利用BmNPV Bac-to-Bac系统在家蚕体内表达狂犬病毒M蛋白及抗体制备

发布时间：2021-01-21 03:01

　　杆状病毒表达载体系统（Baculovirus Expression Vector System,BEVS）是将外源目的基因导入杆状病毒基因组,获得重组病毒,然后以此作为载体感染昆虫幼虫或其培养细胞。Bac-to-Bac表达系统通过位点特异性转座,在大肠杆菌内完成杆状病毒基因组的重组。BmNPV Bac-to-Bac杆状病毒表达系统由于能够以家蚕为载体大量表达外源蛋白,且省时省力,是制备生物活性蛋白的优良选择。狂犬病毒（Rabies Virus,RV）M基因ORF为609个核苷酸,编码202个氨基酸残基的基质蛋白,分子量约25 KD,其在子代病毒的装配、出芽和形态形成中起重要作用。本研究利用BmNPV Bac-to-Bac表达系统表达了重组的RVM（rRV-M）蛋白,将纯化的rRV-M蛋白作为抗原免疫小鼠,对制备出的血清抗体进行间接ELISA效价测定。本研究结果可以为RVM蛋白的功能探索提供抗原和抗体来源,也能为家蚕生物反应器的开发利用提供参考。研究的具体内容及结果如下:1、通过将RV M基因的ORF定向克隆到供体质粒pFastBacHTA上,构建重组供体质粒pFastBacHTA-M;... 

【文章来源】：广西大学广西壮族自治区 211工程院校

【文章页数】：62 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图３－３重组杆粒ｒＢａｃｍｉｄ－Ｍ的蓝白斑筛选??Ｆｉｇ．３－３?Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ?ｏｆ?ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ?ｒＢａｃｍｉｄ－Ｍ?ｂｙ?ｂｌｕｅ－ｗｈｉｔｅ?ｓｐｏｔ??

图３－４重组杆粒ｒｉＢａｃｍｉｄ－Ｍ?ＤＮＡ的ＰＣＲ鉴定??Ｆｉｇ．３－４?Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ?ｒＢａｃｍｉｄ－Ｍ?ＤＮＡ?ｂｙ?ＰＣＲ??

图３－８?ＲＶ?Ｍ在家香内表达ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ分析??Ｆｉ．３－８?ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ?Ａｎａｌｓｉｓ?ｏｆ?ＲＶ?Ｍ?Ｅｘｒｅｓｓｉｏｎ?ｉｎ?Ｓｉｌｋｗｏｒｍ??


本文编号：2990323