猪卵母细胞体外成熟培养及孤雌胚胎体外培养的研究
发布时间：2021-01-28 04:24
猪是人类最主要的肉用家畜,全世界猪肉的产量占肉类总产量的40%以上。我国是世界第一养猪大国,生猪的饲养量超过了全世界总饲养量的一半,养猪业在农业和整个国民经济中都占有十分重要的地位。此外,它在生理和解剖方面接近于人类,可以作为人类器官移植的理想供体来源。体外受精、核移植、器官移植等胚胎工程技术的研究和应用越来越广泛,卵母细胞体外培育的质量是决定胚胎生物工程研究和应用成败的关键因素之一,但至今卵母细胞体外培养的成熟效果仍然很不稳定。孤雌激活能够为探究胚胎早期发育机理、分析发育过程中相关基因功能等提供良好的实验材料。目前对猪卵母细胞孤雌激活方法和相关激活参数的研究已经比较成熟,但在激活后孤雌胚的体外培养仍然存在着一些难以攻克的难关,例如如何打破四细胞期的发育阻滞,如何提高其发育到囊胚的成功率、降低卵裂的畸形率等,这些都是亟待解决的问题。本研究对影响猪卵母细胞体外成熟效果及孤雌胚胎体外发育的因素进行研究,以期为猪卵母细胞体外成熟及胚胎体外发育相关机制研究提供参考依据,该研究对胚胎工程及人类器官移植的发展具有重要的现实意义。本试验通过对猪卵母细胞体外成熟培养和孤雌激活后的胚胎在体外培养过程中进...
【文章来源】：陕西师范大学陕西省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：55 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩写对照表
第1章 前言
1.1 猪卵母细胞体外成熟影响因素研究进展
1.1.1 卵巢的采集及转运对卵母细胞体外成熟培养效果的影响
1.1.2 卵母细胞的收集方法对卵母细胞体外成熟培养效果的影响
1.1.3 不同培养基配方对卵母细胞体外成熟培养效果的影响
1.1.4 培养条件对卵母细胞体外成熟培养效果的影响
1.2 猪孤雌胚胎体外发育的研究进展
1.2.1 孤雌激活方法对猪孤雌胚胎体外发育的影响
1.2.2 卵母细胞的卵龄对猪孤雌胚胎体外发育的影响
1.2.3 培养条件对猪孤雌胚胎体外发育的影响
1.3 基因CDX2、GLUT1、HSP70和ploy A的功能及其对卵母细胞体外发育影响的可能性
1.3.1 CDX2基因
1.3.2 GLUT1基因
1.3.3 HSP70基因
1.4 本研究的目的和意义
第2章 EGF对猪卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎发育的影响
2.1 材料试剂
2.1.1 主要的仪器及耗材
2.1.2 主要试剂
2.2 实验方法
2.2.1 猪卵母细胞的采集和体外成熟培养
2.2.2 卵母细胞的孤雌激活
2.3 实验结果
2.4 讨论
第3章 LIF对猪卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎发育的影响
3.1 材料试剂
3.1.1 主要的仪器及耗材
3.1.2 主要试剂
3.2 实验方法
3.2.1 猪卵母细胞的采集和体外成熟培养
3.2.2 孤雌激活
3.3 结果
3.3.1 比较成熟培养基中添加不同浓度LIF对卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎体外发育的影响
3.3.2 比较胚胎培养基中添加不同浓度的LIF对孤雌胚胎体外发育的影响
3.3.3 比较成熟培养基及胚胎培养基中均添加不同浓度的LIF对孤雌胚胎体外发育的影响
3.4 讨论
第4章 卵丘细胞对猪卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎发育的影响
4.1 材料试剂
4.1.1 主要的仪器及耗材
4.1.2 主要试剂
4.2 试验方法
4.2.1 猪卵母细胞的采集和体外成熟培养
4.2.2 孤雌激活
4.3 实验结果
4.4 讨论
