Galectin-3在仔猪肠道发育及肠上皮细胞更新变化中的表达分析
发布时间：2021-01-28 16:31
Galectin-3是半乳糖凝集素家族的重要成员之一,具有调节细胞增殖,分化和凋亡等多效生物学功能。然而,关于仔猪galectin-3的报道很少,尤其是galectin-3在断奶仔猪肠道发育过程中的表达模式。本试验的研究目的是探究galectin-3在断奶仔猪肠上皮细胞（IECs）发育和更新中的表达模式和作用。该试验选取24头21日龄杜х长х大三元杂交断奶仔猪,在断奶后0、1、3、7天随机选取6头进行屠杀采样,并收集肠道等组织样品用于后续实验分析。主要结果如下:1)克隆出Sus scrofa galectin-3基因全长cDNA。通过核苷酸序列分析证明galectin-3基因可编码241个氨基酸。2)在空肠中,断奶后第0天（D0）和第3天（D3）galectin-3蛋白质和mRNA表达水平高于第1天（D1）和第7天（D7）。相反,在十二指肠和回肠中,第1天（D1）和第7天（D7）galectin-3表达则高于D0和D3。3)galectin-3免疫组织化学分析显示,绒毛区域galectin-3的表达显著高于隐窝区域,表明galectin-3可能对断奶仔猪肠上皮细胞更新有重要作用。4)细...
【文章来源】：湖南师范大学湖南省 211工程院校
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
半乳糖凝集素CRDs的超二级结构
硕士学位论文水平之间的相关性。事实上，galectin-3 与 β-catenin 具有高度的结构相似性，包括存在糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）磷酸化的共有序列。此外，与 Wnt 结合的调节蛋白 Axin 也识别并与 galectin-3 复合[67, 68]。据报道 h-catenin-Axin 关联通过GSK3h 促进 h-catenin 磷酸化[64, 65]，而经 Shimura 团队发现 galectin-3 是 h-catenin的结合伴侣；在 Wnt 介导的信号传导过程中，gal-3-h-catenin 相互作用，可通过Axin、GSK-3h 和 CKI 调节蛋白质降解或基因转录[69]（图 1-2）。
1 克隆 galectin-3 基因及同源性分析为了探究 galectin-3 在仔猪断奶时期的动态变化及功能作用，本研究从仔猪肠道的组织中克隆了 galectin-3 cDNA 的全长序列。galectin-3 基因的全长序列由967 个核苷酸序列构成，包括 5 UTR,中间编码序列，3 UTR 和 poly(A)尾(NCBIAccession number: NM_001097501 )。galectin-3 cDNA 中鉴定出 781bp 的开放阅读框（ORF）。利用 DNAMAN 软件比对人类、猪和鼠 galectin-3 cDNA 序列，找到保守区域，设计猪 galectin-3 引物。以猪肠段 cDNA 为模板，经 PCR 扩增，得到 galectin-3 片段。再利用 ExPAsy 软件对猪的 galectin-3 氨基酸序列与鼠、人的 galectin-3 序列进行比对( 图 3-1) 。galectin-3 蛋白能编码 241 个氨基酸（aa），其氨基酸数量与其他哺乳动物相似：250aa（人）和 264aa（小鼠）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]断奶应激对仔猪的影响及防控措施[J]. 刘志伟,李东,杨永平,刘开武,方向东,阮征. 猪业科学. 2017(11)
[2]miRNAs对肠道健康的调控作用及机理[J]. 陶新,徐子伟. 动物营养学报. 2013(09)
[3]The biological stress of early weaned piglets[J]. Joy M Campbell,Joe D Crenshaw,Javier Polo. Journal of Animal Science and Biotechnology. 2013(02)
[4]垂体腺瘤中半乳糖凝集素-3的表达及其与细胞凋亡关系（英文）[J]. 黄垂学,侯永宏,刘运生. Neuroscience Bulletin. 2008(01)
[5]Axin在Wnt信号转导途径中的作用[J]. 金利华,李勤喜,叶志云. 中国生物化学与分子生物学报. 2006(04)
