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超滤浓缩工艺优化研究

发布时间:2021-02-04 22:49
  超滤浓缩技术是去除原液杂蛋白,收集目标蛋白的一种有效的手段。超滤浓缩是以切向流为动力,利用分子筛原理进行膜分离的过程[1]。是以一定的压力为条件,溶剂及小分子量的透过液透过对称微孔膜,而直径较大的大分子物质被截流,截流部分也就是浓缩液,浓缩液返回至原料液,原料液的浓度便会升高,控制好剪切力反复进行,实现小分子量分离的目的,去除杂蛋白及特异性蛋白保留目标蛋白,达到对原料液浓缩纯化的目的。 

【文章来源】:吉林畜牧兽医. 2020,41(10)

【文章页数】:3 页

【部分图文】:

超滤浓缩工艺优化研究


不同浓缩倍数纯化结果

温度,杂蛋白,去除率


表2 温度对杂蛋白去除率、146 S、浓缩时间测定结果 温度/℃ 原毒样杂蛋白含量μg/mL 浓缩样杂蛋白含量μg/mL 杂蛋白去除率% 原毒样146 S 浓缩样146 S 146 S损耗率% 浓缩倍数 浓缩时间/min 压力/bar 37 3 901 2 394 89.77 2.4 11.5 20.14 6 41 0.5 35 4 013 2 462 89.77 2.6 13 16.67 6 42 0.5 32 3 921 2 438 89.63 2.2 11.4 13.64 6 42 0.5 30 3 684 2 376 89.25 2.3 12.4 10.14 6 42 0.5 28 3 721 2 441 89.07 2.8 15.6 7.14 6 43 0.5 26 3 642 2 416 88.94 2.3 13.3 3.62 6 41 0.5 24 3 724 2 988 86.62 2.2 12.7 3.79 6 42 0.5由图2可看出,温度的改变,对浓缩时间无明显影响,温度降低对杂蛋白去除率影响不大。由于在温度高的情况下,病毒活性高,剪切力对146 S的损害较大,因此,随着料液温度的降低,146 S损失逐渐降低。但是温度过低,容易造成超滤膜表面“凝胶层”的形成,在24 ℃时,杂蛋白去除率有降低趋势。而且该情况下继续浓缩,也极易造成膜透过量下降,对146 S损耗影响比较明显,综合可得出26 ℃是最适宜的浓缩温度。

压力,杂蛋白,去除率,损耗率


表3 压力对杂蛋白去除率、146 S、浓缩时间测定结果 压力/bar 原毒样杂蛋白含量μg/mL 浓缩样杂蛋白含量μg/mL 杂蛋白去除率% 原毒样146 S 浓缩样146 S 146 S损耗率% 浓缩倍数 浓缩时间/min 温度/℃ 0.5 3 654 2 366 89.21 2.7 15.6 3.70 6 42 26 0.6 3 984 2 408 89.93 2.6 15 3.63 6 37 26 0.7 3 894 2 378 89.80 2.7 15.6 3.70 6 33 26 0.8 3 901 2 244 90.41 2.4 12.9 10.42 6 30 26 0.9 3 789 2 066 90.91 2.5 13 13.33 6 28 26由图3可看出,压力的改变,对杂蛋白去除率无明显变化,随着压力的增加,料液切向流速增大,因而不会造成膜堵塞,杂蛋白去除率会有所增加,同时,浓缩时间也会逐渐减短。但是,在超滤浓缩的过程中,料液切向流速的增加,也会加大膜表面的剪切力,使得146 S有一定的损耗[4]。结合图中数据可以看出,在压力为0.8 bar时,146 S损耗率明显上升,因此,为了降低146 S的损耗,最适宜的超滤浓缩压力为0.7 bar。

【参考文献】:
期刊论文
[1]口蹄疫灭活疫苗的生产工艺概述[J]. 厍大亮,李冬.  中国兽药杂志. 2011(01)
[2]超滤技术在蛋白质纯化中的应用[J]. 张笑颜,张庆义,吴永刚.  中国药师. 2004(03)
[3]膜分离技术及其应用研究进展[J]. 孙福强,崔英德,刘永,杨少华,陈循军.  化工科技. 2002(04)

硕士论文
[1]牛O型口蹄疫高倍浓缩灭活疫苗的研制[D]. 王家福.中国农业大学 2005



本文编号:3019061

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