苏、鲁、川地区禽坦布苏病毒病的流行情况调查及三重抗体ELISA方法的建立

发布时间：2021-01-22 09:28

　　为了解坦布苏病毒病在我国家禽类中的流行情况,应用间接ELISA方法对江苏、山东、四川的鸭、鸡和鹅进行了抗坦布苏病毒抗体测定,并对可疑病例的病料进行了病毒分离。2012年5月至2013年1月江苏省抗体阳性率为78.5%（142/181）,四川省抗体阳性率为0（0/40）。其中抗体阳性地区绍兴鸭（蛋鸭）的抗体阳性率为90.9%（100/110）,枫叶鸭（种鸭）为65.6%（40/61）,樱桃谷鸭（种鸭）为20%（2/10）。通过对南京某鸭群多次抗体检测结果表明,5月和次年1月抗体水平较低,9月抗体水平较高,5月到9月份抗体水平呈升高趋势,9月到次年1月呈下降趋势。2012年10月至2013年1月江苏部分地区的84份鸡血清（卵黄）抗坦布苏病毒抗体总体阳性率为57.1%（49/84）。溧阳抗体阳性率为84.6%（11/13）;南京抗体阳性率为57.7%（15/26）;镇江抗体阳性率为51.1%（23/45）。蛋鸡的抗体阳性率为66.7%（26/39）,肉鸡的抗体阳性率为51.1%（23/45）。应用套式RT-PCR方法检测10份肉鸡可疑病料,结果病原阳性率为0（0/10）。应用酶标鸭二抗间接E... 

【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：72 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
英文缩略表
引言
第一章 文献综述
    1 病原学
        1.1 病毒形态及理化特性
        1.2 病毒培养特性
    2 分子生物学
        2.1 基因结构及复制机制
        2.2 编码的蛋白
    3 流行病学
    4 临床症状与病理变化
    5 诊断方法
        5.1 病毒分离
        5.2 分子生物学检测
        5.3 血清学检测
    6 防治
第二章 鸭坦布苏病毒病流行情况调查
    摘要
    1 材料
        1.1 病毒株、重组E蛋白、阴阳性血清、阴阳性卵黄抗体
        1.2 主要试剂
        1.3 主要实验仪器
    2 方法
        2.1 调查地点选取
        2.2 流行病学调查
        2.3 样品采集
        2.4 间接ELISA方法
    3 结果
        3.1 江苏及四川样品ELISA检测结果
        3.2 不同采样时间的鸭坦布苏病毒抗体效价变化
        3.3 不同品种鸭抗体阳性率结果
    4 讨论
    ABSTRACT
第三章 鸡坦布苏病毒病流行情况调查
    摘要
    1 材料
        1.1 重组E蛋白、阴阳性血清、阴阳性卵黄抗体
        1.2 主要试剂
        1.3 主要实验仪器
    2 方法
        2.1 样品采集与处理
        2.2 间接ELISA
        2.3 套式RT-PCR检测
    3 结果
        3.1 江苏不同地区ELISA检测结果
        3.2 不同品种鸡抗体阳性率结果
        3.3 套式RT-PCR检测结果
    4 讨论
    ABSTRACT
第四章 鹅坦布苏病毒病流行情况调查
    摘要
    1 材料
        1.1 主要试剂及菌种
        1.2 主要实验仪器
    2 方法
        2.1 流行病学调查
        2.2 样品采集与处理
        2.3 间接ELISA检测
        2.4 套式RT-PCR检测
        2.5 PCR阳性产物鉴定及回收
        2.6 胶回收产物与T载体的连接
        2.7 DH5a感受态细胞的制备
        2.8 连接产物的转化
        2.9 重组质粒的提取
        2.10 重组质粒的鉴定
        2.11 NS5基因的序列测定与分析
    3 结果
        3.1 发病情况调查及剖检病变观察结果
        3.2 江苏、山东与四川样品ELISA检测结果
        3.3 不同品种鹅抗体阳性率结果
        3.4 套式RT-PCR检测结果
        3.5 重组质粒的鉴定
        3.6 NS5基因部分片段的序列分析结果
    4 讨论
    ABSTRACT
第五章 三重抗体ELISA方法的建立
    摘要
    1 材料
        1.1 实验动物
        1.2 主要试剂
        1.3 主要仪器
    2 方法
        2.1 羊抗鹅二抗的制备
        2.2 ELISA方法的建立
        2.3 江苏部分地区鹅血清样品的检测
    3 结果
        3.1 粗提蛋白含量与纯度检测结果
        3.2 免疫双扩散结果
        3.3 ELISA反应条件优化结果
        3.4 江苏,山东部分地区鹅血清检测结果
    4 讨论
    ABSTRACT
参考文献
全文总结
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]禽坦布苏病毒病的防控[J]. 刘宇卓.  农家致富. 2013(03)
[2]鸭坦布苏病毒RT-PCR诊断方法的建立与应用[J]. 李国平.  中国畜牧兽医. 2013(01)
[3]种鸭黄病毒病疫苗免疫效果观察[J]. 张金强,王胜,张青婵,玄甲峰,王蕾,胡北侠,许明清,李霞,张秀美.  中国家禽. 2013(02)
[4]鹅黄病毒囊膜蛋白的原核表达及抗原性分析[J]. 黄欣梅,李银,赵冬敏,刘宇卓,张敬峰,韩凯凯,钮慧敏.  华北农学报. 2012(05)
[5]禽黄病毒套式RT-PCR检测方法的建立及应用[J]. 黄欣梅,赵冬敏,刘宇卓,张敬峰,韩凯凯,李银.  畜牧与兽医. 2012(06)
[6]鹅黄病毒JS804株的生物学特性[J]. 钮慧敏,李银,黄欣梅,赵东敏,刘宇卓,张敬峰,刘飞,李彤彤,周晓波,李祥瑞.  江苏农业学报. 2012(02)
[7]检测鸭坦布苏病毒卵黄抗体间接ELISA方法的建立[J]. 施少华,傅光华,万春和,程龙飞,陈红梅,林建生,林芳,梁昭平,王斌,李敏,王鑫,许芬芬,黄瑜.  养禽与禽病防治. 2012(02)
[8]鸭坦布苏病毒一步法RT-PCR检测方法的建立和应用[J]. 张帅,云涛,叶伟成,邓晓辉,崔言顺,华炯钢,张存,张燕.  浙江农业学报. 2012(01)
[9]一例鸭坦布苏病毒与大肠杆菌混合感染的诊断[J]. 刘友生,傅光华,黄瑜,陈红梅,程龙飞,施少华,万春和,林建生,林芳.  福建畜牧兽医. 2012(01)
[10]新型黄病毒在种鹅中垂直传播的研究[J]. 赵冬敏,黄欣梅,刘宇卓,张敬峰,李银.  南方农业学报. 2012(01)

硕士论文
[1]鸭坦布苏病毒巢式PCR检测方式及其重组E蛋白间接ELISA诊断方法的研究[D]. 郝明飞.山东农业大学 2012



本文编号：2992985