不同宿主感染REV情况调查及分离株gp90基因序列分析

发布时间：2021-01-23 23:25

　　网状内皮组织增生症（Reticuloendotheliosis, RE）是指由网状内皮组织增生病毒（Reticuloendotheliosis virus, REV）引起的禽类的一种重要的免疫抑制病和致瘤性疾病,包括急性网状细胞肿瘤、生长抑制、淋巴组织和其他组织慢性肿瘤形成的病理综合症。REV不仅可以单独使禽类致病,也可与其他疾病混和感染,降低禽类对其他疾病的抵抗力,给禽类养殖业造成巨大经济损失。REV的常见宿主为鸡、鸭等家禽,同时REV亦可感染野生鸟类。为了解不同宿主对REV的感染情况,从全国各地采集了不同宿主来源的样品1563份,对其进行初步PCR检测,从不同宿主来源的样品中得到68份阳性样品,将阳性样品适当处理后接种DF-1细胞,利用IFA、PCR复检等方法检测后得到7株REV分离株,分别为CH120057株、CH120099株、CH120220株、CH120276株、CH120277株、WB11042株和WB11043株。分别从不同宿主阳性检出率和分离率、不同品种的鸡阳性检出率、不同品种的野鸟的阳性检出率和不同品种的水禽检出率4个角度对不同宿主来源感染REV的情况进行分析,推断... 

【文章来源】：东北林业大学黑龙江省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：81 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
1 绪论
    1.1 课题背景
    1.2 禽网状内皮组织增生症研究进展
        1.2.1 病原学
        1.2.2 症状与病变
        1.2.3 REV的危害
        1.2.4 诊断
        1.2.5 REV预防和控制
    1.3 REV的流行病学研究进展
        1.3.1 发生与分布
        1.3.2 病毒的传播
        1.3.3 REV的流行特征及趋势
        1.3.4 野生鸟类对疾病的传播
    1.4 本研究的主要目的和意义
2 不同宿主禽网状内皮组织增生症的流行病学调查
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验样品
        2.1.2 主要实验仪器
        2.1.3 主要试剂
    2.2 实验方法
        2.2.1 样品的处理
        2.2.2 PCR初筛
        2.2.3 病毒分离与鉴定
    2.3 实验结果
        2.3.1 PCR初筛阳性样品
        2.3.2 REV的分离和鉴定
        2.3.3 不同种宿主样品中REV检测结果
    2.4 讨论
        2.4.1 REV总的阳性检出率与分离率的比较分析
        2.4.2 不同品种鸡REV阳性检出率与分离率的比较分析
        2.4.3 不同品种野生鸟类阳性检出率与分离率的比较分析
        2.4.4 不同品种水禽阳性检出率与分离率的比较分析
        2.4.5 不同宿主REV阳性检出率与分离率的比较分析
3 REV分离株的gp90基因克隆及序列分析
    3.1 实验材料
        3.1.1 试验样品
        3.1.2 实验仪器
        3.1.3 实验试剂
    3.2 实验方法
        3.2.1 病毒前DNA提取
        3.2.2 PCR实验
        3.2.3 PCR产物回收和纯化
        3.2.4 连接
        3.2.5 转化
        3.2.6 阳性重组质粒鉴定
        3.2.7 序列测定与分析
    3.3 实验结果
        3.3.1 重组质粒PCR结果
        3.3.2 测序结果
        3.3.3 基因序列的比较和分析
    3.4 讨论
4 结论
附录1
参考文献
攻读学位期间发表的学术论文
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]东北地区野生鸟类B亚群禽白血病的分子流行病学调查及env基因的序列分析[J]. 李德龙,刘婉思,杨波,高奇,曾祥伟,秦立廷,高宏雷,刘思当,高玉龙,王笑梅.  中国兽医科学. 2013(02)
[2]禽网状内皮组织增生病病毒TaqMan探针荧光定量PCR检测方法的建立及应用[J]. 李凯,高宏雷,高立,祁小乐,高玉龙,徐延伟,王笑梅.  中国兽医科学. 2010(11)
[3]我国部分地区蛋鸡群ALV-J及与REV、MDV、CAV混合感染检测[J]. 秦立廷,高玉龙,潘伟,邓小芸,孙芬芬,李凯,祁小乐,高宏雷,刘超男,王笑梅.  中国预防兽医学报. 2010(02)
[4]鸭群中REV感染的流行病学调查[J]. 倪楠,崔治中.  微生物学报. 2008(04)
[5]禽网状内皮组织增生病病毒囊膜蛋白基因的克隆及其原核表达[J]. 瞿晓兰,王宏俊,陈小玲,章振华.  华北农学报. 2006(S1)
[6]禽痘疫苗病毒中网状内皮组织增生病病毒5′LTR整合位点序列分析[J]. 于立娟,崔治中.  微生物学报. 2006(04)
[7]网状内皮组织增生症病毒中国分离株HA9901全基因组核苷酸序列的测定与分析[J]. 王玉,崔治中,姜世金.  中国科学（C辑:生命科学）. 2005(04)
[8]我国自然发病鸡群中MDV、REV和CAV共感染的检测[J]. 姜世金,孟珊珊,崔治中,田夫林,王增福.  中国病毒学. 2005(02)
[9]用单抗介导的免疫荧光试验检测组织切片中的禽网状内皮组织增生病病毒[J]. 张志,王锡乐,庄国庆,崔治中.  中国兽医学报. 2005(02)
[10]Isolation of recombinant field strains of Marek’s disease virus integrated with reticuloendotheliosis virus genome fragments[J]. ZHANG Zhi & CUI Zhizhong Department of Preventive Veterinary Medicine, College of Animal Science and Veterinary Medicine, Shandong Agriculture University, Taian 271018, China.  Science in China（Series C:Life Sciences）. 2005(01)

博士论文
[1]网状内皮组织增生症病毒的分子流行病学调查及其在宿主免疫选择压下的分子变异[D]. 王玉.山东农业大学 2005



本文编号：2996111