萄糖代谢的机制。离体试验：培养鸡胚成肌细胞，通过外源添加特异性抑制剂的方法，研究胰岛素利用MAPK/ERK2途径激活p70S6K、mTOR和PKB/Akt调控家禽骨骼肌葡萄糖代谢的可能性。试验一包括三个小试验：试验1随机挑选体重相近0日龄的AA肉仔鸡150只，分为两个处理：基础日粮添加2.05%L-丙氨酸组和基础日粮添加1%L-精氨酸组。饲养至7日龄，每组挑选体重相近的肉仔鸡112只，设2个小处理：糖皮质激素组和对照组，每个小处理7个重复，每个重复4只鸡。8--14日龄每天8:00和20:00，糖皮质激素组腹部皮下注射DEX （1mg/Kg BM），对照组注射与糖皮质激素组等体积的生理... 

【文章来源】：山东农业大学山东省

【文章页数】：67 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

哺乳动物的胰岛素受体（IR）信号通路（Taniguchietal,2006）

成肌细胞：吸取界面处细胞加入另一离心管中。加入适量 D-Hanks 吹打心 8min，弃上清。加入含胎牛血清的培养液，混匀至一管中。加 D-Hanks 目的是降低 Percoll 浓度，若离心一次未得到细胞沉淀，可s 离心。：取 100ul 细胞液，再加 100ul 台盼蓝，混匀，用细胞计数板计数。：根据计数结果，将细胞悬液加入一定量培养液，15%的胎牛血清。种ml 左右，放入 37℃培养箱培养。六孔板每孔加入 2ml 培养基。液：种板后，根据细胞形态观察贴壁情况。平均两天换一次液。

P-p70 P-mTOR P-Akt P-ERKP 0.0061 0.0239 0.0281 0.9798图 4 胰岛素处理对鸡成肌细胞葡萄糖代谢通路的影响Fig.4 The phosphorylation of p70S6K, mTOR and Akt by chicken embryonic myoblasts exposed to insulin3.2.2 MEK 抑制剂处理对鸡成肌细胞葡萄糖代谢通路的影响如图 5 所示，相比正常培养基培养的成肌细胞，胰岛素处理显著的激活了 p70S6Thr389和 Akt Ser473位点的磷酸化水平，对 mTOR Ser2448和 ERK Tyr204位点有激活趋势；在培养基中加入不同浓度的 MEK 抑制剂（U0126）后，MEK 抑制剂显著地制了胰岛素诱导的 p70S6K Thr389、 mTOR Ser2448和 Akt Ser473位点的磷酸化水平，时对 ERK Tyr204位点的磷酸化水平有抑制的趋势，但没达到显著效果。


本文编号：2990308