绵羊肺炎支原体抗体ELISA检测方法的建立

发布时间：2021-01-24 03:26

　　为了建立特异性好和敏感性高的绵羊肺支原体抗体ELISA检测方法,以绵羊肺炎支原体Y98标准菌株的全菌蛋白作为抗原,进行了反应体系和反应条件的优化筛选。结果显示:最佳蛋白抗原包被浓度为1.52μg/mL,最适封闭液及其稀释浓度为1%BSA,血清样品的稀释度为1/50,兔抗山羊IgG的最适稀释浓度为1/4 000,一抗和二抗的最佳作用时间为37℃60 min,底物显色的最佳时间为10 min;通过与绵羊肺炎支原体抗体间接血凝试验（IHA）检测结果相比,60份羊血清样品中Y98 ELISA检出阳性为33份,阴性为20份,二者的检测符合率可达到88.33%,相对特异性达90.90%。提示:建立的绵羊肺炎支原体血清抗体检测方法具有较高的检测敏感性和特异性,为绵羊肺炎支原体的抗体检测及其感染的流行病学调查提供了一种快速简便的检测工具。 

【文章来源】：畜牧与兽医. 2020,52(06)北大核心

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

血清最佳反应时间的优化

二抗最佳稀释浓度(a)和最佳作用时间(b)的优化

封闭液的筛选优化

【参考文献】：
期刊论文
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博士论文
[1]绵羊肺炎支原体检测方法的建立及黏附蛋白的研究[D]. 黄海碧.内蒙古农业大学 2016

硕士论文
[1]猪流感病毒（H3N2）NP蛋白纳米抗体的制备及阻断ELISA方法的建立与评价[D]. 朱光.西北农林科技大学 2019
[2]绵羊肺炎支原体生物学特性及其PCR快速检测技术的研究[D]. 张莉.河北农业大学 2003



本文编号：2996475