第5章 基因GLUT1、CDX2、HSP70和ploy A的表达分析
5.1 材料试剂
5.1.1 主要的仪器设备
5.1.2 主要试剂
5.2 试验方法
5.2.1 实验方案
5.2.2 实验材料的准备
5.2.3 RNA的提取
5.2.4 cDNA第一链的合成
5.2.5 实时荧光定量PCR进行基因表达的分析
5.3 实验结果
5.3.1 基因GLUT1、CDX2、HSP70和ploy A在不同浓度LIF处理后的成熟卵母细胞间的表达
5.3.2 基因GLUT1、CDX2、HSP70和ployA在卵母细胞及孤雌胚胎不同发育阶段的表达
5.4 讨论
结论
参考文献
致谢
攻读硕士学位期间的发表文章
【参考文献】：
期刊论文
[1]卵丘细胞对猪卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎体外发育的影响[J]. 岑文,华再东,郑新民,肖红卫,张立苹,吴民耀. 中国畜牧兽医. 2015(03)
[2]表皮生长因子样因子在LH峰效应中的作用及临床研究进展[J]. 王光演,牛志宏,冯云. 生殖与避孕. 2014(06)
[3]人未成熟卵母细胞培养体系研究进展[J]. 姜李乐,韦多,张翠莲. 生殖与避孕. 2014(05)
[4]EGF通过PI3K/AKT通路介导小鼠卵巢颗粒细胞增殖[J]. 马会明,黑常春,张永芳,蒲静,于佳,孙苗,张宁,曹秀琴,冯秀珍,马苗苗,裴秀英,王燕蓉. 宁夏医科大学学报. 2014(05)
[5]卵丘细胞对卵母细胞成熟、受精和胚胎发育的影响试验[J]. 石俊松,罗绿花,周荣,麦然标,周秀,余婉娴,李紫聪,吴珍芳. 广东畜牧兽医科技. 2014(01)
[6]GLUT1的研究进展[J]. 俞晓燕,孙子林. 现代中西医结合杂志. 2012(30)
[7]人卵丘细胞与卵母细胞发育及成熟的关系[J]. 黄鑫,郝翠芳. 生殖与避孕. 2012(08)
[8]猪卵母细胞体外成熟的研究进展[J]. 刘晓辉,郎洪彦,金海国,罗晓彤,刘铮,王晓阳. 黑龙江动物繁殖. 2011(04)
[9]牛胚胎发育早期MnSOD,Glut-1,Hsp70,IGF-Ⅱ,IFN-t基因表达差异的研究[J]. 孙美玉,陈静波,毋状元,郑新宝,董红,霍飞. 草食家畜. 2011(01)
[10]猪孤雌胚胎体外培养影响因素[J]. 张震,王钦,薛林涛,张家庆,蒋如明. 中国兽医学报. 2009(04)
硕士论文
[1]猪卵母细胞体外成熟及胚胎培养的相关研究[D]. 侯文文.安徽农业大学 2009
本文编号：3004351
【文章来源】：陕西师范大学陕西省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：55 页
【学位级别】：硕士
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摘要
Abstract
英文缩写对照表
第1章 前言
1.1 猪卵母细胞体外成熟影响因素研究进展
1.1.1 卵巢的采集及转运对卵母细胞体外成熟培养效果的影响
1.1.2 卵母细胞的收集方法对卵母细胞体外成熟培养效果的影响
1.1.3 不同培养基配方对卵母细胞体外成熟培养效果的影响
1.1.4 培养条件对卵母细胞体外成熟培养效果的影响
1.2 猪孤雌胚胎体外发育的研究进展
1.2.1 孤雌激活方法对猪孤雌胚胎体外发育的影响
1.2.2 卵母细胞的卵龄对猪孤雌胚胎体外发育的影响
1.2.3 培养条件对猪孤雌胚胎体外发育的影响
1.3 基因CDX2、GLUT1、HSP70和ploy A的功能及其对卵母细胞体外发育影响的可能性
1.3.1 CDX2基因
1.3.2 GLUT1基因
1.3.3 HSP70基因
1.4 本研究的目的和意义
第2章 EGF对猪卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎发育的影响
2.1 材料试剂
2.1.1 主要的仪器及耗材
2.1.2 主要试剂