[6]16S rDNA技术研究新生腹泻仔猪粪样细菌区系的多样性变化[J]. 姚文,朱伟云,毛胜勇. 微生物学报. 2006(01)
[7]早期断奶仔猪的断奶应激与腹泻研究[J]. 廖晓霞,叶均安. 家畜生态学报. 2005(03)
[8]免疫应激对断奶仔猪免疫和神经内分泌激素的影响[J]. 刘玉兰,李德发,龚利敏,张文志,马丹. 中国畜牧杂志. 2004(04)
[9]超早期断奶应激对仔猪胃肠内容物pH值和微生物区系的影响[J]. 张振斌,蒋宗勇,林映才,余德谦,吴维煇,郑黎,林勇,刘炎和. 养猪. 1998(03)
本文编号：3005309
【文章来源】：湖南师范大学湖南省 211工程院校
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
半乳糖凝集素CRDs的超二级结构
硕士学位论文水平之间的相关性。事实上，galectin-3 与 β-catenin 具有高度的结构相似性，包括存在糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）磷酸化的共有序列。此外，与 Wnt 结合的调节蛋白 Axin 也识别并与 galectin-3 复合[67, 68]。据报道 h-catenin-Axin 关联通过GSK3h 促进 h-catenin 磷酸化[64, 65]，而经 Shimura 团队发现 galectin-3 是 h-catenin的结合伴侣；在 Wnt 介导的信号传导过程中，gal-3-h-catenin 相互作用，可通过Axin、GSK-3h 和 CKI 调节蛋白质降解或基因转录[69]（图 1-2）。
1 克隆 galectin-3 基因及同源性分析为了探究 galectin-3 在仔猪断奶时期的动态变化及功能作用，本研究从仔猪肠道的组织中克隆了 galectin-3 cDNA 的全长序列。galectin-3 基因的全长序列由967 个核苷酸序列构成，包括 5 UTR,中间编码序列，3 UTR 和 poly(A)尾(NCBIAccession number: NM_001097501 )。galectin-3 cDNA 中鉴定出 781bp 的开放阅读框（ORF）。利用 DNAMAN 软件比对人类、猪和鼠 galectin-3 cDNA 序列，找到保守区域，设计猪 galectin-3 引物。以猪肠段 cDNA 为模板，经 PCR 扩增，得到 galectin-3 片段。再利用 ExPAsy 软件对猪的 galectin-3 氨基酸序列与鼠、人的 galectin-3 序列进行比对( 图 3-1) 。galectin-3 蛋白能编码 241 个氨基酸（aa），其氨基酸数量与其他哺乳动物相似：250aa（人）和 264aa（小鼠）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]断奶应激对仔猪的影响及防控措施[J]. 刘志伟,李东,杨永平,刘开武,方向东,阮征. 猪业科学. 2017(11)
[2]miRNAs对肠道健康的调控作用及机理[J]. 陶新,徐子伟. 动物营养学报. 2013(09)
[3]The biological stress of early weaned piglets[J]. Joy M Campbell,Joe D Crenshaw,Javier Polo. Journal of Animal Science and Biotechnology. 2013(02)
[4]垂体腺瘤中半乳糖凝集素-3的表达及其与细胞凋亡关系（英文）[J]. 黄垂学,侯永宏,刘运生. Neuroscience Bulletin. 2008(01)
[5]Axin在Wnt信号转导途径中的作用[J]. 金利华,李勤喜,叶志云. 中国生物化学与分子生物学报. 2006(04)
[6]16S rDNA技术研究新生腹泻仔猪粪样细菌区系的多样性变化[J]. 姚文,朱伟云,毛胜勇. 微生物学报. 2006(01)
[7]早期断奶仔猪的断奶应激与腹泻研究[J]. 廖晓霞,叶均安. 家畜生态学报. 2005(03)
[8]免疫应激对断奶仔猪免疫和神经内分泌激素的影响[J]. 刘玉兰,李德发,龚利敏,张文志,马丹. 中国畜牧杂志. 2004(04)
[9]超早期断奶应激对仔猪胃肠内容物pH值和微生物区系的影响[J]. 张振斌,蒋宗勇,林映才,余德谦,吴维煇,郑黎,林勇,刘炎和. 养猪. 1998(03)
本文编号：3005309
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