血清4型Ⅰ亚群禽腺病毒的分离鉴定及其卵黄抗体的研制与应用
发布时间：2021-02-03 10:58
禽类心包积水综合征（Hydropericardium syndrome,HPS）又称安卡拉病（Angara disease,AD）,是由血清4型Ⅰ亚群禽腺病毒（Fowl Adenovirus serotype 4,FadV-4）引起禽类以心包积液为主要特征的一种高度接触性、致病性传染病。2014年以来,该病从我国山东、江苏、广东等沿海地区逐步向河北、河南、山西、安徽、湖北等内陆省份陆续扩散,给我国养禽业造成了巨大的经济损失。本研究对山东某鸡场临床诊断为疑似FadV-4感染的病死鸡进行了病毒分离与鉴定试验,获得了FadV-4分离毒株,并利用该分离毒株制备了油乳剂灭活疫苗及高免卵黄抗体,并进行临床实验效果评估。获得了以下结果:（1）针对送检临床疑似病料,采用FadV-Ⅰ特异性引物进行PCR检测,结果为阳性,确诊为安卡拉病病毒。（2）将临床病料接种SPF鸡胚进行动物回归试验,可引起鸡胚规律性死亡以及心包积液等典型病变,ELD50为10-6.78/0.1 mL。取上清,经血凝性检测分离株病毒对鸡红细胞无凝集性。采用Hexon基因的特异性引物进行分离株...
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：63 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
PCR扩增结果
图 2-2 鸡胚病变观察结果Fig.2-2 Results of observation of the disease of chicken embryo2.3.3 分离毒株血凝性的测定结果凝集性试验结果显示 SD 株对 1 %鸡红细胞无凝集性。2.3.4 分离毒株病毒含量的测定结果各稀释度的病变情况如表2-1所示，按Reed-Muench法计算SD株病毒对SPF鸡胚的ELD50为10-6.78/0.1 mL，即10-7.78/mL，SD株病毒具有较高的病毒含量。表2-1 病毒含量的测定结果Table 2-1 Results of the determination of virus content稀释度Dilutiondegree接种鸡胚数（枚）Inoculation of the number ofchicken embryos (pieces)死亡鸡胚数（枚）Number of dead chickenembryos (pieces)未死亡鸡胚数（枚）Number of immaturechicken embryos (pieces10-15 5 0
果毒株经FadV-Ⅰ Hexon基因特，与预期大小相符。将其回收录的34株FadV-Ⅰ的Hexon基因的系统进化树（图2-4）及SD株分离毒株的Hexon基因与中，其与23株FadV-4血清型毒株处于不同分支中，其与11株F，进而从分子水平证实SD株M 1 2
【参考文献】：
期刊论文
[1]禽腺病毒血清4型河南株的分离鉴定及对鸡胚致病性的研究[J]. 李京帅,李银聚,张春杰,程相朝,吴庭才,余祖华,贾艳艳,李静,廖成水. 中国兽医科学. 2018(04)
[2]卵黄抗体的结构与功能其在人及动物疾病中应用进展[J]. 余运运,孙丽娜,孙万邦. 中国人兽共患病学报. 2018(01)
[3]兽用疫苗佐剂的研究进展[J]. 邓碧华,朱俊,马鹤毓,徐海,卢宇. 畜牧兽医科学(电子版). 2017(12)
[4]血清4型禽腺病毒纤突蛋白的真核表达及其免疫反应性[J]. 王伟康,梁广成,管雪冰,张俊,王萍,张建军,郑文铝,邵红霞,秦爱建,叶建强. 中国家禽. 2017(23)
[5]AIV、NDV和安卡拉病毒多重PCR检测方法的建立及应用[J]. 张曼,韩飞. 西北农林科技大学学报(自然科学版). 2018(02)
[6]禽安卡拉病研究进展[J]. 常超越,吴同垒,李蕴玉,张建文,张召兴,张志强,贾青辉,李佩国. 安徽农业科学. 2017(33)
[7]鸡血清4型禽腺病毒与HH9亚型禽流感病毒亚型禽流感病毒、新城疫病毒混合感染的鉴定[J]. 梅梅,陆吉虎,张雪花,唐应华,侯继波. 中国家禽. 2017(22)
[8]西南部分地区Ⅰ群禽腺病毒的分子流行病学调查及致病性研究[J]. 姚克昌,刘月月,游国进,李淑芸,夏静,何肖,李雯雯,杜莉静,韩新锋,黄勇. 浙江农业学报. 2017(11)
[9]动物疾病防治中卵黄抗体的应用初探[J]. 温馨. 中国动物保健. 2017(11)