2.2 实验方法
2.2.1 猪卵母细胞的采集和体外成熟培养
2.2.2 卵母细胞的孤雌激活
2.3 实验结果
2.4 讨论
第3章 LIF对猪卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎发育的影响
3.1 材料试剂
3.1.1 主要的仪器及耗材
3.1.2 主要试剂
3.2 实验方法
3.2.1 猪卵母细胞的采集和体外成熟培养
3.2.2 孤雌激活
3.3 结果
3.3.1 比较成熟培养基中添加不同浓度LIF对卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎体外发育的影响
3.3.2 比较胚胎培养基中添加不同浓度的LIF对孤雌胚胎体外发育的影响
3.3.3 比较成熟培养基及胚胎培养基中均添加不同浓度的LIF对孤雌胚胎体外发育的影响
3.4 讨论
第4章 卵丘细胞对猪卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎发育的影响
4.1 材料试剂
4.1.1 主要的仪器及耗材
4.1.2 主要试剂
4.2 试验方法
4.2.1 猪卵母细胞的采集和体外成熟培养
4.2.2 孤雌激活
4.3 实验结果
4.4 讨论
第5章 基因GLUT1、CDX2、HSP70和ploy A的表达分析
5.1 材料试剂
5.1.1 主要的仪器设备
5.1.2 主要试剂
5.2 试验方法
5.2.1 实验方案
5.2.2 实验材料的准备
5.2.3 RNA的提取
5.2.4 cDNA第一链的合成
5.2.5 实时荧光定量PCR进行基因表达的分析
5.3 实验结果
5.3.1 基因GLUT1、CDX2、HSP70和ploy A在不同浓度LIF处理后的成熟卵母细胞间的表达
5.3.2 基因GLUT1、CDX2、HSP70和ployA在卵母细胞及孤雌胚胎不同发育阶段的表达
5.4 讨论
结论
参考文献
致谢
攻读硕士学位期间的发表文章
【参考文献】：
期刊论文
[1]卵丘细胞对猪卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎体外发育的影响[J]. 岑文,华再东,郑新民,肖红卫,张立苹,吴民耀. 中国畜牧兽医. 2015(03)
[2]表皮生长因子样因子在LH峰效应中的作用及临床研究进展[J]. 王光演,牛志宏,冯云. 生殖与避孕. 2014(06)
[3]人未成熟卵母细胞培养体系研究进展[J]. 姜李乐,韦多,张翠莲. 生殖与避孕. 2014(05)
[4]EGF通过PI3K/AKT通路介导小鼠卵巢颗粒细胞增殖[J]. 马会明,黑常春,张永芳,蒲静,于佳,孙苗,张宁,曹秀琴,冯秀珍,马苗苗,裴秀英,王燕蓉. 宁夏医科大学学报. 2014(05)
[5]卵丘细胞对卵母细胞成熟、受精和胚胎发育的影响试验[J]. 石俊松,罗绿花,周荣,麦然标,周秀,余婉娴,李紫聪,吴珍芳. 广东畜牧兽医科技. 2014(01)
[6]GLUT1的研究进展[J]. 俞晓燕,孙子林. 现代中西医结合杂志. 2012(30)
[7]人卵丘细胞与卵母细胞发育及成熟的关系[J]. 黄鑫,郝翠芳. 生殖与避孕. 2012(08)
[8]猪卵母细胞体外成熟的研究进展[J]. 刘晓辉,郎洪彦,金海国,罗晓彤,刘铮,王晓阳. 黑龙江动物繁殖. 2011(04)
[9]牛胚胎发育早期MnSOD,Glut-1,Hsp70,IGF-Ⅱ,IFN-t基因表达差异的研究[J]. 孙美玉,陈静波,毋状元,郑新宝,董红,霍飞. 草食家畜. 2011(01)
[10]猪孤雌胚胎体外培养影响因素[J]. 张震,王钦,薛林涛,张家庆,蒋如明. 中国兽医学报. 2009(04)
硕士论文
[1]猪卵母细胞体外成熟及胚胎培养的相关研究[D]. 侯文文.安徽农业大学 2009
本文编号：3004351
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