猪带绦虫烯醇化酶基因的克

发布时间：2021-01-30 11:46

　　猪囊尾蚴是带科带属的猪带绦虫（Taenia solium）幼虫，常见于肌肉组织，引起猪和人的囊虫病，进而影响养猪业的发展和人类的健康。由于寄生环境的影响，猪带绦虫以糖酵解为主，进行物质和能量代谢。烯醇化酶（enolase，ENO，酶分类编号：EC4.2.1.11）是一种多功能蛋白，广泛存在于许多生物体内，不仅作为糖酵解酶影响细胞的物质和能量代谢，又具有参与病原体入侵宿主、免疫刺激蛋白及热激蛋白等多种功能。因此，本文对enolase进行了克隆、表达及功能的研究。取得如下结果：1.以猪带绦虫的cDNA为模板，首次扩增获得猪带绦虫enolase基因。Real-time PCR结果表明，enolase在成虫期表达量高。利用生物信息学软件，对该基因进行序列分析。序列分析表明该基因ORF大小为1302bp，编码433个氨基酸，理论分子质量为46.56ku，分析了猪带绦虫烯醇化酶可能的纤溶酶原结合基序（238GKVKIGMDVAASEFYQDGKYNLDF261）。2.成功构建了重组表达质粒pET-30a（+）-ENO，并获得了以可溶性形式高效表达的重组蛋白rTsENO，大小约为53ku。Weste... 

【文章来源】：新疆农业大学新疆维吾尔自治区

【文章页数】：67 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

猪带绦虫生活史（引自GARCIAHH等[1]

选择性翻译的结果，可抑制 Myc 的转录[60]。另外，enolase 可作的研究中，发现拟南芥 LOS2 是负责低温应答基因转录的部位，通编码 enolase 的基因上，显示 LOS2 突变体可损害低温诱导下集南芥 enolase 可结合、抑制并调节 STZ/ZAT10 的基因启动子，该迅速且短暂诱导的锌指转录因子[62]。

表面表达的 enolase 可能源于 enolase 的分泌或者再结合到表面的未是存在于病原体表面的纤溶酶原结合蛋白，这种相互作用可以促使纤参与入侵宿主的过程[65, 72]。在蠕虫中，如牛血吸虫体壁、肝片吸虫盘尾丝虫的一些组织中的 enolase 也可以作为纤溶酶原结合蛋白[28, 39酶原结合特性提示其可以参与组织入侵和致病过程。在广泛的病理及的纤溶酶原参与细胞外蛋白水解作用和血栓降解。在肿瘤细胞转移过lase 可以与细胞的骨架系统相互作用，为促进肿瘤细胞转移提供 AT激活胶原酶原为胶原酶，并降解纤维蛋白以及包括纤连蛋白和层黏蛋组分，包括组织修复、伤口愈合、正常和恶性细胞在体内的传播以及表明，某些哺乳动物细胞以及病原生物可能利用相同的策略将 enol结合并进一步激活血纤维溶酶原，最终导致组织入侵，并在体内传与与病原生物侵染过程的机理见图 1-3。

【参考文献】：
期刊论文
[1]快速检测猪囊虫抗体的金免疫层析法的建立及应用[J]. 唐雨德,周东明,陆承平.  中国人兽共患病杂志. 2003(05)
[2]猪囊尾蚴病免疫治疗研究[J]. 张京,张中庸,李靓如,马春艳,吴莲英.  中国人兽共患病杂志. 2000(06)

博士论文
[1]表达Tsol18抗原的口服减毒鼠伤寒沙门氏菌重组活载体疫苗的构建及其免疫学研究[D]. 丁军涛.中国农业科学院 2008
[2]带科主要绦虫45W和14ku/18ku基因变异的研究[D]. 贾万忠.中国农业科学院 2003



本文编号：3008841