[10]禽腺病毒4型抗体间接ELISA检测方法的建立[J]. 刘延珂,万文妍,王贝贝,吴艳阳,杨东东,高冬生,李永涛,王新卫,常洪涛,陈陆,王川庆,赵军. 中国预防兽医学报. 2017(11)
硕士论文
[1]禽腺病毒血清4型的分离鉴定及环介导等温扩增技术诊断方法的建立[D]. 白元斌.西北农林科技大学 2017
[2]血清4型禽腺病毒的分离、致病性及其抗体间接免疫荧光方法的初步建立[D]. 梁广成.扬州大学 2017
本文编号：3016387
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：63 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
PCR扩增结果
图 2-2 鸡胚病变观察结果Fig.2-2 Results of observation of the disease of chicken embryo2.3.3 分离毒株血凝性的测定结果凝集性试验结果显示 SD 株对 1 %鸡红细胞无凝集性。2.3.4 分离毒株病毒含量的测定结果各稀释度的病变情况如表2-1所示，按Reed-Muench法计算SD株病毒对SPF鸡胚的ELD50为10-6.78/0.1 mL，即10-7.78/mL，SD株病毒具有较高的病毒含量。表2-1 病毒含量的测定结果Table 2-1 Results of the determination of virus content稀释度Dilutiondegree接种鸡胚数（枚）Inoculation of the number ofchicken embryos (pieces)死亡鸡胚数（枚）Number of dead chickenembryos (pieces)未死亡鸡胚数（枚）Number of immaturechicken embryos (pieces10-15 5 0
果毒株经FadV-Ⅰ Hexon基因特，与预期大小相符。将其回收录的34株FadV-Ⅰ的Hexon基因的系统进化树（图2-4）及SD株分离毒株的Hexon基因与中，其与23株FadV-4血清型毒株处于不同分支中，其与11株F，进而从分子水平证实SD株M 1 2
【参考文献】：
期刊论文
[1]禽腺病毒血清4型河南株的分离鉴定及对鸡胚致病性的研究[J]. 李京帅,李银聚,张春杰,程相朝,吴庭才,余祖华,贾艳艳,李静,廖成水. 中国兽医科学. 2018(04)
[2]卵黄抗体的结构与功能其在人及动物疾病中应用进展[J]. 余运运,孙丽娜,孙万邦. 中国人兽共患病学报. 2018(01)
[3]兽用疫苗佐剂的研究进展[J]. 邓碧华,朱俊,马鹤毓,徐海,卢宇. 畜牧兽医科学(电子版). 2017(12)
[4]血清4型禽腺病毒纤突蛋白的真核表达及其免疫反应性[J]. 王伟康,梁广成,管雪冰,张俊,王萍,张建军,郑文铝,邵红霞,秦爱建,叶建强. 中国家禽. 2017(23)
[5]AIV、NDV和安卡拉病毒多重PCR检测方法的建立及应用[J]. 张曼,韩飞. 西北农林科技大学学报(自然科学版). 2018(02)
[6]禽安卡拉病研究进展[J]. 常超越,吴同垒,李蕴玉,张建文,张召兴,张志强,贾青辉,李佩国. 安徽农业科学. 2017(33)
[7]鸡血清4型禽腺病毒与HH9亚型禽流感病毒亚型禽流感病毒、新城疫病毒混合感染的鉴定[J]. 梅梅,陆吉虎,张雪花,唐应华,侯继波. 中国家禽. 2017(22)
[8]西南部分地区Ⅰ群禽腺病毒的分子流行病学调查及致病性研究[J]. 姚克昌,刘月月,游国进,李淑芸,夏静,何肖,李雯雯,杜莉静,韩新锋,黄勇. 浙江农业学报. 2017(11)
[9]动物疾病防治中卵黄抗体的应用初探[J]. 温馨. 中国动物保健. 2017(11)
[10]禽腺病毒4型抗体间接ELISA检测方法的建立[J]. 刘延珂,万文妍,王贝贝,吴艳阳,杨东东,高冬生,李永涛,王新卫,常洪涛,陈陆,王川庆,赵军. 中国预防兽医学报. 2017(11)
硕士论文
[1]禽腺病毒血清4型的分离鉴定及环介导等温扩增技术诊断方法的建立[D]. 白元斌.西北农林科技大学 2017
[2]血清4型禽腺病毒的分离、致病性及其抗体间接免疫荧光方法的初步建立[D]. 梁广成.扬州大学 2017
本文编号：3016387
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