马立克氏病病毒糖蛋白gC多克隆抗体的制备及反应特异性研究

发布时间：2021-01-25 12:21

　　马立克氏病病毒（Marek’s disease virus,MDV）糖蛋白C（glycoprotein C,gC）是参与MDV水平传播的重要毒力因子,但其具体作用机制尚未明确。研究gC蛋白所需的抗体在国内未见报道,为简化抗体制备程序,本研究采用合成抗原肽免疫的策略,通过生物信息学软件分析发现gC蛋白的优势抗原表位主要集中在其69～85氨基酸区段,据此合成肽段N-NSESTNEHTITETTGKN-C作为抗原免疫日本大耳白兔。在有弗氏佐剂条件下,5次免疫后采集抗血清,斑点印迹试验显示制备的抗gC多克隆抗体与合成肽的反应效价为1∶10 000;经亲和层析柱纯化后的gC抗体具有良好的反应特异性,对转染或MDV感染的细胞中运用免疫荧光试验和免疫印迹技术均能检测到特异的阳性信号。与疫苗毒相比,广西野毒分离株gC蛋白的免疫荧光信号更强。本研究获得的MDV的gC多克隆抗体可用于后续对gC蛋白功能的研究。 

【文章来源】：广西畜牧兽医. 2020,36(06)

【文章页数】：4 页

【部分图文】：

间接免疫荧光鉴定MDV gC多抗血清的反应特异性

经分析,MDV的gC基因相对保守,不同毒株间差异小,其氨基酸序列较为特异,含有3个跨膜区域,其二级结构多为无规则卷曲与β折叠,根据蛋白抗原性分析结果,选择69～85氨基酸的区段为免疫用抗原多肽(图1)。2.2 gC兔多抗血清效价测定

Dot blot测定抗血清与合成肽的反应效价

【参考文献】：
期刊论文
[1]兔抗人CXCR3-B分子N端多肽多克隆抗体的制备与初步应用[J]. 高媛,杨金菊,柳晓兰,刘莉,刘超燕,Gian P.Visentin,高建恩,孙启鸿.  细胞与分子免疫学杂志. 2006(02)

硕士论文
[1]ALV引起的免疫抑制对马立克氏病疫苗免疫保护效果的影响[D]. 林璐璐.广西大学 2018



本文编号：2999214